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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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细胞总抗氧化能力（TAC）荧光法（ORAC）定量检测试剂盒产品说明书

发布时间：2026/9/2 14:30:56 阅读次数：43

细胞总抗氧化能力（TAC）荧光法（ORAC）定量检测试剂盒产品说明书

主要用途

细胞总抗氧化能力（TAC）荧光法（ORAC）定量检测试剂是一种旨在通过使用荧光素探针，受到有机氮自由基AAPH的破坏，但在抗氧化剂的存在下，得到抑制，由此通过荧光分光光度仪，观察其峰值下降程度的变化，来定量检测对应于标准水溶性生育酚Trolox的总抗氧化能力，即消除自由基等值浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于适用于各种新鲜细胞样品总抗氧化能力检测。产品严格无菌，即到即用，操作简易，性能稳定。

技术背景

超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2^-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH^-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO^-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO^-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO^-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡，甚而导致诸如冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。在生物系统内，通过抗氧化酶例如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等，大分子，例如白蛋白、铜蓝蛋白（ceruloplasmin；CER）、铁蛋白（ferritin）和抗氧化因子，例如生育醇、类胡萝卜素、抗坏血酸、还原性谷胱甘肽和尿酸胆红素（bilirubin）等，产生抗氧化能力，即捕获自由基的能力，达到消除或降低ROS的损害。通过氧自由基吸光能力（oxygen radical absorbance capacity；ORAC），即使用荧光素（fluorescein）作为探针，2,2'-偶氮二异丁基脒二盐酸盐（2,2-azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride；AAPH）作为过氧自由基供体（peroxyl radical donor），其攻击探针，产生荧光淬灭，一旦受到抗氧化剂作用，而防止荧光消失，由此评价抗氧化潜力和活性，也就是自由基去除作用（free radical scavenging），在荧光分光光度仪（激发波长485nm±20，散发波长528nm±20）的帮助下，观察其峰值下降程度的变化，并与标准化抗氧化剂水溶性生育酚Trolox对照。

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

低渗液（Reagent B）毫升

缓冲液（Reagent C）毫升

染色液（Reagent D）毫升

氧化液（Reagent E）管

标准液（Reagent F）微升

产品说明书 1份

保存方式

保存清理液（Reagent A）、低渗液（Reagent B）和缓冲液（Reagent C）在4℃冰箱里，其余的保存在－20℃冰箱里，避免光照；有效保证6月

用户自备

15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

1.5毫升离心管：用于标准样品配制的容器

4℃（微型）台式离心机：用于样品操作

细胞刮脱棒：用于脱离细胞

超声仪：用于破碎细胞

200微升1厘米光径比色皿或黑色96孔板：用于荧光分析的容器

荧光分光光度仪或荧光酶标仪：用于荧光分析

实验步骤

一、 样品准备

1．准备好25cm²细胞培养瓶或60mm细胞培养皿的待测培养细胞（1至5 X 10⁶细胞）

2．小心加入xx毫升清理液（Reagent A），覆盖生长表面

3．小心抽去清理液

4．使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞（注意：可以使用胰酶消化）

5．加入xx毫升清理液（Reagent A），混匀细胞

6．移入到预冷的2毫升离心管（注意：悬浮细胞从这一步骤开始）

7．放进4℃台式离心机离心5分钟，速度为300g

8．小心抽去上清液

9．加入xx微升低渗液（Reagent B），混匀

10．置于200瓦超声仪枪头下，离心管在冰槽里

11．超声功率为100％，猝击10秒，2个循环

12．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为10000g（或10000RPM，例如eppendorf 5415）

13．移取上清液到新的4℃预冷的1.5毫升离心管

14．移取10微升进行蛋白定量检测（建议使用 BCA蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30031.1）

15．使用清理液（Reagent A）调整蛋白浓度为100微克/25微升

16．置于冰槽里待测

二、标准液准备

1．准备好5个1.5毫升离心管，标记为1至5号管

2．分别加入xx微升缓冲液（Reagent C）到2至5号管

3．移取xx微升标准液（Reagent F）到1号管，混匀

4．小心移取xx微升1号管的标准液（Reagent F）到2号管，混匀

5．小心移取xx微升2号管稀释的标准液（Reagent F）到3号管，混匀

6．小心移取xx微升3号管稀释的标准液（Reagent F）到4号管，混匀

7．将1至5号管放进冰槽里备用，避免光照；标准管浓度见下表

管号	缓冲液（Reagent C）	标准液（Reagent F）	测定体系标准 Trolox浓度
1	0	xx微升	xx微摩尔/升
2	xx微升	xx微升	xx微摩尔/升
3	xx微升	xx微升	xx微摩尔/升
4	xx微升	xx微升	xx微摩尔/升
5	xx微升	0	0

三、 样品测读

实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂置于室温下融化，移取xx毫升缓冲液（Reagent C）到xx管氧化液（Reagent E）里，混匀，置于暗室里，标记为氧化工作液，避免光照。然后进行下列操作。

1．准备1个黑色96孔板，做好标记：最大对照孔、标准样品孔、待测样品孔

2．分别移取xx微升染色液（Reagent D）到黑色96孔板里的每个孔里

3．加入xx微升缓冲液（Reagent C）到最大对照孔

4．加入xx微升上述配制的标准液（Reagent F）到相应标准样品孔里

5．加入25微升样品（100微克蛋白总量）到待测样品孔里

6．放进37℃培养箱里孵育30分钟

7．分别加入xx微升氧化工作液到标准样品孔和待测样品孔里

8．加入xx微升缓冲液（Reagent C）到最大对照孔

9．轻轻摇动黑色96孔板，使其混匀

10．放进37℃培养箱里孵育15分钟

11．即刻放进荧光分光光度仪或荧光酶标仪里测读：激发波长485nm±20，散发波长528nm±20

12．分析结果：

1）构建标准曲线：纵座标（Y轴）为荧光单位；横座标（X轴）为标准Trolox浓度（微摩尔/升）

2）最大对照孔为最大荧光单位读数

3）标准样品孔和待测样品孔为实际荧光单位读数

4）根据标准曲线获得样品对应Trolox浓度（微摩尔/升）

5）计算样品实际总抗氧化能力

注意事项

1．本产品为50次操作，包括标准品

2．本产品测试范围为100纳摩尔至1微摩尔Trolox等值

3．操作时，须戴手套

4．样品制备的所有操作均须在4℃状态下进行

5．用户可以调整标准曲线区间

6．测试前，样品须新鲜收集

7．样品须清澈

8．样品读数越高，下降程度越小，抗氧化能力越高

9．可以使用比色皿检测

10．如果样品抗氧化剂浓度过高或过低，建议稀释或增加样品容量或浓度

11．如果测试样品很多，建议使用排枪移液

12．本公司提供系列抗氧化分析试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定检测敏感

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS10477.1 细胞总抗氧化能力荧光法（ORAC）定量检测试剂盒 50次

G&VS10477.1A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS10477.1B 低渗液（Reagent B）毫升

G&VS10477.1C 缓冲液（Reagent C）毫升

G&VS10477.1D 染色液（Reagent D）毫升

G&VS10477.1E 氧化液（Reagent E）管

G&VS10477.1F 标准液（Reagent F）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS10053.1	细胞总抗氧化能力（TAC）化学发光法定量检测试剂盒	50次
G&VS10053.2	组织总抗氧化能力（TAC）化学发光法定量检测试剂盒	50次
G&VS10053.3	食物总抗氧化能力（TAC）化学发光法定量检测试剂盒	50次
G&VS10053.4	体液总抗氧化能力（TAC）化学发光法定量检测试剂盒	50次
G&VS10114.1	细胞总抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量检测试剂盒	50次
G&VS10114.2	组织总抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量检测试剂盒	50次
G&VS10114.3	食物总抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量检测试剂盒	50次
G&VS10114.4	体液总抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量检测试剂盒	50次
G&VS10131.1	细胞总抗氧化能力（TAC）比色法（DPPH）定量检测试剂盒	50次
G&VS10131.2	组织总抗氧化能力（TAC）比色法（DPPH）定量检测试剂盒	50次
G&VS10131.3	食物总抗氧化能力（TAC）比色法（DPPH）定量检测试剂盒	50次
G&VS10131.4	体液总抗氧化能力（TAC）比色法（DPPH）定量检测试剂盒	50次
G&VS10476.1	细胞总抗氧化能力（TAC）比色法（FRAP）定量检测试剂盒	50次
G&VS10476.2	组织总抗氧化能力（TAC）比色法（FRAP）定量检测试剂盒	50次
G&VS10476.3	食物总抗氧化能力（TAC）比色法（FRAP）定量检测试剂盒	50次
G&VS10476.4	体液总抗氧化能力（TAC）比色法（FRAP）定量检测试剂盒	50次
G&VS10477.1	细胞总抗氧化能力（TAC）荧光法（ORAC）定量检测试剂盒	50次
G&VS10477.2	组织总抗氧化能力（TAC）荧光法（ORAC）定量检测试剂盒	50次
G&VS10477.3	食物总抗氧化能力（TAC）荧光法（ORAC）定量检测试剂盒	50次
G&VS10477.4	体液总抗氧化能力（TAC）荧光法（ORAC）定量检测试剂盒	50次