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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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真菌/酵母细胞过氧化物体（peroxisome）高纯分离试剂盒产品说明书

发布时间：2026/9/3 10:40:44 阅读次数：5

真菌/酵母细胞过氧化物体（peroxisome）高纯分离试剂盒产品说明书

主要用途

真菌/酵母细胞过氧化物体（peroxisome）高纯分离试剂盒是一种旨在使用生物、化学和物理方法相结合，有效去除真菌/酵母菌细胞壁，进一步快速且充分裂解真菌/酵母菌细胞，从而分离出高度纯化的活性过氧化物体细胞器的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种新鲜培养或冻存的野生型或突变型真菌/酵母菌菌株细胞的活性过氧化物体的制备。其制备物产量高，活性保证，纯度可达99％。可以被用于脂质β-氧化、氨基酸代谢、糖醚链接甘油酯类生物合成、蛋白组学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能稳定。

技术背景

过氧化物体（peroxisome）细胞器在大多数真核和原核细胞中普遍存在，为异质性（heterogenous）球状颗粒（spherical particle），0.2至1微米直径，含有70多种蛋白，主要为酶蛋白。在哺乳动物的肝和肾脏中最为丰富。一旦过氧化物体异常，将导致泽尔韦格（Zellweger）综合征。从任何组织或细胞分离过氧化物体的技术方法基本上采用：第一，通过机械或化学方法破裂细胞；第二，通过低速差速离心去除残渣碎屑和巨大细胞器；第三，通过高速差速离心获得过氧化物体；甚至，第四，可以通过等密度离心获得纯度更高的过氧化物体。

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

平衡液（Reagent B）毫升

酶解液（Reagent C）微升

裂解液（Reagent D）毫升

净化液（Reagent E）毫升

保存液（Reagent F）毫升

活性液（Reagent G）微升

高纯液A（Reagent H）毫升

高纯液B（Reagent I）毫升

高纯液C（Reagent J）毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存清理液（Reagent A）、平衡液（Reagent B）、裂解液（Reagent D）和高纯液A/B/C（Reagent H/I/J）在4℃冰箱里，其余的保存在—20℃冰箱里，严格避免污染；有效保证6月

用户自备

15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

50毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

1.5毫升离心管：用于样品操作的容器

4℃台式离心机：用于沉淀细胞

4℃超速离心机：用于分离细胞器成分

恒温水槽：用于孵育反应物

DOUNCE匀浆器：用于裂解细胞

实验步骤

实验开始前，将试剂盒里的净化液（Reagent E）和活性液（Reagent G）冻融，然后移出xx微升活性液（Reagent G）和xx毫升净化液（Reagent E）到4毫升的裂解液（Reagent D）里，混匀后，置入冰槽里，标记为裂解工作液。然后进行下列操作。

1．准备好50毫升新鲜真菌/酵母菌样品

2．在分光光度仪上测OD600＝1.0（1 OD＝1 X 10⁷细胞/毫升；总量为5 X 10⁸细胞）

3．转移到预冷的50毫升锥形离心管

4．放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为3000g

5．小心抽去上清液

6．加入xx毫升清理液（Reagent A），混匀

7．放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为3000g

8．小心抽去上清液

9．加入xx毫升平衡液（Reagent B），混匀

10．放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为3000g

11．小心抽去上清液

12．加入xx毫升平衡液（Reagent B），混匀

13．加入xx微升酶解液（Reagent C），混匀

14．放进30℃恒温水槽孵育60分钟，期间每隔15分钟轻轻用手摇匀

15．加入xx毫升平衡液（Reagent B），混匀

16．放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为3000g

17．小心抽去上清液

18．加入xx毫升平衡液（Reagent B），混匀

19．放进30℃恒温水槽孵育30分钟，继续实验步骤21

20．同时将平衡液（Reagent B）置入冰槽里预冷30分钟（注意：以下步骤在4℃环境下进行）

21．放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为3000g

22．小心抽去上清液

23．加入xx毫升预冷的平衡液（Reagent B），混匀

24．放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为3000g

25．小心抽去上清液

26．加入xx毫升含有裂解液（Reagent D）、净化液（Reagent E）和活性液（Reagent G）的裂解工作液

27．涡旋震荡5秒，充分混匀细胞颗粒群

28．即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器

29．在冰槽里用匀浆帮匀化细胞，直至细胞颗粒消失（注意：参见注意事项10）

30．将所有细胞匀浆物移入15毫升锥形离心管

31．放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为500g

32．小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管——此步骤去除细胞核和未溶解的细胞

33．放进4℃台式高速离心机离心25分钟，速度为20000g

34．小心抽去上清液，保留沉淀颗粒——此步骤获得过氧化物体沉淀物

35．加入xx毫升保存液（Reagent F），充分混匀

36．即刻移入到15毫升锥形离心管

37．加入xx毫升高纯液B（Reagent I）,混匀（注意：使用前摇匀高纯液B(Reagent I )）

38．放进冰槽里备用

39．移取xx毫升的高纯液A（Reagent H）到8毫升超速离心管（注意：使用前摇匀高纯液A(Reagent H)）

40．轻轻加入4毫升上述过氧化物体混匀液在高纯液A（Reagent H）的上面，避免震动

41．轻轻加入xx毫升高纯液C（Reagent J）在上述过氧化物体混匀液的上面，避免震动（注意：使用前摇匀高纯液C(Reagent J )）

42．放进4℃超速离心机离心90分钟，速度为100000g

43．小心取出超速离心管：可见管底松动的乳黄色样品颗粒

44．小心抽去上清液

45．小心加入xx微升保存液（Reagent F），充分混匀

46．转移到2毫升离心管

47．即刻放进—70℃冰箱里保存

注意事项

1．本产品为10次操作（50毫升菌液：1克细胞湿重或5 X 10⁸细胞）

2．其它实际操作的细胞量与试剂使用量按比例调整：例如10毫升菌液（OD600=1）：试剂用量是标准用量的五分之一

3．操作时，须戴手套

4．操作时，避免污染母液

5． 50毫升（OD600＝1）菌液湿重约1克

6．细胞生长条件影响过氧化物体的质量：建议在有氧条件下富含葡萄糖的培养基培养

7．实验步骤20以下的所有操作均须在4℃或以下状态下进行

8．建议使用足够的细胞量

9．建议严格控制操作时间

10．通常匀化次数为40下（或细胞颗粒群消失为止）达到80％的细胞裂解为理想状态，但不同菌株的细胞会存在差异。用户可以通过显微镜观察3微升匀浆物的细胞裂解程度：完整细胞呈现发亮的圆环。低于50％可以增加匀化次数

11．制备产物如果放在－70℃冰箱里储存备用，严格避免反复冻融

12．通常1克细胞湿重或5 X 10⁸细胞的过氧化物体含量为1毫克过氧化物体蛋白

13．本产品所获得的过氧化物体纯度（可达到99％）

14．使用高纯液A/B/C（Reagent H/I/J）前，须摇匀后加入；并注意避免污染母液

15．根据超速离心管的大小调整高纯液A/B/C（Reagent H/I/J）的使用量或在样品上面加上矿物油填满

16．过氧化物体正常活性测定方法是： CATALASE、HYDROXYPYRUVATE REDUCTASE等

17．本公司提供系列过氧化物体分析试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定分离的过氧化物体内外膜完整

3．本产品经鉴定分离的过氧化物体维持正常活性

4．本产品经鉴定不含污染性蛋白酶和核酶

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS10483.3 真菌/酵母细胞过氧化物体高纯分离试剂盒 10次

G&VS10483.3A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS10483.3B 平衡液（Reagent B）毫升

G&VS10483.3C 酶解液（Reagent C）毫升

G&VS10483.3D 裂解液（Reagent D）毫升

G&VS10483.3E 净化液（Reagent E）微升

G&VS10483.3F 保存液（Reagent F）毫升

G&VS10483.3G 活性液（Reagent G）毫升

G&VS10483.3H 高纯液A（Reagent H）毫升

G&VS10483.3I 高纯液B（Reagent I）毫升

G&VS10483.3J 高纯液C（Reagent J）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS10119.1	细胞/组织过氧化物体（peroxisome）粗提分离试剂盒	10次
G&VS10119.2	细胞/组织活性过氧化物体（peroxisome）分离试剂盒	10次
G&VS10119.3	细胞/组织过氧化物体（peroxisome）高纯分离试剂盒	10次
G&VS10483.1	真菌/酵母细胞过氧化物体（peroxisome）粗提分离试剂盒	10次
G&VS10483.2	真菌/酵母细胞活性过氧化物体（peroxisome）分离试剂盒	10次
G&VS10483.3	真菌/酵母细胞过氧化物体（peroxisome）高纯分离试剂盒	10次
G&VS10484.1	植物过氧化物体（peroxisome）粗提分离试剂盒	10次
G&VS10484.2	植物活性过氧化物体（peroxisome）分离试剂盒	10次
G&VS1484.3	植物过氧化物体（peroxisome）高纯分离试剂盒	10次
G&VS10485	分离过氧化物体纯度双酶法（catalase/COX）检测试剂盒	20次
G&VS10486	分离过氧化物体（peroxisome）纯度标志酶过氧化氢酶（catalase）酶法检测试剂盒	20次
G&VS10487	分离过氧化物体（peroxisome）纯度标志酶羟基丙酮酸还原酶（hydroxypyruvate reductase）酶法检测试剂盒	20次
G&VS10488	过氧化物体PMP70免疫组化检测试剂盒	10次