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发布时间：2026/9/1 15:23:22 阅读次数：43
成骨细胞生成（osteogenesis）茜素红比色法定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
成骨细胞生成（osteogenesis）茜素红比色法定量检测试剂是一种旨在通过染料茜素红，和钙离子鳌形成复合物，产生桔红色沉积，在分光光度仪上进行比色分析，而获得成骨细胞生成定量信息的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种成骨细胞分化成熟和骨形成检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。产品严格无菌，即到即用，性能稳定，着色清晰。
技术背景
成骨细胞（osteoblast）是特定的成纤维细胞，分泌和矿物化骨基质。成骨细胞由间质前体细胞发育而来。矿物化的细胞外基质由I型胶原蛋白、骨钙素（osteocalcin）、基质gla蛋白（matrix gla protein）、骨桥蛋白（osteopontin）、骨涎蛋白 ( bone sialoprotein)、BMP、TGF-β、羟基磷灰石（hydroxyapatite）等组成。成骨细胞的分化分成三个阶段：细胞繁殖、基质成熟、基质矿物化。其中矿物化完成的标志为钙沉积，表明骨形成。茜素红（ALIZARIN RED S）是一种蒽醌（anthraquinone）衍生物：9,10-二氢-3,4-二羟基-9,10-二氧代-2-蒽磺酸单钠盐（9,10-Dihydro-3,4-dihydroxy-9,10-dioxo-2-anthracenesulfonic acid sodium salt），又称媒介红 3（Mordant Red 3）或茜素磺酸钠（Sodium alizarinesulfonate）。其分子式为C14H7NaO7S，分子量为342.25。茜素红和钙离子以鳌和方式形成复合物，用以识别成骨细胞的成熟和骨形成。通过茜素红染色，产生桔红色沉积，在分光光度计或酶标仪上（562nm波长）可以进行定量分析其含量。
产品内容
清理液（Reagent A） 毫升
固着液（Reagent B） 毫升
净化液（Reagent C） 毫升
染色液（Reagent D） 毫升
溶解液（Reagent E） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存染色液（Reagent D）和固着液（Reagent B）在4℃冰箱里，其余的保存在室温下；确保瓶盖密闭，尤其是固着液（Reagent B）。染色液（Reagent D），避免光照；有效保证6月
用户自备
显微镜：用于观察成骨细胞染色情况
平式摇荡仪：用于染色萃取的混匀
比色皿或酶标板：用于比色分析的容器
分光光度仪或酶标仪：用于定量检测成骨细胞矿物化情况
实验步骤
1． 小心抽掉多孔细胞培养板里的培养液
2． 轻轻加入适量的清理液（Reagent A）到每个培养孔里（见下表）
| 多孔培养板 | 容量 |
| 96 | xx 毫升 |
| 48 | xx毫升 |
| 24 | xx 毫升 |
| 12 | xx 毫升 |
| 6 | xx 毫升 |
3． 小心抽去清理液
4． 重复实验步骤2至3一次
5． 小心加入适量的预冷的固着液（Reagent B）到每个培养孔里（见实验步骤2表）
6． 置于4℃冰箱里孵育15分钟
7． 小心抽去固着液
8． 小心加入适量的净化液（Reagent C）到每个培养孔里（见实验步骤2表）
9． 室温下孵育5分钟
10． 小心抽去净化液
11． 重复实验步骤8至10一次
12． 小心加入适量的染色液（Reagent D）到每个培养孔里（见下表）
| 多孔培养板 | 容量 |
| 96 | xx 微升 |
| 48 | xx 微升 |
| 24 | xx 微升 |
| 12 | xx 毫升 |
| 6 | xx 毫升 |
13． 在室温下静置15分钟
14． 小心抽去染色液
15． 小心加入适量的净化液（Reagent C）到每个培养孔里（见实验步骤2表）
16． 小心抽去净化液
17． 重复实验步骤15和16四次
18． 小心加入适量的清理液（Reagent A）到每个培养孔里（见实验步骤2表）
19． 室温下孵育10分钟
20． 小心抽去清理液
21． （选择步骤）置于一般光学显微镜下观察染色情况：成骨细胞呈现橘红色
22． 小心加入适量的溶解液（Reagent E）（见下表）
| 多孔培养板 | 容量 |
| 96 | xx 微升 |
| 48 | xx 微升 |
| 24 | xx 微升 |
| 12 | xx微升 |
| 6 | xx 毫升 |
23． 轻轻摇动培养板，直到溶解液（Reagent E）均匀分布
24． 置于平式摇荡仪，在室温下，孵育15分钟，速度为50RPM
25． （选择步骤）移入到比色皿
26． 即刻放进分光光度仪或酶标仪测读，波长为562 nm
27． 构建成骨细胞定量曲线：横座标（x轴）为细胞浓度（细胞量）；纵坐标（y轴）为样品读数（吸光单位OD值）
注意事项
1． 本产品为20次（24孔板）、50次（48孔板）、100次（96孔板）操作
2． 操作时须戴手套
3． 试剂瓶务必密封保存
4． 用户可以使用茜素红构建标准曲线
5． 染色时，避免光照
6． 细胞染色前后的清洗过程中，小心操作，以免将细胞冲洗掉，而影响定量分析
7． 本公司提供系列骨组织检测试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定着色清晰
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS10414 成骨细胞生成茜素红比色法定量检测试剂盒 20/100次
G&VS10414A 清理液（Reagent A） 毫升
G&VS10414B 固着液（Reagent B） 毫升
G&VS10414C 净化液（Reagent C） 毫升
G&VS10414D 染色液（Reagent D） 毫升
G&VS10414E 溶解液（Reagent E） 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS80017.1 | 石蜡切片骨组织茜素红（alizarin red s）染色试剂盒 | 50次 |
| G&VS80017.2 | 冰冻切片骨组织茜素红（alizarin red s）染色试剂盒 | 50次 |
| G&VS80017.3 | 细胞分化成骨细胞茜素红（alizarin red s）染色试剂盒 | 50次 |
| G&VS80155.1 | 石蜡切片骨组织I型胶原蛋白免疫组化染色试剂盒 | 10次 |
| G&VS80155.2 | 冰冻切片骨组织I型胶原蛋白免疫组化染色试剂盒 | 10次 |
| G&VS80155.3 | 细胞分化成骨细胞I型胶原蛋白免疫组化染色试剂盒 | 10次 |
| G&VS10414 | 成骨细胞生成（osteogenesis）茜素红比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS80158.1 | 体内骨组织钙黄绿素（calcein）绿色荧光标记试剂盒 | 5次 |
| G&VS80158.2 | 体内骨组织茜素络合物（alizarin complexone）红色荧光标记试剂盒 | 5次 |
| G&VS80158.3 | 体内骨组织二甲酚橙（xylenol orange）红色荧光标记试剂盒 | 5次 |
| G&VS80158.4 | 体内骨组织土霉素（oxytetracycline）黄色荧光标记试剂盒 | 5次 |
| G&VS12893 | 成骨细胞生长培养基 | 500毫升 |
| G&VS12894 | 成骨细胞分化培养基 | 500毫升 |
| G&VS12895 | 成骨细胞矿物化培养基 | 500毫升 |
| G&VS12896 | 成骨细胞培养补充混合液100倍 | 50毫升 |
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