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小肠组织刷状缘膜(brush border membrane)分离试剂盒产品说明书

发布时间:2026/9/4 9:21:13      阅读次数:2

 

小肠组织刷状缘膜(brush border membrane)分离试剂盒产品说明书

 

主要用途

小肠组织刷状缘膜(brush border membrane)分离试剂是一种旨在通过二价阴离子沉淀以及差速离心方法分离出完整而纯化的刷状缘膜组分的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种新鲜或冻存的动物和人体小肠组织刷状缘膜成分的分离产品即到即用,操作简易,性能稳定,无蛋白酶污染,萃取纯度和产量皆高。 

 

技术背景

小肠组织刷状缘膜(brush border membraneBBM)为小肠极化(polarized)上皮细胞顶面部(apical surface)膜结构,构成微绒毛(microvilli)。刷状缘膜蛋白介入各种溶质和离子的载体转运,例如钠偶联葡萄糖转运体SGLT1sodium coupled glucose transporter-1)和促果糖转运体GLUT5facilitated fructose transporter)等。采用二价阴离子沉淀以及差速离心方法分离小肠组织刷状缘膜,以识别和确定转运蛋白的表达,进行转运机制研究和相关酶活分析。  

 

产品内容

清理液(Reagent A    毫升

裂解液AReagent B   毫升

沉淀液(Reagent C    毫升

裂解液BReagent D   毫升

萃取液(Reagent E    毫升

保存液(Reagent F    毫升

产品说明书          1份

 

保存方式

保存清理液(Reagent A)、裂解液AReagent B裂解液BReagent D在-20℃冰箱里,其余的保存在4冰箱里,有效保证6

 

用户自备

50毫升锥形离心管:用于样品操作的容器

1.5毫升离心管:用于样品操作和保存的容器

100毫升烧杯:用于样品操作

台式离心机:用于样品操作

DOUNCE匀浆器:用于裂解组织细胞

磁力搅拌仪:用于样品操作

 

实验步骤

实验开始前,将试剂盒里的试剂置于冰槽里冻融备用。然后进行下列操作。

 

1. 剪开新鲜的动物小肠组织两端至少30厘米长

2. 加入xx毫升清理液(Reagent A到肠腔内清洗1

3. 平放在预冷的塑料盆里

4. 沿着系膜小肠对向部(antimesenteric border)剪开肠腔(注意:避免触碰腔内粘膜表面)

5. 使用细胞刮或载玻片刮离表层粘膜到50毫升锥形离心管

6. 加入xx毫升预冷的裂解液AReagent B

7. 上下倾倒混匀10

8. 转移到预冷的50毫升DOUNCE匀浆器

9. 置于冰槽里用匀浆棒匀化组织2040

10. 移出匀浆物到100毫升烧杯

11. 加入xx毫升预冷的沉淀液(Reagent C

12. 4温度下,在磁力搅拌仪上搅拌15分钟

13. 转移到250毫升锥形离心管

14. 放进4台式离心机离心15分钟,速度为1600g

15. 分别小心移出上清液到2新的预冷的50毫升锥形离心管 

16. 放进4台式离心机离心30分钟,速度为20000g

17. 小心抽去上清液

18. 分别加入xx毫升预冷的裂解液BReagent D,混匀

19. 转移到预冷的10毫升DOUNCE匀浆器

20. 置于冰槽里用匀浆棒匀化组织10

21. 移出匀浆物到50毫升锥形离心管

22. 加入xx毫升预冷的裂解液BReagent D

23. 加入xx毫升预冷的萃取液(Reagent E,混匀

24. 放进4台式离心机离心15分钟,速度为1600g

25. 小心移出上清液到新的预冷的50毫升锥形离心管

26. 放进4台式离心机离心30分钟,速度为20000g

27. 小心抽去上清液

28. 加入xx毫升保存液(Reagent F混匀颗粒群

29. 转移到到新的1.5毫升离心管

30. (选择步骤)进行纯度测定 (建议使用蔗糖酶-异麦芽糖酶Sucrase-isomaltase)活性比色法定量试剂盒G&VS50914

31. 放进-70冰箱里保存1周内使用)或置于冰槽里准备后续操作

 

注意事项

1. 本产品为10次操作

2. 建议使用足够的组织量

3. 样品操作均须在4或以下状态下进行

4. 操作时,须无菌操作,避免污染母液

5. 30厘米长的小肠组织可以获得36毫克膜蛋白

6. 建议使用蔗糖酶-异麦芽糖酶Sucrase-isomaltase)活性比色法定量试剂盒G&VS50914进行小肠组织刷状缘膜纯度测定:活性高于小肠组织的1520

7. 本公司提供系列细胞器分离技术产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定分离的刷状缘膜维持正常活性

3. 本产品经鉴定不含污染性蛋白酶

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORKRECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

订购信息

单组份订购信息

编号                                    名称                                                  规格

G&VS10511.1             小肠组织刷状缘膜分离试剂盒             10

G&VS10511.1A            清理液(Reagent A                         毫升

G&VS10511.1B            裂解液AReagent B                       毫升

G&VS10511.1C            沉淀液(Reagent C                         毫升

G&VS10511.1D            裂解BReagent D                      毫升

G&VS10511.1E            萃取液(Reagent E                         毫升

G&VS10511.1F             保存液(Reagent F                         毫升

 

试剂盒订购信息 

产品编号

名称

规格

G&VS10511.1

小肠组织刷状缘膜(brush border membrane)分离试剂盒

10

G&VS10511.2

肾组织刷状缘膜(brush border membrane)分离试剂盒

10

G&VS10512

肥大细胞颗粒(granules)分离试剂盒

10

G&VS10513

胰腺细胞酶原颗粒(zymogen granules)分离试剂盒

10

G&VS10514

神经黑色素颗粒(neuromelanin granules)分离试剂盒

10

G&VS10515

胰腺细胞致密核心分泌囊泡(dense-core secretoryvesicles)分离试剂盒

10

G&VS10516

GLUT4贮存囊泡GLUT4 storage vesicle,GSV分离试剂盒

10

G&VS10517

披网格蛋白囊泡clathrin-coated vesicle分离试剂盒

10

G&VS10518

外分泌囊泡(exosome)分离试剂盒

10

G&VS10519

黑色素体(melanosome)分离试剂盒

10

G&VS10520

中心体(centrosome)分离试剂盒

10

G&VS10521

乙醛酸循环体(glyoxysome)分离试剂盒

10

G&VS10522

淀粉质体(amyloplast)分离试剂盒

10

G&VS10523

脂滴(lipid droplet)分离试剂盒

10

G&VS10524

淀粉样蛋白斑(amyloid plaque)分离试剂盒

10

G&VS10525

神经髓鞘(myelin)分离试剂盒

10

G&VS10525

中间纤维(intermediate filaments)分离试剂盒

10

 

 


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