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发布时间：2026/9/1 15:24:34 阅读次数：43
核糖体（ribosome）RNA解离试剂盒产品说明书
主要用途
核糖体（ribosome）RNA解离试剂是一种旨在通过化学方法，解离核糖体RNA分子，充分灭活RNA酶，以及有机溶剂有效萃取的技术处理，以获得不含蛋白质的纯度最佳的核糖体RNA的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞或组织样品（人体、动物、植物等）的核糖体RNA提取。产物可以直接用于Northern杂交、斑点杂交、体外翻译、RT-PCR、构建cDNA文库等各种后续分子生物学实验。产品即到即用，性能稳定，无核酶污染，操作简便，产物纯度高，重复性好。
技术背景
核糖体（ribosome）是一种细小颗粒的核糖蛋白复合物（ribonucleoprotein complex），生命细胞制造蛋白质的非膜性结构元素和转译装置（translational apparatus），由RNA和蛋白质组成，具有多肽转移酶的活性。其分成2个亚体：大亚体和小亚体。核糖体通过大亚体结合转运核糖体（tRNA），而小亚体结合信使RNA（mRNA），然后阅读RNA提供的信息，转译（translation）成氨基酸，连接成蛋白分子。真核生物的核糖体位于胞质（游离核糖体）、线粒体和叶绿体中。其中胞浆核糖体为80S核糖体，分子量为4.2MDs，由40S小亚体和60S大亚体组成：60S由5S RNA、28S RNA、5.8S亚基和49个蛋白组成；而40S由18S RNA和33个蛋白组成。线粒体和叶绿体核糖体与原核生物相似，为70S核糖体，分子量为2.7MDs，由30S小亚体和50S大亚体组成：50S包括5S、23S RNA和34个蛋白；30S包括16S RNA和21个蛋白。原核生物的核糖体RNA和蛋白质重量之比为2:1，而真核生物为1:1。核糖体在镁离子和冰醋酸的作用下，RNA和蛋白质分子分离，进而通过异硫氰酸胍（guanidine isothiocyanate）快速灭活RNA酶。同时在新鲜的β-巯基乙醇（β-Mercapto ethanol）的参与下，阻止RNA酶分子间二硫键的重新形成。在酸性环境下，酚氯仿的结合，使RNA与残余蛋白和DNA彻底分离。
产品内容
解离液（Reagent A） 毫升
清理液（Reagent B） 毫升
萃取液（Reagent C） 毫升
沉淀液（Reagent D） 毫升
净化液（Reagent E） 毫升
保存液（Reagent F） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存萃取液（Reagent C）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管：用于样品操作的容器
4℃微型台式离心机：用于样品操作
涡旋震荡仪：用于混匀
实验步骤
1． 准备好1至5毫克纯化核糖体颗粒
2． （选择步骤）加入xx毫升预冷的解离液（Reagent A）
3． （选择步骤）涡旋震荡15秒
4． （选择步骤）置于冰槽里孵育30分钟
5． （选择步骤）放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为16000g
6． （选择步骤）小心移取上清液到新的1.5毫升离心管（注意：可以用于后续蛋白样品分析）
7． 加入xx毫升预冷的清理液（Reagent B），混匀颗粒群
8． 加入xx毫升萃取液（Reagent C）
9． 强力涡旋震荡30秒
10． 置于冰槽里孵育15分钟
11． 放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为16000g
12． 小心移取1毫升上层液相溶液到新的预冷的1.5毫升离心管，留下（丢弃）25微升相位交界面的溶液
13． 加入xx微升沉淀液（Reagent D），混匀
14． 置于－20℃冰箱里，孵育15分钟
15． 放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
16． 小心抽去上清液
17． 加入xx毫升净化液（Reagent E）
18． 放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
19． 小心抽去上清液
20． 空气中晾干
21． 加入xx微升保存液（Reagent F）
22． 放进－70℃冰箱里储存备用
注意事项
1． 本产品为10次操作
2． 整个操作须在4℃状态下进行
3． 整个操作须带手套
4． 建议使用滤芯枪头，并格外小心，防止降解RNA
5． 建议所有的操作用品属于RNA专用
6． 通常1克核糖体样品可以提取200至500微克RNA量
7． RNA浓度测定（纳克/微升）=OD260 X 1000 X 4 (1:100稀释)；如果稀释倍数1:200，则系数为8； 稀释倍数1:400，则系数为16
8． 纯化的RNA保存在－70℃冰箱里，避免反复冻融
9． 本公司提供系列核糖体制备产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定无核酶成分
3． 本产品经鉴定纯化程度高
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS10413 核糖体（ribosome）RNA解离试剂盒 10次
G&VS10413A 解离液（Reagent A） 毫升
G&VS10413B 清理液（Reagent B） 毫升
G&VS10413C 萃取液（Reagent C） 毫升
G&VS10413D 沉淀液（Reagent D） 毫升
G&VS10413E 清理液（Reagent E） 毫升
G&VS10413F 保存液（Reagent F） 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS10409.1 | 动物细胞/组织胞质核糖体（ribosome）分离试剂盒 | 10次 |
| G&VS10409.2 | 动物细胞/组织线粒体核糖体（ribosome）分离试剂盒 | 10次 |
| G&VS10409.3 | 动物细胞/组织总核糖体（ribosome）分离试剂盒 | 10次 |
| G&VS10410 | 动物细胞/组织纯化核糖体（ribosome）蛋白质萃取试剂盒 | 20次 |
| G&VS10411 | 80S核糖体（ribosome）解离试剂盒 | 10次 |
| G&VS10412 | 70S核糖体（ribosome）解离试剂盒 | 10次 |
| G&VS10413 | 核糖体（ribosome）RNA解离试剂盒 | 10次 |
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