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发布时间：2026/9/7 13:44:26 阅读次数：16
活体细胞溶酶体形态/活性绿色荧光染色试剂盒产品说明书
主要用途
活体细胞溶酶体形态/活性绿色荧光染色试剂是一种旨在通过绿色荧光染料特异性地聚集在溶酶体，并呈现绿色，用于分析和观察溶酶体形态以及双重染色或重叠染色定位的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种溶酶体（动物、人体、昆虫等）的形态观察、活性探测和定位标记。产品严格无菌，即到即用，活体检测，分辨率高，操作简捷，性能稳定，滞留持久。
技术背景
溶酶体（lysosome）是一种普遍存在于真核细胞中的细胞器，含有酸性水解酶，例如酯酶、淀粉酶、蛋白酶、核酶等，分解各种细胞残渣和废弃物质，包括过多的或破损的其它细胞器、食物颗粒、吞噬的细菌和病毒等。其大小为0.5至1.5微米，球圆形，溶酶体内pH为5.0左右。溶酶体功能异常会引起溶酶体贮积症（1ysosomal storage disorders；LSDs），例如家族性白痴病（Tay-sachs disease）和庞贝氏症 （Pompe’s disease）。溶酶体荧光探针LysoTracker Green，是一种向酸性（acidotropic）探针，含有荧光基团在弱碱上，高度选择性地染色酸性细胞器溶酶体。探针自由通过细胞膜，选择性地聚集在溶酶体内。它可以对活细胞进行直接染色，在511nm波长可以清晰看到被染成绿色的溶酶体。
产品内容
清理液（Reagent A） 毫升
固着液（Reagent B） 毫升
染色液（Reagent C） 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存染色液（Reagent C）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月
用户自备
完全细胞培养液：用于染色后培养液更换
24孔细胞培养板：用于贴壁细胞染色的容器
1.5毫升离心管：用于细胞染色的容器
微型台式离心机：用于沉淀细胞
培养箱：用于染色孵育
（共聚焦）荧光显微镜：用于细胞荧光分析
实验步骤
一、 贴壁细胞标准染色
1． 准备1个细胞培养24孔板的待测细胞，细胞铺满率达70％
（注意：可以使用载玻片，载玻片培养皿，35mm培养皿，和其它培养孔板，见注意事项12）
2． 小心抽去细胞培养液
3． 小心沿着孔壁加入500微升37℃预热的用户自备的完全细胞培养液到细胞培养孔，覆盖培养孔表面
4． 小心加入xx微升染色液（Reagent C），小心摇动培养板，使其混匀（注意：参见注意事项9和10）
5． 放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟
6． 小心抽去含有染色液（Reagent C）的细胞培养液
7． 小心沿着孔壁加入1毫升37℃预热的用户自备的完全细胞培养液到细胞培养孔
8． 小心抽去完全细胞培养液
9． 小心沿着孔壁加入1毫升37℃预热的用户自备的完全细胞培养液到细胞培养孔
10． 即刻在倒置荧光显微镜下进行观察：激发波长504nm，散发波长511nm（溶酶体呈现绿色）
二、 贴壁细胞快速染色
1． 准备1个细胞培养24孔板的待测细胞，细胞铺满率达70％
（注意：可以使用载玻片，载玻片培养皿，35mm培养皿，和其它培养孔板，见注意事项12）
2． 直接加入xx微升（1：500容量比）染色液（Reagent C）到1毫升培养液里，小心摇动培养板，使其混匀（注意：参见注意事项9和10）
3． 放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟
4． 小心抽去含有染色液（Reagent C）的细胞培养液
5． 小心沿着孔壁加入1毫升37℃预热的用户自备的完全细胞培养液到细胞培养孔
6． 即刻在倒置荧光显微镜下进行观察：激发波长504nm，散发波长511nm（溶酶体呈现绿色）
三、 悬浮细胞或脱离细胞染色
1． 将悬浮细胞或脱离细胞（1 X 106细胞）移入到1.5毫升离心管
2． 放进微型台式离心机离心1分钟，速度为300g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）
3． 小心抽去上清液
4． 加入500微升37℃预热的用户自备的完全细胞培养液
5． 加入xx微升染色液（Reagent C），充分混匀（注意：参见注意事项9和10）
6． 放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟
7． 放进微型台式离心机离心1分钟，速度为300g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）
8． 加入500微升37℃预热的用户自备的完全细胞培养液，混匀
9． 放进微型台式离心机离心1分钟，速度为300g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）
10． 小心抽去完全细胞培养液
11． 移出5微升到载玻片上，放上盖玻片
12． （选择步骤）如果需要双重染色，移出3.5微升染色细胞到载玻片上
13． （选择步骤）加入1微升用户需测的第二染料，放上盖玻片
14． （选择步骤）放进37℃细胞培养箱里孵育10分钟
15． 即刻在（共聚焦）荧光显微镜下进行观察：激发波长504nm，散发波长511nm（溶酶体呈现绿色）
四、细胞双重染色
1． 准备1个载玻片培养皿的待测细胞
2． 小心抽去细胞培养液
3． 小心加入1毫升37℃预热的用户自备的完全细胞培养液
4． 小心加入xx微升 染色液（Reagent C），小心摇动培养皿，使其混匀（注意：参见注意事项9和10）
5． 放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟
6． 小心抽去含有染色液（Reagent C）的细胞培养液
7． 小心加入xx微升37℃预热的清理液（Reagent A）
8． 小心抽去清理液（Reagent A）
（注意：由此步骤开始，用户可以进行其它膜通透性荧光染料的标记;如果是膜不通透性荧光染料，继续下列操作）
9． 小心加入xx微升37℃预热的清理液（Reagent A）
10． 小心加入xx微升固着液（Reagent B），小心摇动培养皿，使其混匀
11． 放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟
12． 小心抽去含有固着液（Reagent B）的清理液（Reagent A）
13． 小心加入xx毫升37℃预热的清理液（Reagent A）
14． 小心抽去清理液（Reagent A）
（注意：由此步骤开始，用户可以进行抗体荧光染色或膜不通透性荧光染料的通透和标记）
15． 在荧光显微镜下进行观察：激发波长504nm，散发波长511nm（溶酶体呈现绿色）
五、 细胞固定染色
1．准备1个细胞培养24孔板的待测细胞，细胞铺满率达70％
（注意：可以使用载玻片，载玻片培养皿，35mm培养皿，和其它培养孔板，见注意事项12）
2． 小心抽去细胞培养液
3． 小心沿着孔壁加入500微升37℃预热的用户自备的完全细胞培养液到细胞培养孔，覆盖培养孔表面
4． 小心加入xx微升固着液（Reagent B），小心摇动培养板，使其混匀
5． 放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟
6． 小心抽去含有固着液（Reagent B）的细胞培养液
7． 小心加入xx微升清理液（Reagent A）
8． 小心抽去清理液（Reagent A）
9． 再加入xx微升清理液（Reagent A）
10． 小心加入xx微升染色液（Reagent C），小心摇动培养板，使其混匀（注意：参见注意事项10）
11． 放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟
12． 小心抽去含有染色液（Reagent C）的清理液（Reagent A）
13． 加入xx微升新鲜的清理液（Reagent A）
14． 小心抽去清理液（Reagent A）
15． 再加入xx微升清理液（Reagent A）
16． 即刻在倒置荧光显微镜下进行观察：激发波长504nm，散发波长511nm（溶酶体呈现绿色）
六、 切片染色
1． 准备1个待测的切片样品
2． 小心加上xx微升清理液（Reagent A），覆盖切片表面
3． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
4． 小心加上xx微升清理液（Reagent A），覆盖切片表面
5． 小心加入xx微升固着液（Reagent B）
6． 室温下孵育10分钟
7． 小心移去切片上的固着液（Reagent B）
8． 小心加上xx微升清理液（Reagent A），覆盖切片表面
9． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
10． 移取xx微升清理液（Reagent A）到新的1.5毫升离心管
11． 加入xx微升染色液（Reagent C），混匀（注意：参见注意事项10）
12． 小心加上上述染色液（Reagent C）到切片上，覆盖切片表面
13． 放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟
14． 小心移去切片上的染色液（Reagent C）
15． 小心加上xx微升新鲜的清理液（Reagent A）
16． 小心移去清理液（Reagent A）
17． 盖上盖玻片
18． 即刻在荧光显微镜下进行观察：激发波长504nm，散发波长511nm（溶酶体呈现绿色）
注意事项
1． 本产品为20次（1毫升体系）和40次（500微升体系）操作
2． 操作时，避免污染母液
3． 操作时，须戴手套
4． 染色前，所有试剂溶液（除染色液外）需37℃预热
5． 建议细胞染色完成后，即刻进行荧光检测分析
6． 孵育时，必须避免光照
7． 剩余的染色工作液可放进－20℃储存备用
8． 本产品适合活体染色和固定染色，染色剂不易洗掉，染色持久
9． 活细胞染色：1毫升体系可以使用1微升（1：1000容量比）染色液（Reagent C）
10． 根据不同细胞类型，调整染色液（Reagent C）的使用剂量（1：100至1：1000容量比），避免过度染色
11． 如果染色不明显，可以延长孵育时间至2小时
12． 本产品友好使用于双重染色或重叠染色
13． 本产品适合各种规格的培养细胞：载玻片，载玻片培养皿，35mm培养皿，和各种培养孔板，须相应调整处理液：
| 操作容器 | 建议操作体系 |
| 载玻片 | 100微升 |
| 载玻片培养皿 | 1毫升 |
| 35mm培养皿 | 1毫升 |
| 96孔培养板 | 100微升 |
| 48孔培养板 | 200微升 |
| 24孔培养板 | 500微升 |
| 12孔培养板 | 1毫升 |
| 6孔培养板 | 2毫升 |
| 25cm2细胞培养瓶 | 3毫升 |
13．本公司提供系列溶酶体分析试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定荧光清晰
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS10577.1 活体细胞溶酶体形态/活性绿色荧光染色试剂盒 100/200次
G&VS10577.1A 清理液（Reagent A） 毫升
G&VS10577.1B 固着液（Reagent B） 毫升
G&VS10577.1C 染色液（Reagent C） 微升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS10118.1 | 细胞/组织溶酶体粗提分离试剂盒 | 10次 |
| G&VS10118.2 | 细胞/组织活性溶酶体分离试剂盒 | 10次 |
| G&VS10118.3 | 细胞/组织高质纯化溶酶体分离试剂盒 | 10次 |
| G&VS10119 | 细胞过氧化酶体分离试剂盒 | 10次 |
| G&VS10121.1 | 细胞溶酶体形态染色试剂盒 | 20次 |
| G&VS10121.2 | 冰冻切片溶酶体形态染色试剂盒 | 20次 |
| G&VS10577.1 | 细胞溶酶体（lysosome）形态绿色荧光染色试剂盒 | 20次 |
| G&VS10577.2 | 冰冻切片溶酶体（lysosome）形态绿色荧光染色试剂盒 | 20次 |
| G&VS10323 | 纯化溶酶体功能中性红检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10324 | 分离溶酶体纯度双酶法（COX/AP）检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10386 | 分离溶酶体纯度标志酶组织蛋白酶D酶法检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10387 | 溶酶体膜通透性（LMP）吖啶橙荧光检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10388 | 溶酶体膜完整性（integrity）荧光检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10389 | 溶酶体膜完整性（integrity）组织蛋白酶D释放法检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10390 | 溶酶体膜完整性（integrity）酸性磷酸酶活性潜伏检测试剂盒 | 20次 |
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