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发布时间:2026/9/3 10:43:59 阅读次数:3
食物总抗氧化能力(TAC)荧光法(ORAC)定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
食物总抗氧化能力(TAC)荧光法(ORAC)定量检测试剂是一种旨在通过使用荧光素探针,受到有机氮自由基AAPH的破坏,但在抗氧化剂的存在下,得到抑制,由此通过荧光分光光度仪,观察其峰值下降程度的变化,来定量检测对应于标准水溶性生育酚Trolox的总抗氧化能力,即消除自由基等值浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种新鲜食物样品总抗氧化能力检测。产品严格无菌,即到即用,操作简易,性能稳定。
技术背景
超氧自由基阴离子(superoxide radical;O2-)、过氧化氢(hydrogen peroxide;H2O2)、羟自由基或氢氧基(hydroxyl radical;OH-)、过氧化基(peroxyl radical;ROO-)、氢过氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide;NO-)、过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite anion;ONOO-)次氯酸(hypochlorous acid;HOCl)、半醌自由基(semiquinone radical)、单线态氧气(singlet oxygen)等细胞内活性氧族(Reactive Oxygen Species;ROS)的产生和增多,将导致细胞衰老或凋亡,甚而导致诸如冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。在生物系统内,通过抗氧化酶例如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等,大分子,例如白蛋白、铜蓝蛋白(ceruloplasmin;CER)、铁蛋白(ferritin)和抗氧化因子,例如生育醇、类胡萝卜素、抗坏血酸、还原性谷胱甘肽和尿酸胆红素(bilirubin)等,产生抗氧化能力,即捕获自由基的能力,达到消除或降低ROS的损害。通过氧自由基吸光能力(oxygen radical absorbance capacity;ORAC),即使用荧光素(fluorescein)作为探针,2,2'-偶氮二异丁基脒二盐酸盐(2,2-azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride;AAPH)作为过氧自由基供体(peroxyl radical donor),其攻击探针,产生荧光淬灭,一旦受到抗氧化剂作用,而防止荧光消失,由此评价抗氧化潜力和活性,也就是自由基去除作用(free radical scavenging),在荧光分光光度仪(激发波长485nm±20,散发波长528nm±20)的帮助下,观察其峰值下降程度的变化,并与标准化抗氧化剂水溶性生育酚Trolox对照。
产品内容
清理液(Reagent A) 毫升
缓冲液(Reagent B) 毫升
染色液(Reagent C) 毫升
氧化液(Reagent D) 管
标准液(Reagent E) 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存清理液(Reagent A)和缓冲液(Reagent B)在4℃冰箱里,其余的保存在-20℃冰箱里,避免光照;有效保证6月
用户自备
50毫升烧杯:用于样品操作的容器
15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器
1.5毫升离心管:用于标准样品配制的容器
4℃台式离心机:用于样品操作
200微升1厘米光径比色皿或黑色96孔板:用于荧光分析的容器
荧光分光光度仪或荧光酶标仪:用于荧光分析
实验步骤
一、 样品准备
1、固态食品处理
1. 秤取1克固态食品或粉末到50毫升烧杯,杯口封口膜密封
2. 加入XX毫升清理液(Reagent A)
3. 搅拌30分钟,充分混匀
4. 继续加入清理液(Reagent A)到终容量为10毫升
5. 过滤纸过滤,去除不溶性固体颗粒
6. 封口膜封口备用
2、液态食品处理
1. 移取5毫升待测液态食品到15毫升锥形离心管
2. 放进台式离心机离心10分钟,速度为1500g
3. 移取上清液到新的15毫升锥形离心管
4. (选择步骤)可以加入适量的清理液(Reagent A)
5. (选择步骤)过滤纸过滤(如果离心处理,样品仍然不清澈)
6. 置于冰槽里备用或放进-20冰箱里保存
二、标准液准备
1. 准备好5个1.5毫升离心管,标记为1至5号管
2. 分别加入xx微升缓冲液(Reagent B)到2至5号管
3. 移取xx微升标准液(Reagent E)到1号管,混匀
4. 小心移取xx微升1号管的标准液(Reagent E)到2号管,混匀
5. 小心移取xx微升2号管稀释的标准液(Reagent E)到3号管,混匀
6. 小心移取xx微升3号管稀释的标准液(Reagent E)到4号管,混匀
7. 将1至5号管放进冰槽里备用,避免光照;标准管浓度见下表
| 管号 | 缓冲液(Reagent B) | 标准液(Reagent E) | 测定体系 标准 Trolox浓度 |
| 1 | 0 | xx微升 | xx微摩尔/升 |
| 2 | xx微升 | xx微升 | xx微摩尔/升 |
| 3 | xx微升 | xx微升 | xx微摩尔/升 |
| 4 | xx微升 | xx微升 | xx微摩尔/升 |
| 5 | xx微升 | 0 | 0 |
三、 样品测读
实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂置于室温下融化,移取xx毫升缓冲液(Reagent B)到1管氧化液(Reagent D)里,混匀,置于暗室里,标记为氧化工作液,避免光照。然后进行下列操作。
1. 准备1个黑色96孔板,做好标记:最大对照孔、标准样品孔、待测样品孔
2. 分别移取xx微升染色液(Reagent C)到黑色96孔板里的每个孔里
3. 加入xx微升缓冲液(Reagent B)到最大对照孔
4. 加入xx微升上述配制的标准液(Reagent E)到相应标准样品孔里
5. 加入25微升样品(100微克食品总量)到待测样品孔里
6. 放进37℃培养箱里孵育30分钟
7. 分别加入25微升氧化工作液到标准样品孔和待测样品孔里
8. 加入xx微升缓冲液(Reagent B)到最大对照孔
9. 轻轻摇动黑色96孔板,使其混匀
10. 放进37℃培养箱里孵育15分钟
11. 即刻放进荧光分光光度仪或荧光酶标仪里测读:激发波长485nm±20,散发波长528nm±20
12. 分析结果:
1) 构建标准曲线:纵座标(Y轴)为荧光单位;横座标(X轴)为标准Trolox浓度(微摩尔/升)
2) 最大对照孔为最大荧光单位读数
3) 标准样品孔和待测样品孔为实际荧光单位读数
4) 根据标准曲线获得样品对应Trolox浓度(微摩尔/升)
5) 计算样品实际总抗氧化能力
6) 根据下列公式计算测定体系中样品量的总抗氧化能力(实际抑制百分率)
7) IC50:50%抑制率所需的样品单位:TROLOX等值或样品重量(毫克/毫升)或样品容量(微升)
注意事项
1. 本产品为50次操作,包括标准品
2. 本产品测试范围为100纳摩尔至1微摩尔Trolox等值
3. 操作时,须戴手套
4. 样品制备的所有操作均须在4℃状态下进行
5. 用户可以调整标准曲线区间
6. 测试前,样品须新鲜收集
7. 样品须清澈
8. 样品读数越高,下降程度越小,抗氧化能力越高
9. 可以使用比色皿检测
10. 如果样品抗氧化剂浓度过高或过低, 建议稀释或增加样品容量或浓度
11. 如果测试样品很多,建议使用排枪移液
12. 本公司提供系列抗氧化分析试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定检测敏感
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS10477.3 食物总抗氧化能力荧光法(ORAC)定量检测试剂盒 50次
G&VS10477.3A 清理液(Reagent A) 毫升
G&VS10477.3B 缓冲液(Reagent B) 毫升
G&VS10477.3C 染色液(Reagent C) 毫升
G&VS10477.3D 氧化液(Reagent D) 管
G&VS10477.3E 标准液(Reagent E) 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS10053.1 | 细胞总抗氧化能力(TAC)化学发光法定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10053.2 | 组织总抗氧化能力(TAC)化学发光法定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10053.3 | 食物总抗氧化能力(TAC)化学发光法定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10053.4 | 体液总抗氧化能力(TAC)化学发光法定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10114.1 | 细胞总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10114.2 | 组织总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10114.3 | 食物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10114.4 | 体液总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10131.1 | 细胞总抗氧化能力(TAC)比色法(DPPH)定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10131.2 | 组织总抗氧化能力(TAC)比色法(DPPH)定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10131.3 | 食物总抗氧化能力(TAC)比色法(DPPH)定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10131.4 | 体液总抗氧化能力(TAC)比色法(DPPH)定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10476.1 | 细胞总抗氧化能力(TAC)比色法(FRAP)定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10476.2 | 组织总抗氧化能力(TAC)比色法(FRAP)定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10476.3 | 食物总抗氧化能力(TAC)比色法(FRAP)定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10476.4 | 体液总抗氧化能力(TAC)比色法(FRAP)定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10477.1 | 细胞总抗氧化能力(TAC)荧光法(ORAC)定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10477.2 | 组织总抗氧化能力(TAC)荧光法(ORAC)定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10477.3 | 食物总抗氧化能力(TAC)荧光法(ORAC)定量检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS10477.4 | 体液总抗氧化能力(TAC)荧光法(ORAC)定量检测试剂盒 | 50次 |
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