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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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纯化溶酶体膜完整性（integrity）NAG释放法荧光检测试剂盒产品说明书

发布时间：2026/8/31 9:50:45 阅读次数：24

纯化溶酶体膜完整性（integrity）NAG释放法荧光检测试剂盒产品说明书

主要用途

纯化溶酶体膜完整性（integrity）NAG释放法荧光检测试剂是一种旨在通过荧光底物4-甲基伞形酮-β-D-葡糖苷，受到溶酶体标志酶N-乙酰基β-D氨基葡萄糖苷酶的水解，产生荧光读数的变化，来分析和观察溶酶体膜完整性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种纯化溶酶体（动物、人体、昆虫等）膜完整性的检测。产品严格无菌，即到即用，活体检测，分辨率高，操作简捷，性能稳定。

技术背景

溶酶体（lysosome）是一种动态性的、多态性的、含有水解酶的细胞器，具有接受和降解来自于分泌性、内吞性（endocytic）、自噬性（autophagic）、吞噬性（phagocytic）膜运转通路中的大分子。其功能是膜依赖性，具有解毒和防御作用。溶酶体膜是溶酶体内基质和胞浆之间的生理屏障，为整合性糖蛋白，防止细胞自我降解。一旦溶酶体膜去稳定（destabilization），例如碱性化或内容物移位（translocation），将导致质子和水解酶外漏，而造成细胞器功能异常，进而产生细胞坏死、凋亡，以及病理症状，例如朊病毒脑病（prion encephalopathies）、阿茨罕默病、心肌缺血、脊髓灰质炎病毒感染、补体激活型肺损伤（complement activation-produced lung injury）、急性组织损伤等疾病。N-乙酰基β-D氨基葡萄糖苷酶（N-Acetyl β-D-Glucosaminidase；NAG），又称为N-乙酰基β-D氨基己糖苷酶（N-Acetyl β-D-hexosaminidase）为溶酶体标志酶，一旦溶酶体膜去稳定性或去完整性，溶酶体内容物，例如N-乙酰基β-D氨基己糖苷酶大量释放到胞浆中，其游离活性显著增加，通过荧光底物4-甲基伞形酮-β-D-葡糖苷（4-Methylumbelliferyl-β-D-glucoside；MUG），检测产物4-甲基伞形酮的变化（激发波长365nm，散发波长444nm），用于分析溶酶体膜完整性状况。

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

裂解液（Reagent B）微升

染色液（Reagent C）微升

终止液（Reagent D）微升

产品说明书 1份

保存方式

保存染色液（Reagent C）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月

用户自备

黑色96孔板：用于样品染色的容器

荧光酶标仪：用于荧光定量分析

实验步骤

1．准备一个黑色96孔板，标记为：背景对照孔，待测样品孔，样品总活性孔

2．移取xx微升清理液（Reagent A）到背景对照孔里

3．分别移取100微升溶酶体悬液（100微克蛋白）到待测样品孔里和样品总活性孔里

4．加入xx微升裂解液（Reagent B）到样品总活性孔里

5．分别加入xx微升清理液（Reagent A）到背景对照孔里和待测样品孔里

6．分别加入xx微升反应液（Reagent C）到所有孔里

7．摇动96孔板混匀

8．在室温下孵育5分钟，避免光照

9．（选择步骤）分别加入xx微升终止液（Reagent D）

10．即刻放进荧光酶标仪里测读：激发波长365nm，散发波长444nm

11．计算待测样品实际RFU（relative fluorescence unit）读数：待测样品孔RFU读数－背景对照孔RFU读数)

12．计算样品总活性实际RFU读数：样品总活性孔RFU读数－背景对照孔RFU读数

13．计算游离活性百分率（％）：

14．结果分析

游离活性百分率增高，表明膜完整性减低

注意事项

1．本产品为20次操作

2．操作时，须戴手套

3．操作时，避免污染母液

4．建议反应完成后，即刻进行荧光检测分析

5．孵育时，必须避免光照

6．本公司提供系列溶酶体分析试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定荧光清晰

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS10388 纯化溶酶体膜完整性NAG释放法荧光检测试剂盒 20次

G&VS10388A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS10388B 裂解液（Reagent B）毫升

G&VS10388C 染色液（Reagent C）毫升

G&VS10388D 终止液（Reagent D）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS10118.1	细胞/组织溶酶体（lysosome）粗提分离试剂盒	10次
G&VS10118.2	细胞/组织活性溶酶体（lysosome）分离试剂盒	10次
G&VS10118.3	细胞/组织高质纯化溶酶体（lysosome）分离试剂盒	10次
G&VS10387.1	活体细胞溶酶体膜通透性（LMP）/完整性吖啶橙荧光检测试剂盒	20次
G&VS10387.2	纯化溶酶体膜通透性（LMP）/完整性吖啶橙荧光检测试剂盒	20次
G&VS10388	纯化溶酶体膜完整性（integrity）NAG释放法荧光检测试剂盒	20次
G&VS10389	溶酶体膜完整性（integrity）组织蛋白酶D释放法检测试剂盒	20次
G&VS10390	溶酶体膜完整性（integrity）酸性磷酸酶活性潜伏检测试剂盒	20次
G&VS10404	溶酶体膜完整性（integrity）中性红比色法检测试剂盒	20次