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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶待测样品制备试剂盒产品说明书

发布时间：2026/8/26 18:45:27 阅读次数：22

3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶待测样品制备试剂盒产品说明书

主要用途

3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶待测样品制备试剂是一种旨在运用特异的去垢剂和巯基蛋白酶抑制剂，充分释放和保留酶活的样本制备的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞和组织3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶的样本制备。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，制备产量和活性皆高。

技术背景

甲戊二羟酸通路（mevalonate pathway），又称为3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶通路或甲戊二羟酸依赖性通路，是所有高等真核生物和许多细菌具有的重要的细胞代谢通路，用于体内产生二甲基丙烯焦磷酸（dimethylallyl pyrophosphate；DMAPP）和异戊二烯焦磷酸（isopentenyl pyrophosphate；IPP）作为生物大分子合成的基础，包括蛋白质异戊二烯化、细胞膜维护、激素合成、蛋白固着、蛋白糖化等。3-羟-3-甲戊二酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA reductase；HMGR；EC1.1.1.34）是控制甲戊二羟酸通路的关键的酶，调节胆固醇和类异戊二烯脂分子的产生。HMG-COA还原酶位于内质网膜上，含有8个跨膜结构域，其中活性结构域在细胞浆里。HMG-COA还原酶是许多降脂药物的靶标，包括lovastatin （Mevacor）、atorvastatin （Lipitor）、pravastatin（Pravachol）和simvastatin（Zocor）。由于HMG-COA还原酶的活性很低，为皮摩尔级，因此进行活性检测时，容易受到各种干扰，包括脂类物质、蛋白酶、以及内质网膜不溶性等因素，而影响检测，甚至难以检测得到。通过使用Brij97，充分溶解内质网膜，释放HMG-CoA还原酶，同时使用亮抑酶肽（leupeptine）和EDTA，完全抑制巯基蛋白酶（thiol protease）活性，避免样品浑浊，提高数倍的检测活性。

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

裂解液（Reagent B）毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存在－20℃冰箱里；有效保证6月

用户自备

1.5毫升离心管：用于样品保存的容器

15毫升锥形离心管：用于样品制备的容器

细胞刮脱棒：用于脱离贴壁细胞

DOUNCE匀浆器：用于组织裂解

培养箱：用于样品孵育

（微型）台式离心机：用于样品制备

实验步骤

一、细胞样品准备

1．准备好25cm²细胞培养瓶或60mm细胞培养皿的待测培养细胞（1至5 X 10⁶细胞）

2．小心加入xx毫升清理液（Reagent A），覆盖生长表面

3．小心抽去清理液

4．使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞（注意：可以使用胰酶消化）

5．加入xx毫升清理液（Reagent A），混匀细胞

6．移入到预冷的15毫升锥形离心管（注意：悬浮细胞从这一步骤开始）

7．放进4℃台式离心机离心1分钟，速度为600g

8．小心抽去上清液

9．加入xx微升裂解液（Reagent B），充分混匀

10．放进37℃培养箱孵育30分钟

11．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为12000g

12．小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管

13．移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）

14．即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作

二、组织样品制备

1．手术取出动物组织，并秤重500毫克

2．（选择步骤）放进预冷的15毫升锥形离心管

3．（选择步骤）加入xx毫升清理液（Reagent A）清洗

4．（选择步骤）抽去清理液

5．放进一个15毫升锥形离心管

6．加入xx微升裂解液（Reagent B）

7．放进DOUNCE匀浆器，匀化40次

8．转移到2毫升离心管

9．放进37℃培养箱孵育30分钟

10．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为12000g

11．小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管

12．移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）

13．即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作

注意事项

1．本产品为20次操作

2．本产品适合于各种脂肪酸和胆固醇代谢和调节的实验

3．操作时，须戴手套

4．制备样品可以检测到活性10皮摩尔/分钟毫克

5．制备样品最低50微克可以用于活性检测

6．制备样品较之常规制备方法，可以提高检测活性2.5倍以上

7．样品检测，建议使用细胞3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶活性直接光度法定量检测试剂盒-G&VS50137.1

8．本公司提供系列甲戊二羟酸（MEVALONATE）通路分析试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定制备产量和活性皆高

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS10187 3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶待测样品制备试剂盒 20次

G&VS10187A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS10187B 裂解液（Reagent B）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS50137.1	细胞3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶活性直接光度法定量检测试剂盒	20次
G&VS50137.2	组织3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶活性直接光度法定量检测试剂盒	20次
G&VS50137.3	血液3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶活性直接光度法定量检测试剂盒	20次
G&VS50358.1	细胞3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶活性间接比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS50358.2	组织3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶活性间接比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS50358.3	血液3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶活性间接比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS10187	3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶待测样品制备试剂盒	20次