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革兰氏阴性细菌外膜囊泡荧光(FM4-64)定量检测试剂盒产品说明书

发布时间:2026/9/4 11:07:26      阅读次数:2

 

革兰氏阴性细菌外膜囊泡荧光(FM4-64)定量检测试剂盒产品说明书

 

主要用途

革兰氏阴性细菌外膜囊泡荧光(FM4-64)定量检测试剂是一种旨在通过亲脂性荧光染色剂FM4-64,在膜结构中产生荧光,来定量检测细菌外膜囊泡含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适宜于纯化细菌外膜囊泡的定量检测。产品严格无菌,即到即用,操作简易,活体检测,性能稳定。

 

技术背景

外膜囊泡(outer membrane vesicleOMV)为含有周质内容物(包括外膜蛋白、DNARNA、脂多糖、脂质、周质蛋白、黏附素、免疫调节化合物等)的球形电子致密芽状体(spherical bud),细胞外间隔体,双层磷脂,20200纳米大小,来自于革兰氏阴性细菌周边突起物的释放形成或胞外分泌产物,使之与环境或宿主细胞进行反应,并调解各种功能,包括促进病理形成,调节细菌互动,转运各种信号分子(例如DNARNA、蛋白质、内毒素、毒力因子等),保护细菌生存、结合和侵入,引起毒性,产生抗生素抗性等。外膜囊泡的产量取决于细菌生长周期、营养条件、温度、氧化应激状态等。病原菌的外膜囊泡10倍于非病原菌体。外膜囊泡具有疫苗开发中免疫调节潜力。FM4-64为亲脂性染料,可以整合进膜结构的脂质环境结构中,使之产生红色荧光(激发波长515nm。散发波长660nm。据此测定细菌外膜囊泡相对含量

 

产品内容

缓冲液(Reagent A       毫升

补充液(Reagent B       毫升

染色液(Reagent C     微升

产品说明书         1

 

保存方式

保存在-20℃冰箱里,染色液(Reagent C,严格避免光照;有效保证6

 

用户自备

黑色96孔板:用于样品操作的容器

培养箱:用于染色孵育

荧光酶标仪:用于测定外膜囊泡荧光强度

 

实验步骤

实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂放进冰槽里融化,避免光照;同时从-80冰箱里取出待测的线粒体,放进冰槽里融化。然后进行下列操作。

1. 准备1黑色96孔板,标记好阴性对照孔、阳性对照孔和待测样品孔

2. 分别加入xx微升缓冲液(Reagent A

3. 移取50微升纯化外膜囊泡悬液(109细菌/毫升获得的OMV总量为200微克细菌总蛋白获得的OMV)到黑色96孔板的待测样品孔里(注意:用户需要调整好细菌量或细菌蛋白量)

4. 加入xx微升补充液(Reagent B黑色96孔板的阴性对照孔里

5. 加入50微升细菌混匀液(109细菌/毫升)黑色96孔板的阳性对照孔里(注意:仅用于阳性效果,

6. 分别加入xx微升染色液(Reagent C到上述所有孔里

7. 放进37℃培养箱里孵育15分钟,避免光照

8. 直接放进荧光酶标仪:激发波长515nm,散发波长640nm――

样品RFU阴性对照RFU=实际外膜囊泡(OMVRFU:增高,表明外膜囊泡OMV)含量高

 

注意事项

1. 本产品为20次操作

2. 操作时,须戴手套

3. 孵育时,须避免光照

4. 系统检测中,阳性对照只需一次

5. 如果样品OMV含量过高或过低,可以调整样品浓度

6. 建议染色完成后,即刻进行荧光分析

7. 含量表述:RFU/毫克细菌蛋白、RFU/毫升细菌数等

8. 本公司提供系列细菌外膜囊泡检测试剂产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定荧光清晰

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORKRECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

订购信息

单组分订购信息

编号             名称                            规格

G&VS10547     革兰氏阴性细菌外膜囊泡荧光(FM4-64)定量检测试剂盒    20

G&VS10547A    缓冲液(Reagent A                         毫升

G&VS10547B    补充液(Reagent B                          毫升

G&VS10547C   染色液(Reagent C                          毫升

 

试剂盒订购信息

产品编号

名称

规格

G&VS30022.5

革兰氏阴性细菌外膜囊泡制备试剂盒

20

G&VS30022.6

革兰氏阴性细菌外膜囊泡高纯制备试剂盒

20

G&VS10547

革兰氏阴性细菌外膜囊泡荧光(FM4-64)定量检测试剂盒

20

G&VS10548

革兰氏阴性细菌外膜囊泡比色法定量检测试剂盒

20

G&VS10549

革兰氏阴性细菌外膜囊泡光度法(PA-TBA)定量检测试剂盒

20

 

 


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