当前位置：首页>技术专栏
发布时间：2026/8/31 11:01:03 阅读次数：29
细胞内核酸氧化8-氧鸟苷（8-oxo-G）流式细胞分析试剂盒产品说明书
主要用途
细胞内核酸氧化8-氧鸟苷（8-oxo-G）流式细胞分析试剂是一种旨在使用8-氧鸟苷单克隆抗体以及荧光染料缀合物二抗，通过双重参数细胞流式仪定量检测样品中8-氧鸟苷水平的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。主要适用于各种活体细胞（动物、人体、植物等）的8-氧鸟苷水平的测定。广泛用于细胞衰老、细胞凋亡、肿瘤等的研究。产品严格无菌，即到即用，反应敏感，操作简捷，性能稳定。
技术背景
核酸氧化损伤（nucleotide oxidative damage），包括DNA和RNA损伤，是由于环境因子或细胞代谢影响，在逃避细胞防御机制的前提下，所产生的四种损伤之一：氧化、烷化（alkylation）、水解和碱基错配损伤等。而氧化损伤主要通过活性氧族（reactive oxygen species；ROS），包括超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-）等的作用，使碱基羟基化和嘌呤环裂开，诱导鸟嘌呤（guanine；G）向胸腺嘧啶（thymine；T）的颠换（transversion），造成体细胞基因突变，影响细胞周期、基因转录、细胞凋亡等，最终导致各种疾病的发生，例如糖尿病、高血压、中风、癌症、衰老等。其中核酸损伤产物8-氧鸟苷（8-oxo-guanine），又称为8-氧-二羟基鸟苷（8-oxo-7,8-dihydroguanine）作为DNA损伤的分子标志，是最常见的DNA损伤产物，也是氧化应急的生物标志。其损伤导致DNA复制（replication）时腺嘌呤（adenine）的碱基错配（mismatched pairing）。在人体，通常由DNA糖基酶（DNA glycosylase）OGG1进行修复。通常使用免疫组化方法定量或定性检测8-氧鸟苷的水平。流式细胞术（FLOW CYTOMETRY）是七十年代发展起来的集计算机、激光、流体力学、细胞化学、细胞免疫学为一体的高科学技术。
产品内容
清理液（Reagent A） 毫升
固着液（Reagent B） 毫升
通透液（Reagent C） 毫升
封阻液（Reagent D） 毫升
抗体液（Reagent E） 微升
染色液（Reagent F） 微升
复染液（Reagent G） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存通透液（Reagent C）、封阻液（Reagent D）、抗体液（Reagent E）、染色液（Reagent F）和复染液（Reagent G）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；抗体液（Reagent E）和染色液（Reagent F）严禁反复冻融；染色液（Reagent F）和复染液（Reagent G），避免光照；有效保证6月
用户自备
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（G&VS12024）：用于细胞脱离
完全细胞培养液（G&VS12052）：用于中和胰蛋白酶的处理
15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器
1.5毫升离心管：用于细胞染色的容器
（微型）台式离心机：用于样品操作
细胞流式仪：用于细胞荧光分析
实验步骤
实验开始前，将－20℃冰箱里试剂盒中的试剂置入冰槽里融化。然后进行下列操作：
准备1个6孔细胞培养板的细胞（1 X 106细胞/孔）
小心抽去培养液
加入xx毫升清理液（Reagent A），铺满培养孔表面
小心抽去清理液（Reagent A）
加入1毫升用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液
放进37℃细胞培养箱孵育1分钟
加入3毫升用户自备的完全细胞培养液
移取细胞混匀液到15毫升锥形离心管
放进台式离心机离心5分钟，速度为400g（或1500rpm，例如EPPENDORF 5810R）
小心抽去上清液
加入xx毫升清理液（Reagent A），混匀细胞颗粒群
放进台式离心机离心5分钟，速度为400g（或1500rpm，例如EPPENDORF 5810R）
小心抽去上清液
加入xx微升清理液（Reagent A），混匀细胞颗粒群
（选择步骤）细胞计数
加入xx毫升预冷的固着液（Reagent B）
置于冰槽里孵育15分钟
放进台式离心机离心5分钟，速度为400g（或1500rpm，例如EPPENDORF 5810R）
小心抽去上清液
加入xx毫升清理液（Reagent A），混匀细胞颗粒群
放进台式离心机离心5分钟，速度为400g（或1500rpm，例如EPPENDORF 5810R）
小心抽去上清液
重复实验步骤20至22一次
加入xx毫升－20℃预冷的通透液（Reagent C），上下抽吸混匀
放进－20℃冰箱里孵育30分钟或过夜
放进微型台式离心机离心5分钟，速度为400g（或3000rpm，例如EPPENDORF 5810R）
小心抽去上清液
加入xx毫升清理液（Reagent A），混匀细胞颗粒群
放进台式离心机离心5分钟，速度为400g（或1500rpm，例如EPPENDORF 5810R）
小心抽去上清液
用手指轻弹管底，使细胞颗粒松动
加入xx毫升封阻液（Reagent D），混匀
转移到1.5毫升离心管
室温下孵育30分钟
放进微型台式离心机离心5分钟，速度为800g（或3000rpm，例如EPPENDORF 5415D）
小心抽去上清液
用手指轻弹管底，使细胞颗粒松动
加入xx微升抗体液（Reagent E），充分混匀
室温下孵育45分钟
加入xx毫升封阻液（Reagent D），混匀
放进微型台式离心机离心5分钟，速度为800g（或3000rpm，例如EPPENDORF 5415D）
小心抽去上清液
用手指轻弹管底，使细胞颗粒松动
加入xx微升染色液（Reagent F），充分混匀
室温下孵育45分钟，避免光照
加入xx毫升封阻液（Reagent D），混匀
涡旋震荡3秒
放进微型台式离心机离心5分钟，速度为800g（或3000rpm，例如EPPENDORF 5415D）
小心抽去上清液
重复实验步骤46至49二次
加入xx微升复染液（Reagent G），用枪头充分混匀
移入到细胞流式仪专用测试管（可放进4℃冰箱里待测），避免光照
即刻进行细胞流式仪分析：波长488nm氩离子激光器，观察50000个细胞以上
建立地形图或散点图以及直方图分析
|
| 染色液（Reagent F） | 复染液（Reagent G） |
| 荧光染料 | 异硫氰酸荧光素（FITC） | 碘化丙啶（Propidium iodide；PI） |
| 荧光颜色 | 绿色 | 红色 |
| 散发波长 | 530 | 575（使用phycoerythrin的信号检测） |
| 流式仪通道 | FL1 | FL2 |
| 作用 | 8-氧鸟苷水平 | DNA含量，即细胞量 |
注意事项
本产品为10次操作量
操作时，须戴手套，以防污染
孵育时，避免光照
建议细胞染色完成后，即刻进行细胞流式仪分析。如果放进4℃冰箱里待测，不要超过3天
细胞流式仪分析前，须混匀内容物
细胞检测量不得少于10000个
建议测试阳性或阴性对照组
检测时，须弥补电子补偿，以去除双重参数的光谱重叠
告知流式仪技术员有关细胞类型
本公司提供系列核酸损伤分析试剂产品
质量标准
本产品经鉴定性能稳定
本产品经鉴定荧光清晰
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS10353.2 细胞内核酸氧化8-氧鸟苷流式细胞分析试剂盒 10次
G&VS10353.2A 清理液（Reagent A） 毫升
G&VS10353.2B 固着液（Reagent B） 毫升
G&VS10353.2C 通透液（Reagent C） 毫升
G&VS10353.2D 封阻液（Reagent D） 毫升
G&VS10353.2E 抗体液（Reagent E） 毫升
G&VS10353.2F 染色液（Reagent F） 毫升
G&VS10353.2G 复染液（Reagent G） 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS10353.1 | 细胞内核酸氧化8-氧鸟苷（8-oxo-G）比色法测定试剂盒 | 20次 |
| G&VS10353.2 | 细胞内核酸氧化8-氧鸟苷（8-oxo-G）流式细胞分析试剂盒 | 10次 |
| G&VS10353.3 | 核酸氧化8-氧鸟苷（8-oxo-G）ELISA分析试剂盒 | 48/96次 |
| G&VS10353.4 | 冰冻切片核酸氧化8-氧鸟苷（8-oxo-G）荧光染色测定试剂盒 | 10次 |
| G&VS10353.5 | 石蜡切片核酸氧化8-氧鸟苷（8-oxo-G）荧光染色测定试剂盒 | 10次 |
| G&VS10353.6 | 核酸氧化8-氧鸟苷（8-oxo-G）高效液相色谱（HPLC）分析试剂盒 | 20次 |
上海极威生物科技有限公司 公司地址:上海市崇明县长兴镇潘园公路1800号2号楼9703室
邮箱：435399850@qq.com 电话：021-80186165 手机：16602115336
备案号：沪ICP备15046135号-7
