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发布时间:2026/9/2 14:37:57 阅读次数:44
红细胞渗透脆性(osmotic fragility)检测试剂盒产品说明书
主要用途
红细胞渗透脆性(osmotic fragility)检测试剂是一种旨在通过红细胞在低渗溶液中,达到一定比值,细胞膜孔出现,爆破,血红蛋白释放,通过可见光(540nm)吸收进行定量分析,评价红细胞的脆性强弱程度的技术方法。其适用于各种动物或人体红细胞渗透脆性程度的定量分析。产品即到即用,性能稳定,简易方便,定量准确。
技术背景
红细胞渗透脆性测试(osmotic fragility test;OFT)是一种检测红细胞溶解性,来评价其应对渗透压力的功能,反映红细胞膜的伸展弹性,用以诊断溶血性疾病,包括遗传性球形细胞增多症(hereditary spherocytosis)、自动免疫性溶血性贫血(autoimmune hemolytic anemia)、地中海贫血(thalassemia)等。正常状态下,红细胞膜具有气体交换,抵御高强度的剪切力(shear force),机械性稳定和柔韧性的能力。遗传性球形细胞增多症为红细胞骨架蛋白的生殖系突变,引起红细胞缺陷,表现为细胞呈现圆球状,难以伸展,脆性增强。红细胞在低渗溶液中,基于渗透性获取水分,导致细胞膨胀。一旦超过细胞表面积与容量之比,细胞膜孔出现,裂开,细胞爆破,血红蛋白释放,通过可见光(540nm)吸收进行定量分析,评价红细胞的脆性强弱特质。
产品内容
渗透液(Reagent A) 毫升
稀释液(Reagent B) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在室温下,有效保证6月
用户自备
15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器
恒温水槽:用于反应孵育
台式离心机:用于样品操作
3毫升1厘米光径比色皿:用于比色分析的容器
分光光度仪:用于样品比色测定
实验步骤
一、 测定准备
1. 准备好待测的血液样品(注意:采血后2小时内检测为佳;建议使用肝素抗凝管)
2. 设定好分光光度仪:波长540nm,并置零
3. 准备好13个15毫升锥形离心管,标记为1至13号管
4. 按照下表配制测试液
5. 置于室温下备用
| 管号 | 渗透液浓度(%) | 稀释液(Reagent B) | 渗透液(Reagent A) |
| 1 | 0.85 | 1.5 | 8.5 |
| 2 | 0.75 | 2.5 | 7.5 |
| 3 | 0.65 | 3.5 | 6.5 |
| 4 | 0.60 | 4.0 | 6.0 |
| 5 | 0.55 | 4.0 | 5.5 |
| 6 | 0.50 | 5.0 | 5.0 |
| 7 | 0.45 | 5.50 | 4.5 |
| 8 | 0.40 | 6.0 | 4.0 |
| 9 | 0.35 | 6.0 | 3.5 |
| 10 | 0.30 | 7.0 | 3.0 |
| 11 | 0.20 | 8.0 | 2.0 |
| 12 | 0.10 | 9.0 | 1.0 |
| 13 | 0.00 | 10.0 | 0.0 |
二、比色测定
1. 准备好上述表格拟定的13管测试管:标记为1至13号管,每管10毫升
2. 分别加入xx微升待测血液样品到每一管里,混匀
3. 室温下孵育30分钟
4. 放进台式离心机离心5分钟,速度为1300g
5. 即刻分别移入3毫升上清液到3毫升比色皿,放进分光光度仪(540nm波长)测读:获得吸光读数(OD)
6. 计算溶血百分比:(正常参考范围为开始溶血的渗透浓度0.5%,完全溶血0.3%)
【OD(1至12号管的任一测试管)÷OD(13号管;完全溶血管)】X 100%=溶血%
7. 构建渗透脆性曲线:纵座标(Y轴)为溶血百分比;横座标(X轴)为标准渗透液浓度(%)
8. 计算平均红细胞脆性(median corpuscular fragility;MCF)或平均渗透性(median permeation):根据渗透脆性曲线获得50%溶血率所对应的渗透液浓度(%)(注意:正常参考值为4至4.45%)
注意事项
1. 本产品为20次操作
2. 操作时,须戴手套
3. 避免使用已经溶血的血液样品
4. 用户需要自行建立正常参考值
5. 脆性温和异常的血液样品,需要37℃孵育24小时
6. 用户可以选择1、4、6、8、10、13号管检测即可
7. 红细胞溶血越快,细胞渗透脆性就越高。
8. 结果分析参考:
| 溶血范围 | 意义 | 诊断参考 |
| 0.5%—0.3% | 正常对照值 | 正常;或遗传性棘红细胞增多症;卵形红细胞症 |
| 0.3%—0.2% | 异常(渗透脆性降低) | 地中海贫血;血红蛋白S病(镰状细胞病/镰状细胞贫血);缺铁性贫血;薄红细胞增多;阻塞性黄疸;珠蛋白障碍性贫血,血红蛋白C、D、E病;脾切除术后及肝脏疾病 |
| 0.7%—0.5% | 异常(渗透脆性增高) | 自动免疫性溶血性贫血;遗传性或获得性球形细胞增多症;遗传性裂口紅細胞症; |
| 0.85%—0.75% |
| pH、温度、环境影响 |
9. 本公司提供系列脆性测试分析试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定检测准确
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS10461.1 红细胞渗透脆性(osmotic fragility)检测试剂盒 20次
G&VS10461.1A 渗透液(Reagent A) 毫升
G&VS10461.1B 稀释液(Reagent B) 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS10461.1 | 红细胞渗透脆性(osmotic fragility)检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10461.2 | 红细胞脆性(fragility)AGLT检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10461.3 | 红细胞脆性(fragility)PINK检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10461.4 | 红细胞脆性(fragility)定性检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10461.5 | 红细胞脆性(fragility)伊红-5-马来酰亚胺(EMA)结合检测试剂盒 | 20次 |
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