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干细胞成骨分化潜力比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间:2026/9/3 10:42:59      阅读次数:3

 

干细胞成分化潜力比色法定量检测试剂盒产品说明书

 

主要用途

干细胞成分化潜力比色法定量检测试剂是一种旨在通过鳌和技术,使钙离子和茜素红S产生复合物,显示橘红色,在分光光度仪上进行比色测定,分析成骨细胞分化和组织形成程度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种人体和动物干细胞的成细胞分化程度分析。产品严格无菌,即到即用,性能稳定,着色清晰。

 

技术背景

间质干细胞(mesenchymal stem cell)分化产生脂肪细胞(adipocyte)、成骨细胞(osteoblast)、肌细胞(myocyte和软骨细胞(chondrocyte)。成骨细胞(osteoblast)是特定的成纤维细胞,分泌和矿物化骨基质。矿物化的细胞外基质由I型胶原蛋白、骨钙素(osteocalcin)、基质gla蛋白(matrix gla protein)、骨桥蛋白(osteopontin)、骨涎蛋白 ( bone sialoprotein)BMPTGF-β、羟基磷灰石(hydroxyapatite等组成。成骨细胞的分化分成三个阶段:细胞繁殖、基质成熟、基质矿物化。其中矿物化完成的标志为钙沉积,表明骨形成。茜素红(ALIZARIN RED S)是一种蒽醌(anthraquinone)衍生物:9,10-二氢-3,4-二羟基-9,10-二氧代-2-蒽磺酸单钠盐(9,10-Dihydro-3,4-dihydroxy-9,10-dioxo-2-anthracenesulfonic acid sodium salt),又称媒介红 3Mordant Red 3)或茜素磺酸钠(Sodium alizarinesulfonate)。其分子式为C14H7NaO7S,分子量为342.25。茜素红和钙离子以鳌和方式形成复合物,用以识别成骨细胞的成熟和骨形成。通过茜素红染色,产生桔红色沉积。在分光光度或酶标仪上(562nm波长)进行测定,来定量分析成骨细胞分化和组织形成的程度。

 

产品内容

清理液(Reagent A毫升

固着液(Reagent B毫升

净化液(Reagent C  毫升

染色液(Reagent D  毫升

溶解液Reagent E  毫升

产品说明书                   1

 

保存方式

保存染色液(Reagent D)在4℃冰箱里,其余的保存在室温下;确保瓶盖密闭。染色液(Reagent D),避免光照有效保证6

 

用户自备

显微镜:用于观察细胞染色情况

平式摇荡仪:用于染色萃取的混匀

比色皿或多孔板:用于比色分析的容器

分光光度仪或酶标仪:用于定量检测成细胞

 

实验步骤

1. 小心抽掉多孔细胞培养板里的培养液

2. 轻轻加入适量的清理液(Reagent A到每个培养孔里(见下表)

多孔培养板

容量

96

xx 毫升

48

xx 毫升

24

xx 毫升

12

xx 毫升

6

xx 毫升

 

3. 小心抽去清理液

4. 小心加入适量的-20预冷的固着液(Reagent B到每个培养孔里(见实验步骤2表)

5. -20冰箱里孵育60分钟

6. 小心抽去固着液

7. 小心加入适量的净化液(Reagent C到每个培养孔里(见实验步骤2表)

8. 小心抽去净化液

9. 小心加入适量的染色液(Reagent D到每个培养孔里(见下表)

多孔培养板

容量

96

xx 微升

48

xx 微升

24

xx 微升

12

xx 毫升

6

xx 毫升

 

10. 在室温下静置10分钟

11. 小心抽去染色液

12. 小心加入适量的净化液(Reagent C到每个培养孔里(见实验步骤2表)

13. 小心抽去净化液

14. 重复实验步骤1213二次,或净化液不再显示红色

15. (选择步骤)置于一般光学显微镜下观察染色情况:成骨细胞呈现红色

16. 小心加入适量的溶解液(Reagent E(见下表)

 

 

多孔培养板

容量

96

xx 微升

48

xx 微升

24

xx 微升

12

xx微升

6

xx 毫升

17. 轻轻摇动培养板,直到溶解液Reagent E均匀分布

18. 置于平式摇荡仪,在室温下,孵育15分钟,速度为50RPM

19. (选择步骤)移入到比色皿

20. 即刻放进分光光度仪或酶标仪测读,波长为562 nm

21. 构建成细胞定量曲线:横座标(x轴)为细胞浓度(细胞量);纵坐标(y轴)为样品读数(吸光单位OD值)

注意事项

1. 本产品为20次(24孔板)、50次(48孔板)、100次(96孔板)操作

2. 操作时须戴手套

3. 试剂瓶务必密封保存

4. 染色时,避免光照

5. 细胞染色前后的清洗过程中,小心操作,以免将细胞冲洗掉,而影响定量分析

6. 本公司提供系列干细胞分化检测试剂产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定着色清晰

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORKRECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

订购信息

单组分订购信息

编号           名称                     规格

G&VS10490    干细胞成分化潜力比色法定量检测试剂盒   20/100

G&VS10490A    清理液(Reagent A               毫升

G&VS10490B    固着液(Reagent B               毫升

G&VS10490C    净化液(Reagent C                毫升

G&VS10490D    染色液(Reagent D                毫升

G&VS10490E    溶解液Reagent E                毫升

 

试剂盒订购信息

产品编号

名称

规格

G&VS10105

干细胞成脂分化潜力定性染色试剂盒

20/100

G&VS10106

干细胞成脂分化潜力比色法定量检测试剂盒

20/100

G&VS10490

干细胞成分化潜力比色法定量检测试剂盒

20/100

G&VS10491

干细胞软骨细胞分化潜力比色法定量检测试剂盒

20/100

 


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