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红细胞渗透脆性(osmotic fragility)检测试剂盒产品说明书

发布时间:2026/9/2 14:37:57      阅读次数:44

 

红细胞渗透脆性(osmotic fragility)检测试剂盒产品说明书

 

主要用途

红细胞渗透脆性(osmotic fragility)检测试剂是一种旨在通过红细胞在低渗溶液中,达到一定比值,细胞膜孔出现,爆破,血红蛋白释放,通过可见光(540nm)吸收进行定量分析,评价红细胞的脆性强弱程度技术方法其适用于各种动物或人体红细胞渗透脆性程度的定量分析。产品即到即用,性能稳定,简易方便,定量准确。

 

技术背景

红细胞渗透脆性测试(osmotic fragility testOFT)是一种检测红细胞溶解性,来评价其应对渗透压力的功能,反映红细胞膜的伸展弹性,用以诊断溶血性疾病,包括遗传性球形细胞增多症(hereditary spherocytosis、自动免疫性溶血性贫血(autoimmune hemolytic anemia)、地中海贫血thalassemia)等。正常状态下,红细胞膜具有气体交换,抵御高强度的剪切力(shear force),机械性稳定和柔韧性的能力。遗传性球形细胞增多症为红细胞骨架蛋白的生殖系突变,引起红细胞缺陷,表现为细胞呈现圆球状,难以伸展,脆性增强。红细胞在低渗溶液中,基于渗透性获取水分,导致细胞膨胀。一旦超过细胞表面积与容量之比,细胞膜孔出现,裂开,细胞爆破,血红蛋白释放,通过可见光(540nm)吸收进行定量分析,评价红细胞的脆性强弱特质 

 

产品内容

渗透液(Reagent A 毫升

稀释液(Reagent B 毫升

产品说明书                  1

 

保存方式

保存室温下,有效保证6

 

用户自备

15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器

恒温水槽:用于反应孵育

台式离心机:用于样品操作

3毫升1厘米光径比色皿:用于比色分析的容器

分光光度仪:用于样品比色测定

 

实验步骤

一、 测定准备

1. 准备好待测的血液样品(注意:采血后2小时内检测为佳;建议使用肝素抗凝管)

2. 设定好分光光度仪:波长540nm,并置零

3. 准备好1315毫升锥形离心管,标记为113号管

4. 按照下表配制测试

5. 置于室温下备用

管号

渗透液浓度(%

稀释液(Reagent B

 渗透液(Reagent A

1

0.85

1.5

8.5

2

0.75

2.5

7.5

3

0.65

3.5

6.5

4

0.60

4.0

6.0

5

0.55

4.0

5.5

6

0.50

5.0

5.0

7

0.45

5.50

4.5

8

0.40

6.0

4.0

9

0.35

6.0

3.5

10

0.30

7.0

3.0

11

0.20

8.0

2.0

12

0.10

9.0

1.0

13

0.00

10.0

0.0

 

二、比色测定

1. 准备好上述表格拟定的13管测试管:标记113号管,每管10毫升

2. 分别加入xx微升待测血液样品到每一管里,混匀

3. 室温下孵育30分钟

4. 放进台式离心机离心5分钟,速度为1300g

5. 即刻分别移入3毫升上清液3毫升比色皿,放进分光光度仪540nm波长)测读:获得吸光读数OD

6. 计算溶血百分比:(正常参考范围为开始溶血的渗透浓度0.5%,完全溶血0.3%

 

OD112号管的任一测试管)÷OD13号管;完全溶血管)】X 100%=溶血%

 

7. 构建渗透脆性曲线:纵座标(Y轴)为溶血百分比;横座标(X轴)为标准渗透液浓度(%

8. 计算平均红细胞脆性(median corpuscular fragilityMCF)或平均渗透性(median permeation):根据渗透脆性曲线获得50%溶血率所对应的渗透液浓度(%)(注意:正常参考值为44.45%

 

注意事项

1. 本产品为20次操作

2. 操作时,须戴手套

3. 避免使用已经溶血的血液样品

4. 用户需要自行建立正常参考值

5. 脆性温和异常的血液样品,需要37孵育24小时

6. 用户可以选择14681013号管检测即可

7. 红细胞溶血越快,细胞渗透脆性就越高。

8. 结果分析参考:

溶血范围

意义

诊断参考

0.5%0.3%

正常对照值

正常;或遗传性棘红细胞增多症卵形红细胞症

0.3%0.2%

异常(渗透脆性降低)

地中海贫血血红蛋白S病(镰状细胞病/镰状细胞贫血);缺铁性贫血;薄红细胞增多阻塞性黄疸;珠蛋白障碍性贫血,血红蛋白CDE脾切除术后及肝脏疾病

0.7%0.5%

异常(渗透脆性增高)

自动免疫性溶血性贫血;遗传性或获得性球形细胞增多症;遗传性裂口紅細胞症

0.85%0.75%

 

pH、温度、环境影响

 

9. 本公司提供系列脆性测试分析试剂产品

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定检测准确

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORKRECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

订购信息

单组分订购信息

编号                 名称                      规格

G&VS10461.1               红细胞渗透脆性(osmotic fragility)检测试剂盒   20

G&VS10461.1A     渗透液(Reagent A                   毫升

G&VS10461.1B     稀释液(Reagent B                   毫升

 

试剂盒订购信息

产品编号

名称

规格

G&VS10461.1

红细胞渗透脆性(osmotic fragility)检测试剂盒

20

G&VS10461.2

红细胞脆性(fragilityAGLT检测试剂盒

20

G&VS10461.3

红细胞脆性(fragilityPINK检测试剂盒

20

G&VS10461.4

红细胞脆性(fragility)定性检测试剂盒

20

G&VS10461.5

红细胞脆性(fragility伊红-5-马来酰亚胺(EMA)结合检测试剂盒

20

 


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