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干细胞软骨细胞分化潜力比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间:2026/9/4 11:03:19      阅读次数:4

 

干细胞软骨细胞分化潜力比色法定量检测试剂盒产品说明书

 

主要用途

干细胞软骨细胞分化潜力比色法定量检测试剂是一种旨在通过使用阳离子染料阿尔新蓝,使软骨组织上蛋白多糖聚糖染色,呈现深蓝色,在分光光度仪上进行比色测定,分析软骨细胞分化和软骨组织形成程度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种人体和动物干细胞的软骨细胞分化程度分析。产品严格无菌,即到即用,性能稳定,着色清晰。

 

技术背景

间质干细胞(mesenchymal stem cell)分化产生脂肪细胞(adipocyte)、成骨细胞(osteoblast)、肌细胞(myocyte和软骨细胞(chondrocyte)。软骨细胞及其细胞外基质(extracellular matrix)构成软骨组织(cartilage tissue),其含有硫酸软骨素(chondroitin sulfate)和硫酸角质素(karatan sulfate)等为主要成分的蛋白多糖(proteoglycan)聚糖(aggrecan),成为软骨生成(chondrogenesis)的标记(indicator)。阿尔新蓝(alcian blue)是一种阳离子含铜染料,使酸性粘多糖(mucopolysaccharide类蛋白聚糖染色,呈现深蓝色。在分光光度或酶标仪上(490nm波长)进行测定,来定量分析软骨细胞分化和软骨组织形成的程度。

 

产品内容

清理液(Reagent A毫升

固着液(Reagent B毫升

净化液(Reagent C   毫升

染色液(Reagent D   毫升

溶解液Reagent E   毫升

产品说明书      1

 

保存方式

保存染色液(Reagent D)在4℃冰箱里,其余的保存在室温下;确保瓶盖密闭。染色液(Reagent D),避免光照有效保证6

 

用户自备

显微镜:用于观察软骨细胞染色情况

平式摇荡仪:用于染色萃取的混匀

比色皿或多孔板:用于比色分析的容器

分光光度仪或酶标仪:用于定量检测软骨细胞

 

实验步骤

1. 小心抽掉多孔细胞培养板里的培养液

2. 轻轻加入适量的清理液(Reagent A到每个培养孔里(见下表)

多孔培养板

容量

96

xx毫升

48

xx 毫升

24

xx 毫升

12

xx 毫升

6

xx 毫升

 

3. 小心抽去清理液

4. 小心加入适量的-20预冷的固着液(Reagent B到每个培养孔里(见实验步骤2表)

5. -20冰箱里孵育60分钟

6. 小心抽去固着液

7. 小心加入适量的净化液(Reagent C到每个培养孔里(见实验步骤2表)

8. 小心抽去净化液

9. 小心加入适量的染色液(Reagent D到每个培养孔里(见下表)

多孔培养板

容量

96

xx 微升

48

xx 微升

24

xx 微升

12

xx 毫升

6

xx 毫升

 

10. 在室温下静置15分钟

11. 小心抽去染色液

12. 小心加入适量的净化液(Reagent C到每个培养孔里(见实验步骤2表)

13. 小心抽去净化液

14. 重复实验步骤1213二次,或净化液不再显示

15. (选择步骤)置于一般光学显微镜下观察染色情况:软骨细胞呈现深蓝

16. 小心加入适量的溶解液(Reagent E(见下表)

 

多孔培养板

容量

96

xx 微升

48

xx 微升

24

xx 微升

12

xx微升

6

xx 毫升

17. 轻轻摇动培养板,直到溶解液Reagent E均匀分布

18. 置于平式摇荡仪,在室温下,孵育30分钟,速度为50RPM

19. (选择步骤)移入到比色皿

20. 即刻放进分光光度仪或酶标仪测读,波长为490 nm

21. 构建软骨细胞定量曲线:横座标(x轴)为细胞浓度(细胞量);纵坐标(y轴)为样品读数(吸光单位OD值)

注意事项

1. 本产品为20次(24孔板)、50次(48孔板)、100次(96孔板)操作

2. 操作时须戴手套

3. 试剂瓶务必密封保存

4. 染色时,避免光照

5. 细胞染色前后的清洗过程中,小心操作,以免将细胞冲洗掉,而影响定量分析

6. 本公司提供系列干细胞分化检测试剂产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定着色清晰

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORKRECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

订购信息

单组分订购信息

编号            名称                         规格

G&VS10491    干细胞软骨细胞分化潜力比色法定量检测试剂盒   20/100

G&VS10491A   清理液(Reagent A                   毫升

G&VS10491B   固着液(Reagent B                    毫升

G&VS10491C   净化液(Reagent C                    毫升

G&VS10491D   染色液(Reagent D                    毫升

G&VS10491E    溶解液Reagent E                    毫升

 

试剂盒订购信息

产品编号

名称

规格

G&VS10105

干细胞成脂分化潜力定性染色试剂盒

20/100

G&VS10106

干细胞成脂分化潜力比色法定量检测试剂盒

20/100

G&VS10490

干细胞成分化潜力比色法定量检测试剂盒

20/100

G&VS10491

干细胞软骨细胞分化潜力比色法定量检测试剂盒

20/100

 

 


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