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发布时间:2026/9/4 11:07:26 阅读次数:2
革兰氏阴性细菌外膜囊泡荧光(FM4-64)定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
革兰氏阴性细菌外膜囊泡荧光(FM4-64)定量检测试剂是一种旨在通过亲脂性荧光染色剂FM4-64,在膜结构中产生荧光,来定量检测细菌外膜囊泡含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适宜于纯化细菌外膜囊泡的定量检测。产品严格无菌,即到即用,操作简易,活体检测,性能稳定。
技术背景
外膜囊泡(outer membrane vesicle;OMV)为含有周质内容物(包括外膜蛋白、DNA、RNA、脂多糖、脂质、周质蛋白、黏附素、免疫调节化合物等)的球形电子致密芽状体(spherical bud),细胞外间隔体,双层磷脂,20至200纳米大小,来自于革兰氏阴性细菌周边突起物的释放形成或胞外分泌产物,使之与环境或宿主细胞进行反应,并调解各种功能,包括促进病理形成,调节细菌互动,转运各种信号分子(例如DNA、RNA、蛋白质、内毒素、毒力因子等),保护细菌生存、结合和侵入,引起毒性,产生抗生素抗性等。外膜囊泡的产量取决于细菌生长周期、营养条件、温度、氧化应激状态等。病原菌的外膜囊泡10倍于非病原菌体。外膜囊泡具有疫苗开发中免疫调节潜力。FM4-64为亲脂性染料,可以整合进膜结构的脂质环境结构中,使之产生红色荧光(激发波长515nm。散发波长660nm)。据此测定细菌外膜囊泡的相对含量。
产品内容
缓冲液(Reagent A) 毫升
补充液(Reagent B) 毫升
染色液(Reagent C) 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里,染色液(Reagent C),严格避免光照;有效保证6月
用户自备
黑色96孔板:用于样品操作的容器
培养箱:用于染色孵育
荧光酶标仪:用于测定外膜囊泡荧光强度
实验步骤
实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂放进冰槽里融化,避免光照;同时从-80℃冰箱里取出待测的线粒体,放进冰槽里融化。然后进行下列操作。
1. 准备1个黑色96孔板,标记好阴性对照孔、阳性对照孔和待测样品孔
2. 分别加入xx微升缓冲液(Reagent A)
3. 移取50微升纯化外膜囊泡悬液(109细菌/毫升获得的OMV或总量为200微克细菌总蛋白获得的OMV)到黑色96孔板的待测样品孔里(注意:用户需要调整好细菌量或细菌蛋白量)
4. 加入xx微升补充液(Reagent B)到黑色96孔板的阴性对照孔里
5. 加入50微升细菌混匀液(109细菌/毫升)到黑色96孔板的阳性对照孔里(注意:仅用于阳性效果,)
6. 分别加入xx微升染色液(Reagent C)到上述所有孔里
7. 放进37℃培养箱里孵育15分钟,避免光照
8. 直接放进荧光酶标仪:激发波长515nm,散发波长640nm――
样品RFU-阴性对照RFU=实际外膜囊泡(OMV) RFU:增高,表明外膜囊泡(OMV)含量高
注意事项
1. 本产品为20次操作
2. 操作时,须戴手套
3. 孵育时,须避免光照
4. 系统检测中,阳性对照只需一次
5. 如果样品OMV含量过高或过低,可以调整样品浓度
6. 建议染色完成后,即刻进行荧光分析
7. 含量表述:RFU/毫克细菌蛋白、RFU/毫升细菌数等
8. 本公司提供系列细菌外膜囊泡检测试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定荧光清晰
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS10547 革兰氏阴性细菌外膜囊泡荧光(FM4-64)定量检测试剂盒 20次
G&VS10547A 缓冲液(Reagent A) 毫升
G&VS10547B 补充液(Reagent B) 毫升
G&VS10547C 染色液(Reagent C) 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS30022.5 | 革兰氏阴性细菌外膜囊泡制备试剂盒 | 20次 |
| G&VS30022.6 | 革兰氏阴性细菌外膜囊泡高纯制备试剂盒 | 20次 |
| G&VS10547 | 革兰氏阴性细菌外膜囊泡荧光(FM4-64)定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10548 | 革兰氏阴性细菌外膜囊泡比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10549 | 革兰氏阴性细菌外膜囊泡光度法(PA-TBA)定量检测试剂盒 | 20次 |
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