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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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人体精子线粒体粗提分离试剂盒产品说明书

发布时间：2026/9/7 13:43:39 阅读次数：16

人体精子线粒体粗提分离试剂盒产品说明书

主要用途

人体精子线粒体粗提分离试剂是一种旨在从人体或动物禁止细胞中分离出完整而纯化的线粒体细胞器的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种人体或动物精子细胞的线粒体的制备。其制备物产量高，可以被用于细胞凋亡、信号传递、能量代谢、蛋白组学和病理生理学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能稳定。

技术背景

在哺乳动物中，精子生成过程会产生线粒体形态和结构的变化。通常人体精子细胞含有50至75个线粒体。线粒体细胞器的分离是现代细胞生物学研究的最常用的手段之一。从任何组织或细胞分离线粒体的技术方法基本上采用：第一，通过机械或化学方法破裂细胞；第二，通过低速差速离心去除残渣碎屑和巨大细胞器；第三，通过高速差速离心获得线粒体；甚至，第四，可以通过等密度离心获得纯度更高的线粒体。

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

平衡液（Reagent B）毫升

处理液（Reagent C）毫升

裂解液（Reagent D）毫升

保存液（Reagent E）毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存处理液（Reagent C）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月

用户自备

15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

1.5毫升离心管：用于样品操作的容器

4℃（微型）台式离心机：用于样品操作

4℃超速离心机：用于分离细胞器成分

DOUNCE匀浆器：用于裂解细胞

实验步骤

1．准备好1毫升精子细胞（10¹⁰）

2．加入xx毫升预冷的清理液（Reagent A），混匀

3．放进微型台式离心机离心10分钟，速度为1250g

4．小心抽去上清液

5．重复实验步骤2至4一次

6．加入xx毫升预冷的平衡液（Reagent B），混匀细胞颗粒群

7．放进微型台式离心机离心10分钟，速度为1250g

8．小心抽去上清液

9．重复实验步骤6至8一次

10．加入xx毫升预冷的平衡液（Reagent B），混匀细胞颗粒群

11．加入xx毫升处理液（Reagent C），混匀

12．放进4℃冰箱里孵育20分钟，期间每隔5分钟上下倾倒10次

13．放进台式离心机离心10分钟，速度为10000g

14．小心抽去上清液

15．加入xx毫升预冷的裂解液（Reagent D），混匀细胞颗粒群

16．放进台式离心机离心10分钟，速度为10000g

17．小心抽去上清液

18．加入xx毫升预冷的裂解液（Reagent D），混匀细胞颗粒群

19．即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器

20．在冰槽里用匀浆棒匀化细胞（约40下）

21．将所有细胞匀浆物移入15毫升锥形离心管

22．放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为1500g

23．小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管——此步骤去除细胞核和未溶解的细胞

24．放进4℃超速离心机离心10分钟，速度为20000g

25．小心抽去上清液，保留沉淀颗粒——此步骤获得线粒体沉淀物

26．（选择步骤）加入xx毫升预冷的保存液（Reagent E）

27．（选择步骤）放进4℃超速离心机再次离心10分钟，速度为20000g

28．（选择步骤）小心抽去上清液

29．加入xx毫升保存液（Reagent E），充分混匀

30．即刻移入1.5毫升离心管，放进－70℃冰箱里

注意事项

1．本产品为10次（10¹⁰细胞/次）操作

2．所有操作均须严格在4℃或以下状态进行

3．操作时，须戴手套

4．操作时，须无菌操作，避免污染母液，尤其是平衡液（Reagent B）、裂解液（Reagent D）和保存液（Reagent E）

5．建议使用足够的样品量

6．通常匀化次数为40下或细胞颗粒群消失为止

7．通常10¹⁰细胞的线粒体含量为50微克以上线粒体蛋白

8．如果需要计量线粒体，稀释后数分钟内完成，否则线粒体将分解

9．本产品所获得的线粒体纯度和产量最为理想。通过调整10000g离心速度到3000至8000g，可以提高粗提的线粒体纯化程度，但线粒体产量相应减少

10．如果需要获得99％以上纯度的线粒体，使用人体精子高质纯化线粒体分离试剂盒－G&VS10571.3

11．线粒体正常活性测定方法是： CITRATE SYNTHASE活性、氧化磷酸化、细胞色素吸收峰谱等

12．线粒体内外膜完整测定方法是：CYTOCHROME C OXIDASE活性和荧光JC染色

13．本公司提供线粒体套餐：ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、线粒体溶解等

14．本公司提供系列线粒体分析试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定分离的线粒体内外膜完整

3．本产品经鉴定分离的线粒体维持正常活性

4．本产品经鉴定不含污染性蛋白酶和核酶

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS10571.1 人体精子线粒体粗提分离试剂盒 10次

G&VS10571.1A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS10571.1B 平衡液（Reagent B）毫升

G&VS10571.1C 处理液（Reagent C）毫升

G&VS10571.1D 裂解液（Reagent D）毫升

G&VS10571.1E 保存液（Reagent E）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS10571.1	人体精子线粒体粗提分离试剂盒	10次
G&VS10571.2	人体精子活性线粒体分离试剂盒	10次
G&VS10571.3	人体精子高质纯化线粒体分离试剂盒	10次
G&VS10018	纯化线粒体溶解试剂盒	20次
G&VS10059	纯化线粒体蛋白质浓度定量测定试剂盒	20次
G&VS30034.1	纯化线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒	20次
G&VS12198.1	纯化线粒体冻存液（酶学和膜结构保护）	50毫升
G&VS12198.2	纯化线粒体冻存液（生物能量学保护）	50毫升