当前位置：首页>技术专栏
发布时间：2026/8/27 17:54:01 阅读次数：30
石蜡切片脂质过氧化物4-羟基壬烯醛（4－HNE）荧光染色试剂盒产品说明书
主要用途
石蜡切片脂质过氧化物4-羟基壬烯醛（4－HNE）荧光染色试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法和单克隆抗4-羟基壬烯醛抗体以及荧光染料缀合物二抗的应用，通过荧光显微镜分析存档中的石蜡包埋的组织切片中4-羟基壬烯醛的分布状态，从而观察分析脂质过氧化的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。主要适用于各种动物和人体组织石蜡包埋切片的4-羟基壬烯醛分析。产品严格无菌，即到即用，反应敏感，操作简捷，性能稳定，荧光清晰。
技术背景
脂质过氧化（lipid peroxidation）是脂类分子的氧化性修饰，由体外过氧化物因子诱导产生，或衰老和疾病状态时体内出现，造成植物和动物细胞损伤。脂类过氧化物（lipid peroxide）为不稳定产物，非酶促反应而分解继发产生天然的复杂活性醛类副产品复合物，例如丙二醛（malondialdehyde；MDA）、丙烯醛（acrolein）和4-羟基壬烯醛（4-hydroxy-2-nonenal；4－HNE），来自于ω-6多饱和脂肪酸花生四烯酸或多不饱和膜类脂质（磷脂）的氧化，与蛋白质结合，形成稳定的加合物，后期脂质过氧化终端产物，导致氧化性蛋白结构和功能损伤，进而产生细胞毒性、生长抑制、遗传毒性、趋化活性，通过改变巯基抑制SIRT3和改变基因表达。其中脂类氧化损伤产物4-羟基壬烯醛，为9碳两性脂质醛，亲电子性（electrophilic），通过与各种生物分子的巯基或氨基反应，包括磷脂、蛋白、核酸等，形成二价加合物，参与代谢性疾病，例如糖尿病、肥胖症等病理变化。4-羟基壬烯醛是细胞氧化应激的分子标志。通过单克隆抗4-羟基壬烯醛抗体以及荧光染料缀合物二抗的应用，在荧光显微镜下分析存档中的石蜡包埋的组织切片中4-羟基壬烯醛的绿色荧光分布状态，从而观察分析脂质过氧化。
产品内容
脱蜡液（Reagent A） 毫升（自备）
补水液A（Reagent B） 毫升
补水液B（Reagent C） 毫升
补水液C（Reagent D） 毫升
补水液D（Reagent E） 毫升
清理液（Reagent F） 毫升
修复液（Reagent G） 毫升
封阻液（Reagent H） 毫升
抗体液（Reagent I） 毫升
染色液（Reagent J） 毫升
强化液（Reagent K） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存修复液（Reagent G）、封阻液（Reagent H）、抗体液（Reagent I）和染色液（Reagent J）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；抗体液（Reagent I）和染色液（Reagent J）严禁反复冻融； 染色液（Reagent J）避免光照；有效保证6月
用户自备
盖玻片：用于封片孵育
小型染色缸：用于脱蜡的操作
烘箱：用于脱蜡处理
（共聚焦）荧光显微镜：用于组织细胞荧光观察
实验步骤
一、 脱蜡处理
1． 取出10片待测的10微米厚的石蜡包埋的组织切片
2． （选择步骤）放进80℃烘箱，孵育30分钟
3． （选择步骤）室温下静置15分钟
4． 按下表依次放进小染色缸里孵育
| 染色缸 | 孵育时间 |
| xx毫升脱蜡液（Reagent A） | 15分钟 |
| xx毫升脱蜡液（Reagent A） | 15分钟 |
| xx毫升脱蜡液（Reagent A） | 15分钟 |
| xx毫升补水液A（Reagent B） | 3分钟 |
| xx毫升补水液B（Reagent C） | 3分钟 |
| xx毫升补水液C（Reagent D） | 3分钟 |
| xx毫升补水液D（Reagent E） | 3分钟 |
5． 小心移去切片上的补水液D（Reagent E）
6． 小心加上xx微升清理液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面
7． 室温下孵育5分钟
8． 小心移去切片上的清理液（Reagent F）
二、样品预处理
实验开始前，将－20℃冰箱里试剂盒中的试剂置入冰槽里融化。然后进行下列操作：
1． （选择步骤）将切片置于100毫升烧杯，加入xx毫升强化液（Reagent K）
2． （选择步骤）放进微波炉里加热5分钟：其中15秒煮沸后，间隙15秒后再煮沸，直至5分钟
3． （选择步骤）室温下，冷却20分钟
4． 加入xx微升修复液（Reagent G）在切片上，铺满整个切片样品表面
5． 室温下孵育5分钟
6． 小心抽去修复液（Reagent G）
7． 空气中晾干
8． 加入xx微升清理液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面
9． 室温下孵育5分钟
10． 小心抽去清理液（Reagent F）
11． 加入xx微升封阻液（Reagent H）在切片上，铺满整个切片样品表面
12． 室温下孵育60分钟
13． 小心抽去封阻液（Reagent H）
三、 样品染色处理
1． 加入xx微升抗体液（Reagent I）在切片上，铺满整个切片样品表面
2． 盖上盖玻片，室温下孵育1小时（注意：避免气泡；参见注意事项9）
3． 小心移去盖玻片，抽去抗体液（Reagent I）
4． 加入xx微升清理液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面
5． 室温下孵育5分钟
6． 小心抽去清理液（Reagent F）
7． 重复实验步4至6二次
8． 加入xx微升染色液（Reagent J）在切片上，铺满整个切片样品表面
9． 室温下孵育30分钟，避免光照（注意：避免气泡）
10． 小心抽去染色液（Reagent J）
11． 加入xx微升清理液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面
12． 室温下孵育5分钟
13． 小心抽去清理液（Reagent F）
14． 重复实验步11至13二次
15． 盖上盖玻片或封片
16． 即刻在（共聚焦）荧光显微镜下观察：激发波长488nm。散发波长530nm—脂质过氧化物4-羟基壬烯醛阳性的细胞呈现绿色荧光
注意事项
1． 本产品为10次操作
2． 操作时须戴手套，以防污染
3． 石蜡包埋前，组织切片须用10％甲醛4℃条件下，固定16小时，否则造成样品支离破碎
4． 所有操作在室温下进行
5． 用户可以使用二甲苯替代脱蜡液（Reagent A）
6． 每次更换试剂溶液时，保持切片面基本晾干。空气中晾干状态为没有水滴，呈湿润状态，可见反光
7． 试剂溶液在切片表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满切片表面
8． 染色孵育时，须避免光照
9． 抗体液（Reagent I）孵育，可以持续16小时
10． 建议染色完成后，即刻进行荧光显微镜观察
11． 本公司提供系列脂质过氧化检测试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定荧光清晰
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组份订购信息
编号 名称 规格
G&VS10348.4 石蜡切片脂质过氧化物4-羟基壬烯醛荧光染色试剂盒 10次
G&VS10348.4A 脱蜡液（Reagent A） 毫升
G&VS10348.4B 补水液A（Reagent B） 毫升
G&VS10348.4C 补水液B（Reagent C） 毫升
G&VS10348.4D 补水液C（Reagent D） 毫升
G&VS10348.4E 补水液D（Reagent E） 毫升
G&VS10348.4F 清理液（Reagent F） 毫升
G&VS10348.4G 修复液（Reagent G） 毫升
G&VS10348.4H 封阻液（Reagent H） 毫升
G&VS10348.4I 抗体液（Reagent I） 毫升
G&VS10348.4J 染色液（Reagent J） 毫升
G&VS10348.4K 强化液（Reagent K） 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS10348.1 | 细胞脂质过氧化物4-羟基壬烯醛（4－HNE）比色法测定试剂盒 | 20次 |
| G&VS10348.2 | 细胞脂质过氧化物4-羟基壬烯醛（4－HNE）细胞流式分析试剂盒 | 10次 |
| G&VS10348.3 | 冰冻切片脂质过氧化物4-羟基壬烯醛（4－HNE）荧光染色试剂盒 | 10次 |
| G&VS10348.4 | 石蜡切片脂质过氧化物4-羟基壬烯醛（4－HNE）荧光染色试剂盒 | 10次 |
| G&VS10348.5 | 脂质过氧化物4-羟基壬烯醛（4－HNE）ELISA定量测定试剂盒 | 48/96次 |
| G&VS10348.6 | 脂质过氧化物4-羟基壬烯醛（4－HNE）高效液相色谱 （HPLC）分析试剂盒 | 20次 |
上海极威生物科技有限公司 公司地址:上海市崇明县长兴镇潘园公路1800号2号楼9703室
邮箱：435399850@qq.com 电话：021-80186165 手机：16602115336
备案号：沪ICP备15046135号-7
