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胞浆内钾离子浓度荧光(PBFI AM)检测试剂盒产品说明书

发布时间:2026/8/31 10:52:07      阅读次数:63

 

胞浆内离子浓度荧光PBFI AM检测试剂盒产品说明书

 

主要用途

胞浆内离子浓度荧光PBFI AM检测试剂是一种旨在通过胞浆钾离子特异性荧光探针PBFI-AM离子结合后,其荧光强度显著增强,在荧光酶标仪下测量不同激发波长下相对荧光峰值的比值来测定细胞浆离子浓度权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的其适用于各种活体细胞(动物、人体等)或冰冻切片组织细胞浆离子的浓度检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,检测敏感。

 

技术背景

钾离子(potassium ionK是人体中的一种重要电介质和矿物质,尤其是细胞内和细胞外基质中的重要阳离子。其功能在于维持细胞内外的酸碱平衡、渗透压、膜电位、神经肌肉功能等。血钾增高,即高血钾症(hyperkalemia)与肾衰、脱水性休克、肾上腺皮质功能不全有关;而血钾降低,即低钾血症(hypokalemia)与营养不良、负氮平衡、胃肠道液体流失等有关。正常人体的血钾浓度范围狭窄,在36毫摩尔。钾的检测包括化学沉淀法、离子选择性电位分析法(ion selective potentiometryISP、火焰光度法(flame photometry)、原子吸收分光光度法等技术,但容易受到其它金属元素的干扰,或者受限于仪器的特殊的要,以及需要细胞浆分离。钾结合性苯并呋喃间苯二甲酸potassium binding benzofuran isophthalate acetoxy-methyl esterPBFI AM),是苯并呋喃间苯二甲酸衍生物,其荧光基团与重氮冠醚(diazocrown ether)的氮分子链接,产生相应配体的选择性,具有细胞膜通透性。一旦离子结合,其荧光强度迅速增强,通过其不同激发波长340nm/380nm产生的荧光信号比(散发波长500nm)来精确测定细胞浆内离子水平。 

 

产品内容

清理液(Reagent A        毫升

染色液(Reagent B)   微升

介导液(Reagent C      微升

饱和液(Reagent D        毫升

阴性液(Reagent E        毫升

裂解液(Reagent F      微升

产品说明书                          1

 

保存方式

保存染色液(Reagent B)和介导液(Reagent C)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4冰箱里有效保证6

 

用户自备

1.5毫升离心管:用于工作液配制的容器

细胞培养箱:用于染色孵育

黑色96孔板:用于样品操作的容器

荧光酶标仪:用于荧光分析

(共聚焦)荧光显微镜:用于荧光染色观察

 

实验步骤

一、 测定准备

 

1. 设定好荧光酶标仪:激发波长340nm380nm,散发波长500nm

2. 测定开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的染色液(Reagent B室温下融化,然后分别移出xx微升介导液(Reagent Cxx微升染色液(Reagent B到新的1.5毫升离心管,标记为染色工作液,并放在暗室里备用。然后进行下列操作。 

 

二、荧光酶标仪检测

1. 准备1黑色96孔板,标记为:细胞样品孔、空白对照孔(不含细胞)、最大对照孔(含细胞)

2. 小心抽去细胞样品孔的培养液

3. 加入xx微升清理液(Reagent A到细胞样品孔里

4. 加入xx微升饱和液(Reagent D到最大对照孔里

5. 加入xx微升阴性液(Reagent E到空白对照孔里

6. 分别加入xx微升染色工作液到所有孔里

7. 轻轻摇动黑色96孔板,混匀

8. 放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟,避免光照

9. 小心抽去细胞样品孔里的上清液

10. 小心加入xx微升清理液(Reagent A细胞样品孔

11. 重复实验步骤910一次

12. 放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟

13. 加入xx微升裂解液(Reagent F最大对照孔

14. 放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟

15. 即刻放进荧光酶标仪测读:获得相对荧光单位(relative fluorescence unitRFU)包括样品RFU340nm、样品RFU380nm、空白对照孔RFU340nm、空白对照孔RFU380nm、最大对照孔RFU340nm、最大对照孔RFU380nm

16. 计算样品细胞浆离子浓度

 

三、(共聚焦)或荧光显微镜检测

1准备1个待测的细胞爬片样品

2. 小心加上xx微升清理液(Reagent A覆盖样品表面

3. 小心移去样品上的清理液(Reagent A

4. 移取xx微升清理液(Reagent A到新的1.5毫升离心管

5. 加入xx微升染色工作液,混匀 

6. 小心加上上述含有染色工作液的溶液到样品上,覆盖样品表面

7. 放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟,避免光照

8. 小心移去样品上的染色工作液

9. 小心加上xx微升新鲜的清理液(Reagent A

10. 小心移去清理液(Reagent A

11. 小心加上xx微升新鲜的清理液(Reagent A

12. 放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟

13. 小心移去清理液(Reagent A

14. 盖上盖玻片

15. 即刻在(共聚焦)荧光显微镜下进行观察:激发波长340380nm,散发波长500nm(细胞浆离子呈现色荧光)

 

四、冰冻切片检测

1. 准备1个待测的冰冻切片

2. 小心加上xx微升清理液(Reagent A覆盖切片样品表面

3. 小心移去样品上的清理液(Reagent A

4. 移取xx微升清理液(Reagent A到新的1.5毫升离心管

5. 加入xx微升染色工作液,混匀 

6. 小心加上上述含有染色工作液的溶液到切片样品上,覆盖样品表面

7. 放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟,避免光照

8. 小心移去切片上的染色工作液

9. 小心加上xx微升新鲜的清理液(Reagent A

10. 小心移去清理液(Reagent A

11. 小心加上xx微升新鲜的清理液(Reagent A

12. 放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟

13. 小心移去清理液(Reagent A

14. 盖上盖玻片

15. 即刻在(共聚焦)荧光显微镜下进行观察:激发波长340380nm,散发波长500nm(组织细胞浆钾离子呈现色荧光)

 

注意事项

1. 本产品为20次(显微镜)或60次(96孔板)操作

2. 操作时,须戴手套

3. 可以使用荧光分光光度仪检测

4. 如果细胞内酯酶缺失,则建议使用微注射(microinjection)技术

5. 避免使用EDTA等处理样品

6. 孵育反应完成后即刻进行荧光测定

7. 如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度

8. 本公司提供系列生化检测试剂产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定检测敏感

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORKRECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

订购信息

单组分订购信息

编号                                 名称                                                                      规格

G&VS10374      胞浆内离子浓度荧光PBFI AM检测试剂盒       20

G&VS10374A     清理液(Reagent A                                                   毫升

G&VS10374B     染色液(Reagent B                                                    微升

G&VS10374C     介导液(Reagent C                                                   微升

G&VS10374D     饱和液(Reagent D                                                    毫升

G&VS10374E     阴性液(Reagent E                                                     毫升

G&VS10374F      裂解液(Reagent F                                                    毫升

 

试剂盒订购信息 

产品编号

名称

规格

G&VS70032.1

通用型钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒

50

G&VS70032.2

细胞钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70032.3

组织钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70032.4

血液钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70032.5

体液钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70032.6

环境钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70032.7

食物钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70032.8

饮料钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70032.9

细菌钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70032.10

酵母钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70032.11

植物钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70116.1

通用型钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒

50

G&VS70116.2

细胞钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70116.3

组织钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70116.4

血液钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70116.5

体液钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70116.6

环境钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70116.7

食物钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70116.8

饮料钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70116.9

细菌钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70116.10

酵母钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒

20

G&VS70116.11

植物钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒

20

G&VS50605.1

通用型钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒

50

G&VS50605.2

细胞钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒

20

G&VS50605.3

组织钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒

20

G&VS50605.4

血液钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒

20

G&VS50605.5

体液钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒

20

G&VS50605.6

环境钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒

20

G&VS50605.7

食物钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒

20

G&VS50605.8

饮料钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒

20

G&VS50605.9

细菌钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒

20

G&VS50605.10

酵母钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒

20

G&VS50605.11

植物钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒

20

G&VS10374

胞浆内钾离子(K)浓度荧光检测试剂盒

20

 


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