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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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血影细胞完整性酶法检测试剂盒产品说明书

发布时间：2026/9/2 8:08:53 阅读次数：25

血影细胞完整性酶法检测试剂盒产品说明书

主要用途

血影细胞完整性酶法检测试剂是一种旨在通过3-磷酸甘油醛脱氢酶酶反应系统中，在去垢剂存在与否的情况下，伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷（NADH）还原后峰值的变化，即采用光度法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于血影细胞膜完整性的检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。

技术背景

3-磷酸甘油醛脱氢酶（Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase；GAPDH；EC1.2.1.12）是一种普遍存在的看家基因产物，为四聚体的酶蛋白，参与催化糖酵解，分解葡萄糖分子，为机体提供能量和碳分子。同时具有转录激活、凋亡启动等功能。其表达含量常用于RNA和蛋白表达分析的内参标准，而生化活性用于血影细胞的完整性检测，即膜闭合状况评价：在去垢剂存在与否的情况下，。通过3-磷酸甘油磷酸激酶（3-phosphoglyceric phosphokinase；3-PGK）和3-磷酸甘油醛脱氢酶酶偶联反应系统，首先基于底物3-磷酸甘油醛（DL-glyceraldehyde-3-phosphate glyceric acid；G-3-P），在去垢剂存在与否的情况下，受到3-磷酸甘油醛脱氢酶的作用，产生1,3-二磷酸甘油（glycerate-1,3-diphosphate），同时其辅酶因子氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（oxidized nicotinamide adenine dinucleotide；β-NAD）转化为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide；β-NAD），通过测定吸光值的变化（340nm 波长），来定量分析3-磷酸甘油醛脱氢酶的活性。其反应系统为：

产品内容

缓冲液（Reagent A）毫升

反应液（Reagent B）毫升

底色液（Reagent C）毫升

阴性液（Reagent D）毫升

去垢液（Reagent E）毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存在－20℃冰箱里；反应液（Reagent B）和底色液（Reagent C）避免光照；有效保证6月

用户自备

培养箱：用于样品孵育

96孔板：用于光度分析的容器

酶标仪：用于样品光度分析

实验步骤

一、 测定准备

1．开启并设定好分光光度仪（温度为30℃）：波长340nm，并置零

2．从－20℃冰箱里取出试剂，置于冰槽里融化；底色液（Reagent C）避免光照

3． 缓冲液（Reagent A）室温下均衡温度

二、 活性测定

1．在96孔板上做好相应标记：背景对照、未处理样品、去垢剂处理样品

2．分别移取xx微升缓冲液（Reagent A）到96孔板里

3．分别加入xx微升反应液（Reagent B）

4．分别加入xx微升底色液（Reagent C）

5．分别加入xx微升阴性液（Reagent D）到背景对照孔和未处理样品孔

6．加入xx微升去垢液（Reagent E）到去垢剂处理样品孔

7．轻轻摇动96孔板

8．在30℃温度下孵育3分钟

9．加入xx微升阴性液（Reagent D）到背景对照孔

10．或分别加入10微升待测样品（10微克血影细胞蛋白）到未处理样品孔和去垢剂处理样品孔里

11．轻轻摇动96孔板

12．在30℃温度下孵育5分钟

13．即刻放进酶标仪检测

14．活性计算

15．血影细胞完整性分析：

未处理样品活性÷去垢剂处理样品活性：比值越小，完整性越高

注意事项

1．本产品为20次操作

2．操作时，须戴手套

3．样品须澄清，至关重要

4．孵育完成后即刻光度测定

5．测定值由高到低变化；测定持续5分钟

6．样本测定5分钟读数低于0分钟读数表明具有酶活性

7．光度测定后，比色皿须清洗彻底

8．建议待测样本蛋白浓度为10微克/10微升（本公司提供 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）

9．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度

10． 3-磷酸甘油醛脱氢酶单位活性定义为：在30℃，pH 7.6条件下，每分钟内能够转化1微摩尔3-磷酸甘油醛至1,3-二磷酸甘油所需的酶量作为一个活性单位

11．本公司提供系列血影细胞分析试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定检测敏感

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS10441 血影细胞完整性酶法检测试剂盒 20次

G&VS10441A 缓冲液（Reagent A）毫升

G&VS10441B 底色液（Reagent B）毫升

G&VS10441C 反应液（Reagent C）毫升

G&VS10441D 阴性液（Reagent D）毫升

G&VS10441E 去垢液（Reagent E）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS10125	血影细胞（GHOST）制备试剂盒	20次
G&VS10126.1	血影细胞膜荧光染色试剂盒	20次
G&VS10126.2	血影细胞膜尼罗红荧光染色试剂盒	20次
G&VS10346	红细胞膜脂质成分分离试剂盒	20次
G&VS10441	血影细胞完整性酶法检测试剂盒	20次
G&VS10442	血影细胞外侧面（outside out）酶法检测试剂盒	20次
G&VS10443	血影细胞内侧面（inside out）检测试剂盒	20次
G&VS10444	血影细胞膜流动性（membrane fluid）荧光检测试剂盒	20次
G&VS10445	血影细胞蛋白包装完全试剂盒	20次
G&VS10446	血影细胞PEG融合法蛋白转导试剂盒	10次