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发布时间:2026/8/31 10:52:07 阅读次数:63
胞浆内钾离子浓度荧光(PBFI AM)检测试剂盒产品说明书
主要用途
胞浆内钾离子浓度荧光(PBFI AM)检测试剂是一种旨在通过胞浆钾离子特异性荧光探针PBFI-AM,与钾离子结合后,其荧光强度显著增强,在荧光酶标仪下测量不同激发波长下相对荧光峰值的比值,来测定细胞浆总钾离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞(动物、人体等)或冰冻切片组织细胞浆钾离子的浓度检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,检测敏感。
技术背景
钾离子(potassium ion;K)是人体中的一种重要电介质和矿物质,尤其是细胞内和细胞外基质中的重要阳离子。其功能在于维持细胞内外的酸碱平衡、渗透压、膜电位、神经肌肉功能等。血钾增高,即高血钾症(hyperkalemia)与肾衰、脱水性休克、肾上腺皮质功能不全有关;而血钾降低,即低钾血症(hypokalemia)与营养不良、负氮平衡、胃肠道液体流失等有关。正常人体的血钾浓度范围狭窄,在3至6毫摩尔。钾的检测包括化学沉淀法、离子选择性电位分析法(ion selective potentiometry;ISP)、火焰光度法(flame photometry)、原子吸收分光光度法等技术,但容易受到其它金属元素的干扰,或者受限于仪器的特殊的要求,以及需要细胞浆分离。钾结合性苯并呋喃间苯二甲酸(potassium binding benzofuran isophthalate acetoxy-methyl ester;PBFI AM),是苯并呋喃间苯二甲酸衍生物,其荧光基团与重氮冠醚(diazocrown ether)的氮分子链接,产生相应配体的选择性,具有细胞膜通透性。一旦与钾离子结合,其荧光强度迅速增强,通过其不同激发波长340nm/380nm产生的荧光信号比(散发波长500nm)来精确测定细胞浆内钾离子水平。
产品内容
清理液(Reagent A) 毫升
染色液(Reagent B) 微升
介导液(Reagent C) 微升
饱和液(Reagent D) 毫升
阴性液(Reagent E) 毫升
裂解液(Reagent F) 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存染色液(Reagent B)和介导液(Reagent C)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管:用于工作液配制的容器
细胞培养箱:用于染色孵育
黑色96孔板:用于样品操作的容器
荧光酶标仪:用于荧光分析
(共聚焦)荧光显微镜:用于荧光染色观察
实验步骤
一、 测定准备
1. 设定好荧光酶标仪:激发波长340nm和380nm,散发波长500nm
2. 测定开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的染色液(Reagent B)室温下融化,然后分别移出xx微升介导液(Reagent C)和xx微升染色液(Reagent B)到新的1.5毫升离心管,标记为染色工作液,并放在暗室里备用。然后进行下列操作。
二、荧光酶标仪检测
1. 准备1个黑色96孔板,标记为:细胞样品孔、空白对照孔(不含细胞)、最大对照孔(含细胞)
2. 小心抽去细胞样品孔的培养液
3. 加入xx微升清理液(Reagent A)到细胞样品孔里
4. 加入xx微升饱和液(Reagent D)到最大对照孔里
5. 加入xx微升阴性液(Reagent E)到空白对照孔里
6. 分别加入xx微升染色工作液到所有孔里
7. 轻轻摇动黑色96孔板,混匀
8. 放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟,避免光照
9. 小心抽去细胞样品孔里的上清液
10. 小心加入xx微升清理液(Reagent A)到细胞样品孔里
11. 重复实验步骤9和10一次
12. 放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟
13. 加入xx微升裂解液(Reagent F)到最大对照孔里
14. 放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟
15. 即刻放进荧光酶标仪测读:获得相对荧光单位(relative fluorescence unit;RFU)包括样品RFU340nm、样品RFU380nm、空白对照孔RFU340nm、空白对照孔RFU380nm、最大对照孔RFU340nm、最大对照孔RFU380nm
16. 计算样品细胞浆钾离子浓度
三、(共聚焦)或荧光显微镜检测
1. 准备1个待测的细胞爬片样品
2. 小心加上xx微升清理液(Reagent A),覆盖样品表面
3. 小心移去样品上的清理液(Reagent A)
4. 移取xx微升清理液(Reagent A)到新的1.5毫升离心管
5. 加入xx微升染色工作液,混匀
6. 小心加上上述含有染色工作液的溶液到样品上,覆盖样品表面
7. 放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟,避免光照
8. 小心移去样品上的染色工作液
9. 小心加上xx微升新鲜的清理液(Reagent A)
10. 小心移去清理液(Reagent A)
11. 小心加上xx微升新鲜的清理液(Reagent A)
12. 放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟
13. 小心移去清理液(Reagent A)
14. 盖上盖玻片
15. 即刻在(共聚焦)荧光显微镜下进行观察:激发波长340至380nm,散发波长500nm(细胞浆钾离子呈现蓝色荧光)
四、冰冻切片检测
1. 准备1个待测的冰冻切片
2. 小心加上xx微升清理液(Reagent A),覆盖切片样品表面
3. 小心移去样品上的清理液(Reagent A)
4. 移取xx微升清理液(Reagent A)到新的1.5毫升离心管
5. 加入xx微升染色工作液,混匀
6. 小心加上上述含有染色工作液的溶液到切片样品上,覆盖样品表面
7. 放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟,避免光照
8. 小心移去切片上的染色工作液
9. 小心加上xx微升新鲜的清理液(Reagent A)
10. 小心移去清理液(Reagent A)
11. 小心加上xx微升新鲜的清理液(Reagent A)
12. 放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟
13. 小心移去清理液(Reagent A)
14. 盖上盖玻片
15. 即刻在(共聚焦)荧光显微镜下进行观察:激发波长340至380nm,散发波长500nm(组织细胞浆钾离子呈现蓝色荧光)
注意事项
1. 本产品为20次(显微镜)或60次(96孔板)操作
2. 操作时,须戴手套
3. 可以使用荧光分光光度仪检测
4. 如果细胞内酯酶缺失,则建议使用微注射(microinjection)技术
5. 避免使用EDTA等处理样品
6. 孵育反应完成后即刻进行荧光测定
7. 如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度
8. 本公司提供系列钾生化检测试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定检测敏感
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS10374 胞浆内钾离子浓度荧光(PBFI AM)检测试剂盒 20次
G&VS10374A 清理液(Reagent A) 毫升
G&VS10374B 染色液(Reagent B) 微升
G&VS10374C 介导液(Reagent C) 微升
G&VS10374D 饱和液(Reagent D) 毫升
G&VS10374E 阴性液(Reagent E) 毫升
G&VS10374F 裂解液(Reagent F) 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS70032.1 | 通用型钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS70032.2 | 细胞钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70032.3 | 组织钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70032.4 | 血液钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70032.5 | 体液钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70032.6 | 环境钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70032.7 | 食物钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70032.8 | 饮料钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70032.9 | 细菌钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70032.10 | 酵母钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70032.11 | 植物钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70116.1 | 通用型钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS70116.2 | 细胞钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70116.3 | 组织钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70116.4 | 血液钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70116.5 | 体液钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70116.6 | 环境钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70116.7 | 食物钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70116.8 | 饮料钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70116.9 | 细菌钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70116.10 | 酵母钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS70116.11 | 植物钾离子(K)浓度生物酶比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS50605.1 | 通用型钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS50605.2 | 细胞钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS50605.3 | 组织钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS50605.4 | 血液钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS50605.5 | 体液钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS50605.6 | 环境钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS50605.7 | 食物钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS50605.8 | 饮料钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS50605.9 | 细菌钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS50605.10 | 酵母钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS50605.11 | 植物钾离子(K)浓度荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10374 | 胞浆内钾离子(K)浓度荧光检测试剂盒 | 20次 |
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