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细胞周期碘化丙啶红色荧光流式细胞分析试剂盒产品说明书

发布时间:2023/11/6 21:21:15      阅读次数:101

周期碘化丙啶红色荧光流式细胞分析试剂盒产品说明书

要用途

细胞周碘化丙啶(PROPIDIUM  IODIDE)红色荧光流式细胞分析试剂是一种旨在通过细胞流 式仪测定细胞中 DNA 结合碘化丙啶染料程度, 来定量 DNA 含量, 以进一步获取细胞周期分布状况的权威 而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞(动物、人体、 植物、昆虫等)的胞周期分析。可以被用于细胞凋亡、信号传递、细胞分裂、代谢等的研究。产品严格 无菌,即到即用,分辨率高,操作简捷,性能稳定。

术背景

 

细胞周期是评价细胞代谢、生理和病理状况的重要指标。通过 DNA  结合染料,借助细胞流式仪,测定出 DNA 含量,根据 DNA 含量随着细胞周期的不同而发生变化,来确定和区别细胞周期的不同阶段。流式细 胞术(FLOW CYTOMETRY) 是七十年代发展起来的集计算机、激光、流体力学、细胞化学、细胞免疫学 为一体的高科学技术凋亡细胞是在正常 G0/G1 峰细胞群前出现亚二倍体峰(subG1)细胞群。

 


产品内容

 

清理液(Reagent A)

固着液(Reagent B)

缓冲液(Reagent C)

染色液(Reagent D)

品说明书

 

保存方法

 

 

 

xx 毫升

xx 毫升

xx 毫升

xx 毫升

1


 

缓冲液(Reagent C)和 染色液(Reagent D)在-20℃冰箱里,其余的保存在 4 ℃冰箱里; 染色液(Reagent D) 避免光照,有效保证 12 月

用户自备

 

HANKS 衡盐溶液(G&VS12022)或 PBS 缓冲溶液(G&VS12033):用于清洗细胞

胰蛋白酶乙二胺四乙混合液(G&VS12024):用于细胞脱离

完全细胞培养液(G&VS12052):用于中和胰蛋白酶的处

xx 毫升锥形离心管:用于细胞收集的操作

xx 毫升离心管:用于细胞染色的容器

(微型)台式离心机:用于细胞收集的操作

细胞流式仪:用于细胞荧光分析


实验步骤

 

实验开始前, 将-20℃冰箱里的试剂盒中的试剂置入冰槽里融化。移出 xx 微升 缓冲液(Reagent C) 到新的 xx 毫升离心管, 加入 xx 微升 染色液(Reagent D) 混匀后标记为 染色工 作液,置于暗室里,避免光照。然后进行下列操作。

 

1  准备 1 25cm2细胞培养瓶的待测细胞,铺满率达 70(约 1 百万细胞数)

2   小心移出细胞培养液到 15 毫升锥形离心管(收集漂浮细胞)

3   加入 xx 毫升用户自备的 HANKS 平衡盐溶液或 PBS 缓冲溶液到细胞培养瓶,覆盖培养瓶表面

4   小心移出 xx 毫升清洗液到上述 15 毫升锥形离心管

5  加入 1 毫升胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液到细胞培养瓶,铺满整个培养平面

6  置入 37℃培养箱孵育 1

7  振动养瓶,使细胞脱落,然后加入 xx 毫升用户自备的完全细胞培养液

8   移入到上述 xx 毫升锥形离心管(悬浮细胞从这一步骤开始)

9   放进台式离心机离心 5 分钟,速度为 300g

10.小心抽去上清液

11.加入 xx 毫升预冷的 清理液(Reagent A) 15 毫升锥形离心管,混匀

12.移入到 1.5 毫升离心管

13.放进 4℃微型台式离心机离心 5 分钟,速度为 500g  (或 2000RPM,例如 EPPENDORF 5415)

14.小心抽去上清液

15.加入 xx 毫升预冷 固着液(Reagent B) 到 15 毫升锥形离心管,混匀

16放进 4℃冰箱里孵育 16 小时

17.放进 4℃微型台式离心机离心 5 分钟,速度为 500g  (或 2000RPM,例如 EPPENDORF 5415)

18.小心抽去固着液

19加入 xx 微升 染色工作液,用 200 微升枪头上下轻柔抽吸,混匀细胞颗粒群

20.在暗室里 37℃培养箱里孵育 45

21.移入到细胞流式仪专用测试管(可放进 4℃冰箱里待测)

22.即刻进行细胞流式仪分析: 波长 488nm 氩离子激光出现红色荧光(或 488nm 激发波长,610nm 散发波 ),观察 50000 个细胞以上

 

注意事

 

1   本产品为 100 次操作

2   确保实验准确性,须收集所有悬浮和贴壁细胞

3   可用 35mm 培养皿或 6 孔培养板,细胞总量不得少于 30

4   操作时,须戴手套

5   孵育时,必须避免光照

6  建议细染色完成后,即刻进行细胞流式仪分析。如果放进 4℃冰箱里待测,不要超过 1

7   细胞流式仪分析前,须混匀内容物,避免细胞成团

8   细胞检测量不得少于 10000

9   告知流式仪技术员有关细胞类型

10.本公司提供系列细胞周期分析试剂产


质量标

 

1   本产品经鉴定性能稳定

2   本产品经鉴定荧光清晰

 

使用承诺

 

极威生物秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后, 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证 说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告) 与本公司联,并将该产品退回, 经检验确系产品质量所致, 本公司负责更换产品。如系使用者错误操作 所致,本公司不承担由此造成的损失。

情提醒

 

IF IT DOESN’T WORK   RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

订购信息

 

 

规格

G&VS10021.3

细胞周期碘化丙啶红色荧光流式细胞分析试剂盒

100

G&VS10021.3A

清理液(Reagent A)

500 毫升

G&VS10021.3B

固着液(Reagent B)

500 毫升

G&VS10021.3C

缓冲液(Reagent C)

100 毫升

G&VS10021.3D

染色液(Reagent D)

10 毫升

G&VS12022

HANKS 平衡盐缓冲溶

500 毫升

G&VS12024

胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液

100 毫升

G&VS12033

PBS 缓冲溶

500 毫升

G&VS12052

DMEM 完全细胞培养液

500 毫升

 

 

品编号

名称

规格

G&VS10021. 1

通用型细胞周期流式细胞分析试剂盒

100 次

G&VS10021.2

胞周期蓝色荧光流式细胞分析试剂盒(紫外波长,无需固定和透膜处理)

100 次

G&VS10021.3

细胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE) 红色荧光流式细胞分析试剂盒

100 次

G&VS10137. 1

双参数细胞 G0 期流式细胞分析试剂盒

10 次

G&VS10137.2

双参数细胞 G1 期流式细胞分析试剂盒

10 次

G&VS10137.3

双参数细胞周 S 期流式细胞分析试剂盒

10 次

G&VS10137.4

双参数细胞 G2 期流式细胞分析试剂盒

10 次

G&VS10137.5

双参数细胞周 M 期流式细胞分析试剂盒

10 次

G&VS10137.6

多参数细胞周期全周期流式细胞分析试剂盒

10 次

G&VS10138. 1

通用型动物细周期(G1/S  G2/M ) 同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒

10 次

G&VS10138.2

动物细胞周期 G0 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂

10 次

G&VS10138.3

动物细胞周期 G1 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂

10 次

G&VS10138.4

动物细胞周期 G1 后期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒

10 次

 


 

G&VS10138.5

动物细胞周期 S 早期同步(SYNCHRONY) 处理试剂

10 次

G&VS10138.6

动物细胞周期 S 期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒

10 次

G&VS10138.7

动物细胞周期 S 后期同步(SYNCHRONY) 处理试剂

10 次

G&VS10138.8

动物细胞周期 G2 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂

10 次

G&VS10138.9

物细胞周期 M 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒

10 次

G&VS10140. 1

通用型植物样品细胞周期 G1/S G2/M 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒

10 次

G&VS10140.2

植物细胞周期 G0 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂

10 次

G&VS10140.3

植物细胞周期 G1 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂

10 次

G&VS10140.4

植物细胞周期 G1 后期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒

10 次

G&VS10140.5

植物细胞周期 S 早期同步(SYNCHRONY) 处理试剂

10 次

G&VS10140.6

植物细胞周期 S 期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒

10 次

G&VS10140.7

植物细胞周期 S 后期同步(SYNCHRONY) 处理试剂

10 次

G&VS10140.8

植物细胞周期 G2 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂

10 次

G&VS10140.9

物细胞周期 M 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒

10 次

G&VS10141. 1

通用型酵母样品细胞周期 G1/S G2/M 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒

10 次

G&VS10141.2

母细胞周期 G0 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒

10 次

G&VS10141.3

母细胞周期 G1 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒

10 次

G&VS10141.4

母细胞周期 G1 后期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒

10 次

G&VS10141.5

酵母细胞周期 S 早期同步(SYNCHRONY) 处理试剂

10 次

G&VS10141.6

母细胞周期 S 期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒

10 次

G&VS10141.7

酵母细胞周期 S 后期同步(SYNCHRONY) 处理试剂

10 次

G&VS10141.8

母细胞周期 G2 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒

10 次

G&VS10141.9

细胞周期 M 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒

10 次

G&VS10142

型细胞周期同步(SYNCHRONY)细胞流式分析试剂盒

20 次

 

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