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发布时间:2026/9/3 10:42:59 阅读次数:3
干细胞成骨分化潜力比色法定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
干细胞成骨分化潜力比色法定量检测试剂是一种旨在通过鳌和技术,使钙离子和茜素红S产生复合物,显示橘红色,在分光光度仪上进行比色测定,以分析成骨细胞分化和骨组织形成程度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种人体和动物干细胞的成骨细胞分化程度分析。产品严格无菌,即到即用,性能稳定,着色清晰。
技术背景
间质干细胞(mesenchymal stem cell)分化产生脂肪细胞(adipocyte)、成骨细胞(osteoblast)、肌细胞(myocyte和软骨细胞(chondrocyte)。成骨细胞(osteoblast)是特定的成纤维细胞,分泌和矿物化骨基质。矿物化的细胞外基质由I型胶原蛋白、骨钙素(osteocalcin)、基质gla蛋白(matrix gla protein)、骨桥蛋白(osteopontin)、骨涎蛋白 ( bone sialoprotein)、BMP、TGF-β、羟基磷灰石(hydroxyapatite)等组成。成骨细胞的分化分成三个阶段:细胞繁殖、基质成熟、基质矿物化。其中矿物化完成的标志为钙沉积,表明骨形成。茜素红(ALIZARIN RED S)是一种蒽醌(anthraquinone)衍生物:9,10-二氢-3,4-二羟基-9,10-二氧代-2-蒽磺酸单钠盐(9,10-Dihydro-3,4-dihydroxy-9,10-dioxo-2-anthracenesulfonic acid sodium salt),又称媒介红 3(Mordant Red 3)或茜素磺酸钠(Sodium alizarinesulfonate)。其分子式为C14H7NaO7S,分子量为342.25。茜素红和钙离子以鳌和方式形成复合物,用以识别成骨细胞的成熟和骨形成。通过茜素红染色,产生桔红色沉积。在分光光度仪或酶标仪上(562nm波长)进行测定,来定量分析成骨细胞分化和骨组织形成的程度。
产品内容
清理液(Reagent A) 毫升
固着液(Reagent B) 毫升
净化液(Reagent C) 毫升
染色液(Reagent D) 毫升
溶解液(Reagent E) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存染色液(Reagent D)在4℃冰箱里,其余的保存在室温下;确保瓶盖密闭。染色液(Reagent D),避免光照;有效保证6月
用户自备
显微镜:用于观察细胞染色情况
平式摇荡仪:用于染色萃取的混匀
比色皿或多孔板:用于比色分析的容器
分光光度仪或酶标仪:用于定量检测成骨细胞
实验步骤
1. 小心抽掉多孔细胞培养板里的培养液
2. 轻轻加入适量的清理液(Reagent A)到每个培养孔里(见下表)
| 多孔培养板 | 容量 |
| 96 | xx 毫升 |
| 48 | xx 毫升 |
| 24 | xx 毫升 |
| 12 | xx 毫升 |
| 6 | xx 毫升 |
3. 小心抽去清理液
4. 小心加入适量的-20℃预冷的固着液(Reagent B)到每个培养孔里(见实验步骤2表)
5. 在-20℃冰箱里孵育60分钟
6. 小心抽去固着液
7. 小心加入适量的净化液(Reagent C)到每个培养孔里(见实验步骤2表)
8. 小心抽去净化液
9. 小心加入适量的染色液(Reagent D)到每个培养孔里(见下表)
| 多孔培养板 | 容量 |
| 96 | xx 微升 |
| 48 | xx 微升 |
| 24 | xx 微升 |
| 12 | xx 毫升 |
| 6 | xx 毫升 |
10. 在室温下静置10分钟
11. 小心抽去染色液
12. 小心加入适量的净化液(Reagent C)到每个培养孔里(见实验步骤2表)
13. 小心抽去净化液
14. 重复实验步骤12和13二次,或净化液不再显示红色
15. (选择步骤)置于一般光学显微镜下观察染色情况:成骨细胞呈现橘红色
16. 小心加入适量的溶解液(Reagent E)(见下表)
| 多孔培养板 | 容量 |
| 96 | xx 微升 |
| 48 | xx 微升 |
| 24 | xx 微升 |
| 12 | xx微升 |
| 6 | xx 毫升 |
17. 轻轻摇动培养板,直到溶解液(Reagent E)均匀分布
18. 置于平式摇荡仪,在室温下,孵育15分钟,速度为50RPM
19. (选择步骤)移入到比色皿
20. 即刻放进分光光度仪或酶标仪测读,波长为562 nm
21. 构建成骨细胞定量曲线:横座标(x轴)为细胞浓度(细胞量);纵坐标(y轴)为样品读数(吸光单位OD值)
注意事项
1. 本产品为20次(24孔板)、50次(48孔板)、100次(96孔板)操作
2. 操作时须戴手套
3. 试剂瓶务必密封保存
4. 染色时,避免光照
5. 细胞染色前后的清洗过程中,小心操作,以免将细胞冲洗掉,而影响定量分析
6. 本公司提供系列干细胞分化检测试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定着色清晰
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS10490 干细胞成骨分化潜力比色法定量检测试剂盒 20/100次
G&VS10490A 清理液(Reagent A) 毫升
G&VS10490B 固着液(Reagent B) 毫升
G&VS10490C 净化液(Reagent C) 毫升
G&VS10490D 染色液(Reagent D) 毫升
G&VS10490E 溶解液(Reagent E) 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS10105 | 干细胞成脂分化潜力定性染色试剂盒 | 20/100次 |
| G&VS10106 | 干细胞成脂分化潜力比色法定量检测试剂盒 | 20/100次 |
| G&VS10490 | 干细胞成骨分化潜力比色法定量检测试剂盒 | 20/100次 |
| G&VS10491 | 干细胞软骨细胞分化潜力比色法定量检测试剂盒 | 20/100次 |
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