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发布时间：2026/8/27 17:52:25 阅读次数：27
小鼠脂质过氧化物4-羟基壬烯醛（4－HNE）ELISA定量测定试剂盒产品说明书
主要用途
小鼠脂质过氧化物4-羟基壬烯醛（4－HNE）ELISA定量测定试剂是一种旨在使用单克隆抗4-羟基壬烯醛抗体竞争性结合样品中的4-羟基壬烯醛和辣根过氧化酶缀合二抗，由生色染料四甲基联苯胺参与反应，呈现黄色产物，即通过酶联免疫吸附反应（ELISA）比色法定量评价DNA损伤水平的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。主要适用于各种小鼠细胞和组织裂解产物，以及体液样品4-羟基壬烯醛的定量分析。广泛用于细胞衰老、细胞凋亡、肿瘤等的研究。产品即到即用，反应敏感，操作简捷，性能稳定，显色清晰。
技术背景
脂质过氧化（lipid peroxidation）是脂类分子的氧化性修饰，由体外过氧化物因子诱导产生，或衰老和疾病状态时体内出现，造成植物和动物细胞损伤。脂类过氧化物（lipid peroxide）为不稳定产物，非酶促反应而分解继发产生天然的复杂活性醛类副产品复合物，例如丙二醛（malondialdehyde；MDA）、丙烯醛（acrolein）和4-羟基壬烯醛（4-hydroxy-2-nonenal；4－HNE），来自于ω-6多饱和脂肪酸花生四烯酸或多不饱和膜类脂质（磷脂）的氧化，与蛋白质结合，形成稳定的加合物，后期脂质过氧化终端产物，导致氧化性蛋白结构和功能损伤，进而产生细胞毒性、生长抑制、遗传毒性、趋化活性，通过改变巯基抑制SIRT3和改变基因表达。其中脂类氧化损伤产物4-羟基壬烯醛，为9碳两性脂质醛，亲电子性（electrophilic），通过与各种生物分子的巯基或氨基反应，包括磷脂、蛋白、核酸等，形成二价加合物，参与代谢性疾病，例如糖尿病、肥胖症等病理变化。4-羟基壬烯醛是细胞氧化应激的分子标志。基于单克隆抗4-羟基壬烯醛抗体竞争性结合样品中的4-羟基壬烯醛和辣根过氧化酶缀合二抗，由生色染料四甲基联苯胺（3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine；TMB）参与反应，呈现黄色产物，在分光光度仪下（450nm波长），定量检测4-羟基壬烯醛的含量。
产品内容
标准液（Reagent A） 微升
抗体液（Reagent B） 毫升
清理液（Reagent C） 毫升
二抗液（Reagent D） 毫升
底物液（Reagent E） 毫升
终止液（Reagent F） 毫升
稀释液（Reagent G） 毫升
标记液（Reagent H） 微升
净化液（Reagent I） 毫升
缓冲液（Reagent J） 毫升
酶标板 列
产品说明书 1份
保存方式
保存标准液（Reagent A）、抗体液（Reagent B）、二抗液（Reagent D）、稀释液（Reagent G）和标记液（Reagent H）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；底物液（Reagent E）密闭瓶盖，避免光照；酶标板，密封干燥保存；有效保证3月
用户自备
1.5毫升离心管：用于样品操作
酶标仪：用于比色分析
实验步骤
实验开始前，将－20℃或4℃冰箱里试剂盒中的试剂置于室温下30分钟均衡温度。然后进行下列操作：
一、标准样品和待测样品测定
1． 准备1列酶标板
2． 分别加入xx微升稀释液（Reagent G）到所有孔里
3． 分别加入xx微升标记液（Reagent H），混匀
4． 放进4℃冰箱里孵育16小时
5． 小心抽去上清液
6． 分别加入xx微升净化液（Reagent I）到所有孔里
7． 小心抽去上清液（注意：确保没有液体残留）
8． 重复实验步骤6至7一次
9． 分别加入xx微升缓冲液（Reagent J）到所有孔里
10． 室温下孵育60分钟
11． 转移到4℃冰箱里备用
12． 使用前抽去上清液（注意：确保没有液体残留）
二、标准样品管浓度表：
| 标准液（Reagent A） | 标准4-羟基壬烯醛浓度 |
| A1 | 100微克/毫升 |
| A2 | 100微克/毫升 |
| A3 | 50微克/毫升 |
| A4 | 25微克/毫升 |
| A5 | 0 |
三、 标准样品和待测样品测定
1． 准备1列上述制备的酶标板：标记好标准样品、待测样品
2． 分别加入xx微升标准液A1至A5到对应的标准样品孔里
3． 加入50微升待测样品到待测样品孔里
4． 室温下孵育10分钟
5． 分别加入xx微升抗体液（Reagent B）到所有孔里
6． 摇动酶标板，充分混匀
7． 室温下孵育60分钟（注意：避免干化）
8． 小心抽去上清液
9． 分别加入xx微升清理液（Reagent C）
10． 室温下孵育10秒
11． 小心抽去清理液（注意：确保没有液体残留）
12． 重复实验步骤9至11二次
13． 分别加入xx微升二抗液（Reagent D）到所有孔里
14． 摇动酶标板，充分混匀
15． 室温下孵育60分钟（注意：避免干化）
16． 小心抽去上清液
17． 分别加入xx微升清理液（Reagent C）
18． 室温下孵育10秒
19． 小心抽去清理液（注意：确保没有液体残留）
20． 重复实验步骤17至19二次
21． 分别加入xx微升预热的底物液（Reagent E）到标准样品和待测样品孔里
22． 室温下孵育2至20分钟，避免光照（注意：可见蓝色沉淀，即可终止）
23． 加入xx微升终止液（Reagent F），混匀（注意：可见蓝色变成黄色）
24． 即刻放进酶标仪测读：450nm测定波长和630nm参考波长（注意：不宜超过15分钟）
25． 构建标准曲线：纵坐标为吸光读数（OD），横坐标为4-羟基壬烯醛浓度（微克/毫升）
26． 使用线性回归数学模型，计算样品4-羟基壬烯醛浓度（微克/毫升）
注意事项
1． 本产品为15次操作量（包括5次标准品操作）
2． 本产品检测敏感度达1微克/毫升
3． 操作时，须戴手套
4． 系统操作时，标准样品测定只需一次
5． 孵育时，须避免光照
6． 加样时确保加入孔底，避免溅出和气泡
7． 注意加样时，避免交叉污染，避免污染母液
8． 建议使用湿度充分的培养箱
9． 建议使用高浓度的样品
10． 样品4℃保存，不超过5天；—20℃保存，不超过1月；—80℃保存，不超过2月
11． 建议染色完成后，即刻进行比色分析
12． 本公司提供系列氧化损伤检测试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定检测敏感
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS10348.5 小鼠脂质过氧化物4-羟基壬烯醛ELISA定量测定试剂盒 10次
G&VS10348.5A 标准液（Reagent A） 微升
G&VS10348.5B 抗体液（Reagent B） 毫升
G&VS10348.5C 清理液（Reagent C） 毫升
G&VS10348.5D 二抗液（Reagent D） 毫升
G&VS10348.5E 底物液（Reagent E） 毫升
G&VS10348.5F 终止液（Reagent F） 毫升
G&VS10348.5G 稀释液（Reagent G） 毫升
G&VS10348.5H 标记液（Reagent H） 毫升
G&VS10348.5I 净化液（Reagent I） 毫升
G&VS10348.5J 缓冲液（Reagent J） 毫升
G&VS10348.5K 酶标板 列
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS10348.1 | 细胞脂质过氧化物4-羟基壬烯醛（4－HNE）比色法测定试剂盒 | 20次 |
| G&VS10348.2 | 细胞脂质过氧化物4-羟基壬烯醛（4－HNE）细胞流式分析试剂盒 | 10次 |
| G&VS10348.3 | 冰冻切片脂质过氧化物4-羟基壬烯醛（4－HNE）荧光染色试剂盒 | 10次 |
| G&VS10348.4 | 石蜡切片脂质过氧化物4-羟基壬烯醛（4－HNE）荧光染色试剂盒 | 10次 |
| G&VS10348.5 | 脂质过氧化物4-羟基壬烯醛（4－HNE）ELISA定量测定试剂盒 | 48/96次 |
| G&VS10348.6 | 脂质过氧化物4-羟基壬烯醛（4－HNE）高效液相色谱 （HPLC）分析试剂盒 | 20次 |
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