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发布时间:2026/8/26 17:28:30 阅读次数:35
石蜡切片组织PARP蛋白表达免疫荧光检测试剂盒产品说明书
主要用途
石蜡切片组织PARP蛋白表达免疫荧光检测试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法和抗PARP多克隆抗体以及荧光染料缀合物二抗的应用,通过荧光显微镜分析存档中的石蜡包埋的组织切片中PARP表达状态的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。主要适用于各种动物(大鼠和小鼠)和人体组织石蜡包埋切片的PARP分析。广泛用于细胞生物学的研究。产品严格无菌,即到即用,反应敏感,操作简捷,性能稳定,荧光清晰。
技术背景
多聚ADP核糖聚合酶-1(Poly (ADP-ribose) Polymerase;PARP;EC 2.4.2.30)是一种锌依赖性核酶,广泛存在于真核细胞中。PARP家属由18个成员,其中6个已经被证实,包括PARP-1(占90%)、PARP-2、PARP-3、PARP-4(VPARP)、PARP-5a/5b(tankyrase)等。PARP蛋白由4个结构域构成:DNA结合、切离、自修饰(automodification)、催化等结构域。其功能在于特异性地识别DNA损伤产生的单链或双链DNA断裂,并与之结合而激活,催化将烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide;NAD)转化成烟酰胺(nicotinamide)和多聚ADP核糖分枝聚合体(branched polymers of various poly (ADP-ribose))的反应,由此引导各种DNA修复蛋白聚集到损伤部位,实施修复,同时调节染色质结构形成(chromatin structure formation)、 细胞分化、繁殖、发育、凋亡、基因表达等,以及对于心脑缺血的反应和肿瘤恶变的作用。抑制PARP活性,可以防止心衰、中风、败血症等引起的组织损害。通常使用免疫组化或免疫荧光的方法,检测其表达水平。
产品内容
脱蜡液(Reagent A) 毫升(自备)
补水液A(Reagent B) 毫升
补水液B(Reagent C) 毫升
补水液C(Reagent D) 毫升
补水液D(Reagent E) 毫升
清理液(Reagent F) 毫升
修复液(Reagent G) 毫升
封阻液(Reagent H) 毫升
抗体液(Reagent I) 毫升
染色液(Reagent J) 毫升
抗淬灭液(Reagent K) 微升
强化液(Reagent L) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存修复液(Reagent G)、封阻液(Reagent H)、抗体液(Reagent I)、染色液(Reagent J)和抗淬灭液(Reagent K)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;抗体液(Reagent I)和染色液(Reagent J)严禁反复冻融; 染色液(Reagent J)和抗淬灭液(Reagent K)避免光照;有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管:用于配制重染工作液的容器
盖玻片:用于封片孵育
小型染色缸:用于脱蜡的操作
烘箱:用于脱蜡处理
(共聚焦)荧光显微镜:用于组织细胞荧光观察
实验步骤
一、 脱蜡处理
1. 取出10片待测的10微米厚的石蜡包埋的组织切片
2. (选择步骤)放进80℃烘箱,孵育30分钟
3. (选择步骤)室温下静置15分钟
4. 按下表依次放进小染色缸里孵育
| 染色缸 | 孵育时间 |
| xx毫升脱蜡液(Reagent A) | 15分钟 |
| xx毫升脱蜡液(Reagent A) | 15分钟 |
| xx毫升脱蜡液(Reagent A) | 15分钟 |
| xx毫升补水液A(Reagent B) | 3分钟 |
| xx毫升补水液B(Reagent C) | 3分钟 |
| xx毫升补水液C(Reagent D) | 3分钟 |
| xx毫升补水液D(Reagent E) | 3分钟 |
5. 小心移去切片上的补水液D(Reagent E)
6. 小心加上xx微升清理液(Reagent F)在切片上,铺满整个切片样品表面
7. 室温下孵育5分钟
8. 小心移去切片上的清理液(Reagent F)
二、样品预处理
实验开始前,将-20℃冰箱里试剂盒中的试剂置入冰槽里融化。然后进行下列操作:
1. (选择步骤)将切片置于100毫升烧杯,加入xx毫升强化液(Reagent L)
2. (选择步骤)放进微波炉里加热5分钟:其中15秒煮沸后,间隙15秒后再煮沸,直至5分钟
3. (选择步骤)室温下,冷却20分钟
4. 加入xx微升修复液(Reagent G)在切片上,铺满整个切片样品表面
5. 室温下孵育5分钟
6. 小心抽去修复液(Reagent G)
7. 空气中晾干
8. 加入xx微升清理液(Reagent F)在切片上,铺满整个切片样品表面
9. 室温下孵育5分钟
10. 小心抽去清理液(Reagent F)
11. 加入xx微升封阻液(Reagent H)在切片上,铺满整个切片样品表面
12. 室温下孵育60分钟
13. 小心抽去封阻液(Reagent H)
三、 样品染色处理
1. 加入xx微升抗体液(Reagent I)在切片上,铺满整个切片样品表面
2. 盖上盖玻片,室温下孵育2至16小时(注意:避免气泡;参见注意事项8)
3. 小心移去盖玻片,抽去抗体液(Reagent I)
4. 加入xx微升清理液(Reagent F)在切片上,铺满整个切片样品表面
5. 室温下孵育5分钟
6. 小心抽去清理液(Reagent F)
7. 重复实验步4至6二次
8. 加入xx微升染色液(Reagent J)在切片上,铺满整个切片样品表面
9. 室温下孵育30分钟,避免光照(注意:避免气泡)
10. 小心抽去染色液(Reagent J)
11. 加入xx微升清理液(Reagent F)在切片上,铺满整个切片样品表面
12. 室温下孵育5分钟
13. 小心抽去清理液(Reagent F)
14. 重复实验步11至13二次
15. 加入xx微升抗淬灭液(Reagent K)
16. 盖上盖玻片或封片
17. 即刻在(共聚焦)荧光显微镜下观察
|
| 染色液(Reagent J) |
| 荧光染料 | 异硫氰酸荧光素(FITC) |
| 荧光颜色 | 绿色 |
| 激发波长 | 488nm |
| 散发波长 | 530nm |
| 作用 | PARP显示 |
注意事项
1. 本产品为10次操作
2. 操作时须戴手套,以防污染
3. 石蜡包埋前,组织切片须用10%甲醛4℃条件下,固定16小时,否则造成样品支离破碎
4. 所有操作在室温下进行
5. 用户可以使用二甲苯替代脱蜡液(Reagent A)
6. 每次更换试剂溶液时,保持切片面基本晾干。空气中晾干状态为没有水滴,呈湿润状态,可见反光
7. 试剂溶液在切片表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满切片表面
8. 染色和重染孵育时,须避免光照
9. 抗体液(Reagent I)孵育,可以持续16小时
10. 建议染色完成后,即刻进行荧光显微镜观察
11. 本公司提供系列PARP检测试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定荧光清晰
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组份订购信息
编号 名称 规格
G&VS10204.4 石蜡切片组织PARP蛋白表达免疫荧光检测试剂盒 10次
G&VS10204.4A 脱蜡液(Reagent A) 毫升
G&VS10204.4B 补水液A(Reagent B) 毫升
G&VS10204.4C 补水液B(Reagent C) 毫升
G&VS10204.4D 补水液C(Reagent D) 毫升
G&VS10204.4E 补水液D(Reagent E) 毫升
G&VS10204.4F 清理液(Reagent F) 毫升
G&VS10204.4G 修复液(Reagent G) 毫升
G&VS10204.4H 封阻液(Reagent H) 毫升
G&VS10204.4I 抗体液(Reagent I) 毫升
G&VS10204.4J 染色液(Reagent J) 毫升
G&VS10204.4K 抗淬灭液(Reagent K) 毫升
G&VS10204.4L 强化液(Reagent L) 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS10204.1 | 细胞PARP蛋白表达细胞流式细胞仪检测试剂盒 | 10/20次 |
| G&VS10204.2 | 载玻片细胞PARP蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | 10/20次 |
| G&VS10204.3 | 冰冻切片组织PARP蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | 10/20次 |
| G&VS10204.4 | 石蜡切片组织PARP蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | 10/20次 |
| G&VS10204.5 | 载玻片细胞PARP蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | 10/20次 |
| G&VS10204.6 | 冰冻切片组织PARP蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | 10/20次 |
| G&VS10204.7 | 石蜡切片组织PARP蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | 10/20次 |
| G&VS10204.8 | 细胞PARP蛋白表达比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS10204.9 | 细胞PARP蛋白表达荧光定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS10204.10 | PARP蛋白表达西方杂交分析试剂盒 | 5次 |
| G&VS10204.11 | PARP蛋白染色质免疫沉淀(CHIP)分析试剂盒 | 10/20次 |
| G&VS10204.12 | 细胞/组织裂解悬液、血液、体液等PARP蛋白ELISA定量试剂盒 | 24/48/96次 |
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