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神经突触囊泡(synaptic vesicle)分离试剂盒产品说明书

发布时间:2026/9/4 9:25:47      阅读次数:4

 

神经突触囊泡(synaptic vesicle)分离试剂盒产品说明书

 

主要用途

神经突触囊泡(synaptic vesicle)分离试剂是一种旨在通过差速和等密度离心技术从动物组织中分离出突触囊泡组分的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种动物人体组织的突触囊泡的制备。其制备物产量高,可以被用于神经传导机制、传导介质等研究。产品不含污染性蛋白酶,即到即用,性能稳定,分离产量和纯度俱佳。

 

技术背景

神经元间交互传递通过其突触结构联系进行,即突触前和突触后结构域,其间由一缝隙隔开。突触前终端小袋具有存储和分泌神经传导介质和突触传导的量子特性,通过众多高度规则的突触囊泡)synaptic vesicles实现。突触囊泡为球形状,40纳米大小。每隔神经元细胞含有106突触囊泡,整个人体含有1017突触囊泡,是脊椎动物中最为丰富的膜性封闭的细胞器。脑组织中分离突触囊泡的技术方法基本上采用:第一,通过机械或化学方法破裂组织细胞;第二,通过低速差速离心去除残渣碎屑和巨大细胞器;第三,通过高速差速离心获得膜性结构;第四,通过等密度离心获得突触囊泡

 

产品内容

清理液Reagent A    毫升

平衡液(Reagent B    毫升

活性Reagent C   

萃取液(Reagent D  毫升

分离液(Reagent E    毫升

产品说明书        1

 

保存方式

保存活性Reagent C在-20冰箱里,其余的保存在4冰箱里;萃取液(Reagent D和分离液(Reagent E,注意避免污染母液;有效保证6

 

用户自备

15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器

1.5毫升离心管:用于样品操作和保存的容器

超速离心管:用于样品操作的容器

4微型台式离心机:用于样品操作

4超速离心机:用于样品操作

20毫升DOUNCE匀浆器:用于裂解组织

 

实验步骤

1. 动物麻醉后处死

2. 手术取出动物组织,合并2个脑组织(总共34克组织重量  

3. (选择步骤)放进预冷的15毫升锥形离心管

4. (选择步骤)加入xx毫升清理液(Reagent A清洗1

5. 移入液氮冻存管

6. 即刻放入液氮罐过夜

7. 次日从液氮罐里取出,即刻(最快速度)碾碎组织成粉末(注意:切莫使组织冻融

8. 放进15毫升锥形离心管

9. 加入xx毫升预冷的平衡液(Reagent B

10. 加入xx升预冷的活性液(Reagent C

11. 涡旋震荡5秒,充分混匀

12. 即刻放入预冷的20毫升DOUNCE匀浆器

13. 在冰槽里用研磨棒匀化组织(约40下)

14. 将所有组织匀浆物移入10毫升超速离心管

15. 放进4超速离心机离心30分钟,速度为20250g

16. 小心移出上清液到新的预冷的15毫升锥形离心管,避免触碰沉淀

17. 加入适量的预冷的平衡液(Reagent B到总量为10毫升,混匀

18. 分别加入xx毫升萃取液(Reagent D210毫升超速离心管

19. 分别小心加上xx毫升上述操作步骤17的上清液在萃取液(Reagent D上面(注意:避免振动)

20. 放进4超速离心机离心4小时,速度为225000g

21. 小心抽去上清液保留沉淀颗粒

22. 分别加入xx毫升预冷的平衡液(Reagent B,混匀沉淀颗粒(注意:颗粒较为粘稠)

23. 分别加入xx毫升分离液(Reagent E210毫升超速离心管

24. 分别小心加上操作步骤22步混匀的样品在分离液(Reagent E上面(注意:避免振动)

25. 放进4超速离心机离心3小时,速度为274000g

26. 小心取出离心管(注意:可见白色漂浮物)

27. 分别小心抽去2毫升上层液体

28. 分别小心移取(收集)8毫升上层液相到50毫升超速离心管(共16毫升)

29. 分别加入xx毫升平衡液(Reagent B,混匀

30. 放进4超速离心机离心3小时,速度为225000g

31. 小心抽去上清液保留沉淀颗粒

32. 分别加入xx毫升预冷的平衡液(Reagent B,混匀沉淀颗粒(注意:颗粒较为粘稠)

33. 合并转移到1.5毫升离心管

34. 放进4微型台式离心机离心4分钟,速度为16000g

35. 小心移取上清液到新的1.5毫升离心管

36. 移取10微升进行蛋白质定量测定(注意:建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-G&VS30030.1

37. 即刻放进-70冰箱里保存

  

注意事项

1. 本产品为10次(34组织/)操作

2. 所有操作均须在4或以下状态进行

3. 萃取液(Reagent D分离液(Reagent E,注意避免污染母液

4. 建议使用足够的样品量

5. 由于突触囊泡具有粘附在玻璃和塑料容器的特点,建议使用硅化处理的离心管等容器

6. 通常1克动物组织的突触囊泡组分含量为100300微克蛋白

7. 如果需要获得95%以上的高纯度的突触囊泡,建议使用神经突触囊泡(synaptic vesicle)高纯试剂盒G&VS10644

8. 纯化的样品避免反复冻融  

9. 用户可以使用突触囊泡标记蛋白突触素(synaptophysinSY38)进行western blot验证

10. 本公司提供系列神经突触分析试剂产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定分离组分维持正常活性

3. 本产品经鉴定不含污染性蛋白酶和核酶

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORKRECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

订购信息

单组分订购信息

编号             名称                                                             规格

G&VS10497          神经突触囊泡(synaptic vesicle)分离试剂盒           20

G&VS10497A          清理液(Reagent A                                                毫升

G&VS10497B          平衡液(Reagent B                                                毫升

G&VS10497C          活性液(Reagent C                                                毫升

G&VS10497D          萃取液(Reagent D                                                毫升

G&VS10497E          分离液(Reagent E                                               

G&VS30030.1           Bradford蛋白质浓度定量试剂盒          100

试剂盒订购信息

产品编号

名称

规格

G&VS10482.1

神经突触体(synaptosome)粗提分离试剂盒

10

G&VS10482.2

神经突触体(synaptosome)活性分离试剂盒

10

G&VS10482.3

神经突触体(synaptosome)高纯分离试剂盒

10

G&VS10496

神经突触体(synaptosome)冻存试剂盒

50

G&VS10497

神经突触囊泡(synaptic vesicle)分离试剂盒

10

G&VS10644

神经突触囊泡(synaptic vesicle)高纯试剂盒

10

G&VS10498

神经突触体摄取/释放荧光检测试剂盒

20

 

 


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