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发布时间：2026/8/27 10:01:17 阅读次数：39
微管（microtubules）荧光染色试剂盒产品说明书
主要用途
微管（microtubules）荧光染色试剂是一种旨在运用抗α-微管蛋白单克隆抗体以及荧光染料缀合物二抗，通过荧光显微镜分析微管形态的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。主要适用于各种活体细胞（动物、人体等）的微管形态分析。产品严格无菌，即到即用，反应敏感，操作简捷，性能稳定，荧光清晰。
技术背景
微管（microtubules）是细胞骨架的成分之一，构成细胞浆中的基本结构网络，在有丝分裂、胞质分裂、囊泡转运方面具有重要作用。微管是微管蛋白（tubulin）的多聚体。微管蛋白分成5种亚型：α、β、γ、δ、ε。其中α和β微管蛋白形成异源二聚体，进而多重聚合成微管纤维（filaments）。运用抗α-微管蛋白单克隆抗体可以观察微管的分布。
产品内容
清理液（Reagent A） 毫升
稳定液（Reagent B） 毫升
固着液（Reagent C） 毫升
封阻液（Reagent D） 毫升
抗体液（Reagent E） 毫升
染色液（Reagent F） 毫升
复染液（Reagent G） 毫升
抗淬灭液（Reagent H） 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存固着液（Reagent C）、封阻液（Reagent D）、抗体液（Reagent E）、染色液（Reagent F）、复染液（Reagent G）和抗淬灭液（Reagent H）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；抗体液（Reagent E）和染色液（Reagent F）严禁反复冻融；染色液（Reagent F）、复染液（Reagent G）和抗淬灭液（Reagent H）避免光照；有效保证6月
用户自备
盖玻片：用于封片孵育
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（G&VS12024）：用于细胞脱离
完全细胞培养液（G&VS12052）：用于中和胰蛋白酶的处理
15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器
台式离心机：用于样品操作
培养箱：用于细胞染色孵育
荧光（共聚焦）显微镜：用于细胞荧光观察
实验步骤
方法一：载玻片贴壁细胞检测
实验开始前，将－20℃冰箱里试剂盒中的试剂置入冰槽里融化。然后进行下列操作：
1． 准备1个载玻片的细胞样品（注意：载玻片须进行多聚赖氨酸或多聚鸟氨酸（polyornithine）处理）
2． 加上xx微升清理液（Reagent A），铺满样品表面
3． 小心抽去清理液（Reagent A）
4． 加上xx微升稳定液（Reagent B），铺满样品表面
5． 室温下孵育30秒
6． 小心抽去稳定液（Reagent B）
7． 加上xx微升－20℃预冷的固着液（Reagent C）
8． 置于－20℃冰箱里孵育3分钟
9． 小心抽去固着液（Reagent C）
10． 空气中晾干
11． 加上xx微升清理液（Reagent A），铺满载玻片样品表面
12． 室温下孵育5分钟
13． 小心抽去清理液（Reagent A）
14． 重复实验步11至13二次
15． 加上xx微升封阻液（Reagent D），铺满载玻片样品表面
16． 置于37℃培养箱里孵育10分钟，保持湿润
17． 小心抽去封阻液（Reagent D）
18． 加上xx微升抗体液（Reagent E），铺满载玻片样品表面
19． 盖上盖玻片，置于37℃培养箱里孵育30分钟（注意：避免气泡）
20． 小心移去盖玻片，抽去抗体液（Reagent E）
21． 加上xx微升清理液（Reagent A），铺满载玻片样品表面
22． 置于37℃培养箱里孵育5分钟，保持湿润
23． 小心抽去清理液（Reagent A）
24． 重复实验步21至23二次
25． 加上xx微升染色液（Reagent F），铺满载玻片样品表面
26． 盖上新的盖玻片，置于37℃培养箱里孵育30分钟，避免光照（注意：避免气泡）
27． 小心移去盖玻片，抽去染色液（Reagent F）
28． 加上xx微升清理液（Reagent A），铺满载玻片样品表面
29． 置于37℃培养箱里孵育5分钟，保持湿润
30． 小心抽去清理液（Reagent A）
31． 重复实验步28至30二次
32． 加上xx微升复染液（Reagent G），铺满载玻片样品表面
33． 室温下孵育3分钟，避免光照
34． 小心抽去复染液（Reagent G）
35． 加上xx微升抗淬灭液（Reagent H）
36． 盖上盖玻片或封片
37． 即刻在荧光显微镜下观察
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| 染色液（Reagent F） | 复染液（Reagent G） |
| 荧光染料 | 异硫氰酸荧光素（FITC） | 二咪基联苯基吲哚（DAPI） |
| 荧光颜色 |
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| 激发波长 |
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| 散发波长 |
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| 作用 |
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方法二：悬浮细胞涂片检测
实验开始前，将－20℃冰箱里试剂盒中的试剂置入冰槽里融化。然后进行下列操作：
1． 准备1个60 mm细胞培养皿的细胞（2 X 106细胞）
2． 直至细胞铺满率达到50％
3． 小心抽去细胞培养液
4． 加入2毫升用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液
5． 放进37℃细胞培养箱孵育1分钟
6． 加入3毫升用户自备的完全细胞培养液
7． 移取细胞悬液到15毫升锥形离心管（注意：悬浮细胞从这一步骤开始）
8． 放进台式离心机离心10分钟，速度为400g（或1500rpm，例如EPPENDORF 5810R）
9． 小心抽去上清液
10． 加入xx毫升清理液（Reagent A），混匀
11． 放进台式离心机离心10分钟，速度为400g（或1500rpm，例如EPPENDORF 5810R）
12． 小心抽去清理液（Reagent A）
13． 加入xx毫升稳定液（Reagent B），混匀
14． 室温下孵育30秒
15． 放进台式离心机离心10分钟，速度为400g（或1500rpm，例如EPPENDORF 5810R）
16． 小心抽去稳定液（Reagent B）
17． 加入xx毫升－20℃预冷的固着液（Reagent C），混匀细胞颗粒群
18． 放进－20℃冰箱孵育3分钟
19． 放进台式离心机离心10分钟，速度为400g（或1500rpm，例如EPPENDORF 5810R）
20． 小心抽去固着液（Reagent C）
21． 加上xx毫升清理液（Reagent A），混匀
22． 室温下孵育2分钟
23． 小心抽去清理液（Reagent A）
24． 重复实验步骤21至23一次
25． 加入xx微升清理液（Reagent B），混匀细胞颗粒群
26． （选择步骤）细胞计数（使用清理液（Reagent B）调整细胞到1 X 107细胞/毫升）
27． 滴上10微升细胞悬液在载波片上，然后推片（注意：载玻片须进行多聚赖氨酸或多聚鸟氨酸（polyornithine）处理）
28． 室温下静置10分钟，或直至空气中晾干载玻片
29． 加上xx微升清理液（Reagent A），铺满载玻片样品表面
30． 室温下孵育2分钟
31． 小心抽去清理液（Reagent A）
32． 加上xx微升封阻液（Reagent D），铺满载玻片样品表面
33． 置于37℃培养箱里孵育10分钟，保持湿润
34． 小心抽去封阻液（Reagent D）
35． 加上xx微升抗体液（Reagent E），铺满载玻片样品表面
36． 盖上盖玻片，置于37℃培养箱里孵育30分钟（注意：避免气泡）
37． 小心移去盖玻片，抽去抗体液（Reagent E）
38． 加上xx微升清理液（Reagent A），铺满载玻片样品表面
39． 置于37℃培养箱里孵育5分钟，保持湿润
40． 小心抽去清理液（Reagent A）
41． 重复实验步38至40二次
42． 加上xx微升染色液（Reagent F），铺满载玻片样品表面
43． 盖上新的盖玻片，置于37℃培养箱里孵育30分钟，避免光照（注意：避免气泡）
44． 小心移去盖玻片，抽去染色液（Reagent F）
45． 加上xx微升清理液（Reagent A），铺满载玻片样品表面
46． 置于37℃培养箱里孵育5分钟，保持湿润
47． 小心抽去清理液（Reagent A）
48． 重复实验步45至47二次
49． 加上xx微升复染液（Reagent G），铺满载玻片样品表面
50． 室温下孵育3分钟，避免光照
51． 小心抽去复染液（Reagent G）
52． 加上xx微升抗淬灭液（Reagent H）
53． 盖上盖玻片或封片
54． 即刻在荧光显微镜下观察
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| 染色液（Reagent F） | 复染液（Reagent G） |
| 荧光染料 | 异硫氰酸荧光素（FITC） | 二咪基联苯基吲哚（DAPI） |
| 荧光颜色 |
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| 激发波长 |
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| 散发波长 |
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| 作用 |
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注意事项
1． 本产品为10次操作量
2． 在整个操作过程中须戴手套，以防污染
3． 孵育时，须避免光照
4． 载玻片须进行多聚赖氨酸或多聚鸟氨酸（polyornithine）处理
5． 建议细胞染色完成后，即刻进行荧光显微镜观察。如果放进4℃冰箱里待测，不要超过3天
6． 本公司提供系列细胞骨架检测试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定荧光清晰
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
编号 名称 规格
G&VS10278 微管（microtubules）荧光染色试剂盒 10次
G&VS10278A 清理液（Reagent A） 100毫升
G&VS10278B 稳定液（Reagent B） 100毫升
G&VS10278C 固着液（Reagent C） 100毫升
G&VS10278D 封阻液（Reagent D） 50毫升
G&VS10278E 抗体液（Reagent E） 10毫升
G&VS10278F 染色液（Reagent F） 10毫升
G&VS10278G 复染液（Reagent G） 10毫升
G&VS10278H 抗淬灭液（Reagent H） 10毫升
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS10277.1 | 细胞骨架（肌动蛋白微丝；F-ACTIN）绿色荧光染色试剂盒 | 10次 |
| G&VS10277.2 | 细胞骨架（肌动蛋白单体；G-ACTIN）红色荧光染色试剂盒 | 10次 |
| G&VS10278 | 微管（microtubules）荧光染色试剂盒 | 10次 |
| G&VS10278 | 粘着斑蛋白（vinculin）荧光染色试剂盒 | 10次 |
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