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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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分离溶酶体（lysosome）纯度标志酶组织蛋白酶D酶法检测试剂盒产品说明书

发布时间：2026/8/31 9:52:45 阅读次数：31

分离溶酶体（lysosome）纯度标志酶组织蛋白酶D酶法检测试剂盒产品说明书

主要用途

分离溶酶体（lysosome）纯度标志酶组织蛋白酶D酶法检测试剂是一种旨在通过多肽化合物底物Ac-RGFFP-pNA，受到组织蛋白酶D的水解，释放出黄色对硝基苯胺，即采用比色法来测定纯化溶酶体样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞或组织（动物、人体、昆虫等）纯化溶酶体样品中组织蛋白酶D（CATHEPSIN D）的特异活性检测和溶酶体纯度分析。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。

技术背景

组织蛋白酶（CATHEPSIN），是一种木瓜酶（papain）类半胱氨酸或天冬氨酸蛋白酶（Cysteine or Aspartic protease），普遍存在于溶酶体细胞器内，在酸性环境下激活，切离各种目标蛋白。根据其结构和底物特异性，组织蛋白酶家属约有十多种成员，包括A、B、C、D、E、G、H、K、L、S等。组织蛋白酶在细胞内蛋白和细胞外蛋白通过内吞进行周转中起着重要作用，同时也是启动和传递细胞凋亡信号的替代机制，以及肿瘤和炎症性组织损伤的病理生理变化。其中组织蛋白酶D（EC 3.4.22.1），又称为CTSD，为天冬氨酸蛋白酶，属于肽酶A1家族，特别类似于胃蛋白酶A（pepsin A）。组织蛋白酶D异常，将导致乳腺癌、阿茨罕默综合症（Alzheimer's disease）、神经元蜡样脂褐质沉积症（neuronal ceroid lipofuscinosis；NCL）等疾患。组织蛋白酶D是溶酶体细胞器的标志性酶蛋白，常用于评价溶酶体的分离纯度。基于人工合成的多肽肽化合物底物Ac-RGFFP-pNA（acetyl- Ac-Arg-Gly-Phe-Phe-Pro-p-Nitroaniline；乙酰精氨酰甘氨酰苯丙氨酰苯丙氨酰脯氨酰对硝基苯胺），受到组织蛋白酶D的水解，释放出黄色对硝基苯胺（405nm 波长），来定量测定组织蛋白酶D的特异活性，以评价溶酶体纯度。组织蛋白酶D反应系统为：

产品内容

缓冲液（Reagent A）毫升

阴性液（Reagent B）毫升

底物液（Reagent C）微升

产品说明书 1份

保存方式

保存在-20℃冰箱里；底物液（Reagent C）避免光照和反复冻融；有效保证6月

用户自备

培养箱：用于反应物孵育

96孔板或100微升1厘米光径比色皿：用于样品比色测定的容器

酶标仪或分光光度仪：用于样品比色分析

实验步骤

一、 测定准备

1．准备好纯化溶酶体待测样品

2．设定好酶标仪（温度为37℃）：波长405nm，并置零

3．实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的底物液（Reagent C）置入冰槽里融化，避免光照

三、 活性测定

1．在96孔板上做好相应标记：背景对照和样品

2．分别移取xx微升缓冲液（Reagent A）到相应孔里

3．分别加入xx微升阴性液（Reagent B）或上述制备的待测样品（50微克蛋白）到相应孔里（注意：样品须清澈）

4．分别加入xx微升底物液（Reagent C）

5．轻轻摇动96孔板（注意：避免气泡）

6．在37℃温度下孵育90分钟（注意：可见反应孔里呈现肉眼可见的黄色）

7．即刻放进酶标仪检测或转移到100微升比色皿，在分光光度仪里检测

8．活性计算：

注意事项

1．本产品为20次（96孔板）操作，包括背景对照

2．操作时，须戴手套

3．系统操作过程中，背景测定只需1次

4．样品须澄清，且避免反复冻融

5．建议待测样本蛋白浓度为50微克/5微升；如果样本酶活性过低，即90分钟读数过低，则可以延长反应孵育时间至16小时；其次增加样本量（本公司提供 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒G&VS30030.1）

6．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度

7．组织蛋白酶D单位活性定义为：在37℃，pH 4.0条件下，每分钟内能够切离1微摩尔多肽化合物底物Ac-RGFFP-pNA所需的酶量作为一个活性单位

8．通常纯化溶酶体与细胞或组织裂解悬液的组织蛋白酶D活性之比达到3：1，溶酶体纯度大于85%

9．本公司提供系列组织蛋白酶学检测试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定检测敏感

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORL， RECHECL YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组份订购信息

编号名称规格

G&VS10386 分离溶酶体纯度标志酶组织蛋白酶D酶法检测试剂盒 20次

G&VS10386A 缓冲液（Reagent A）毫升

G&VS10386B 阴性液（Reagent B）毫升

G&VS10386C 底物液（Reagent C）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS10118.1	细胞/组织溶酶体（lysosome）粗提分离试剂盒	10次
G&VS10118.2	细胞/组织活性溶酶体（lysosome）分离试剂盒	10次
G&VS10118.3	细胞/组织高质纯化溶酶体（lysosome）分离试剂盒	10次
G&VS10440	溶酶体（lysosome）溶解试剂盒	20次
G&VS10121.1	细胞溶酶体（lysosome）形态/活性荧光染色试剂盒	20次
G&VS10121.2	冰冻切片溶酶体（lysosome）形态/活性荧光染色试剂盒	20次
G&VS10577.1	细胞溶酶体（lysosome）形态绿色荧光染色试剂盒	20次
G&VS10577.2	冰冻切片溶酶体（lysosome）形态绿色荧光染色试剂盒	20次
G&VS10323	纯化溶酶体（lysosome）功能中性红检测试剂盒	20次
G&VS10324	分离溶酶体纯度双酶法（COX/AP）检测试剂盒	20次
G&VS10386	分离溶酶体（lysosome）纯度标志酶组织蛋白酶D酶法检测试剂盒	20次