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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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细胞脂类氧化荧光（BODIPY C11）测定试剂盒产品说明书

发布时间：2026/9/7 13:45:41 阅读次数：23

细胞脂类氧化荧光（BODIPY C11）测定试剂盒产品说明书

主要用途

细胞脂类氧化荧光（BODIPY C11）测定试剂是一种旨在通过亲脂性荧光染色剂氟硼荧C11，在细胞脂类氧化条件下，产生红色转化为绿色荧光，来定量检测细胞内脂类氧化的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定。

技术背景

超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2^-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH^-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO^-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO^-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO^-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞内核酸、蛋白以及脂质氧化，最终使细胞衰老或凋亡。含有两个或以上双键（double bond）的多聚不饱和脂肪酸（Polyunsaturated Fatty Acid；PUFA），在膜完整性、跨膜转运、信号传导、基因转录等具有重要作用。其对自由基以及其它活性氧化族（包括羟自由基或氢氧基、过氧化基、过氧化氢。氧自由基等）高度敏感，导致产生脂质过氧自由基LOO^＋（lipid peroxyl radical），使脂类氧化（lipid oxidation）。脂质氧化反应（lipid oxidation）是动物和植物细胞损伤的一种机制，也是评价细胞和组织氧化应急的标志。氟硼荧（boron dipyrromethene difluoride；BODIPY）衍生染料C11，是一种完全自由通过脂质双层的亲脂性染料，具有高度光和热稳定、对于PH和空气氧化不敏感。一旦脂质氧化，便产生红色荧光（激发波长485nm，散发波长595nm）转化为绿色荧光（激发波长485nm，散发波长520nm）。据此测定细胞内脂类氧化程度。

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

染色液（Reagent B）微升

稀释液（Reagent C）毫升

保存液（Reagent D）毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存染色液（Reagent B）在－20℃冰箱里，严格避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月

用户自备

胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（G&VS12024）：用于细胞脱离

完全细胞培养液（G&VS12052）：用于细胞操作所需的培养基

15毫升锥形离心管：用于细胞操作的容器

1.5毫升离心管：用于细胞染色的容器

血细胞计数仪：用于细胞计数

台式离心机：用于沉淀细胞

细胞流式仪：用于细胞荧光分析

（共聚焦）荧光显微镜或：用于观察荧光细胞

荧光分光光度仪或荧光酶标仪：用于细胞荧光定量分析

实验步骤

一、 间接法

实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（Reagent B）置入冰槽里融化，稀释液（Reagent C）放进37℃恒温水槽里预热。然后移出xx微升染色液（Reagent B）到新的1.5毫升离心管，加入xx微升稀释液（Reagent C），混匀后，标记为染色工作液，置入暗室里。然后进行下列操作。

1．准备1瓶25cm²细胞培养瓶的待测细胞

2．小心抽去细胞培养液

3．加入xx毫升 清理液（Reagent A）到细胞培养瓶，覆盖培养瓶表面

4．小心抽去清理液（Reagent A）

5．加入1毫升用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，铺满整个培养平面

6．置入37℃培养箱1分种

7．振动培养瓶，使细胞脱落

8．加入4毫升用户自备的完全细胞培养液

9．移入15毫升锥形离心管，充分混匀（注意：悬浮细胞直接从这一步骤开始）

10．移取10微升在血细胞计数仪上进行细胞计数

11．移出1 X 10⁶细胞到新的15毫升锥形离心管

12．放入台式离心机离心5分钟，速度为300g

13．小心抽去上清液

14．加入xx毫升含有染色液（Reagent B）和稀释液（Reagent C）的染色工作液，轻柔混匀

15．转移到新的1.5毫升离心管

16．放进37℃恒温水槽孵育30分钟，避免光照

17．放进微型台式离心机离心5分钟，速度为300g

18．小心抽去上清液

19．加入预冷的xx微升保存液（Reagent D），轻柔混匀细胞颗粒群

20．放进冰槽里

21．选择下列方式之一进行操作：

a) 即刻进行细胞流式仪分析：波长488nm氩离子激光，观察50000个细胞以上――

波峰右移，表明脂类氧化程度高

b) 或使用（共聚焦）荧光显微镜观察（定性检测）：

1）移取10微升上述细胞悬液到载波片上，盖上盖玻片

2）激发波长488nm，散发波长520nm――绿色荧光增强，表明脂类氧化程度高

或激发波长488nm，散发波长520nm――红色荧光减弱，表明脂类氧化程度高

c) 或使用荧光分光光度仪检测（定量检测）：

1）移取400微升上述细胞悬液到1毫升比色杯

2）加入600微升保存液（Reagent D）

3）上下倾倒混匀数次

4）放进荧光分光光度仪：激发波长488nm，散发波长520nm――RFU增高，表明脂类氧化程度高

或激发波长488nm，散发波长520nm/激发波长488nm，散发波长595nm——RFU比值增高，表明脂类氧化程度高

二、 直接法

1．准备1个细胞培养24孔板的待测细胞，细胞铺满率达70％

（注意：可以使用载玻片，载玻片培养皿，35mm培养皿，和其它培养孔板，见注意事项4）

2．小心抽去细胞培养液

3．小心沿着孔壁加入xx微升含有染色液（Reagent B）和稀释液（Reagent C）的染色工作液到1个细胞培养孔，覆盖培养孔表面

4．放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟

5．小心抽去含有染色工作液

6．小心沿着孔壁加入xx微升37℃预热的保存液（Reagent D）到细胞培养孔

7．选择下列方式之一进行操作：

（A）使用倒置荧光显微镜观察（定性检测）：

激发波长488nm，散发波长520nm――绿色荧光增强，表明脂类氧化程度高

或激发波长488nm，散发波长520nm――红色荧光减弱，表明脂类氧化程度高

（B）使用荧光酶标仪检测（定量检测）：

激发波长488nm，散发波长520nm――RFU增高，表明脂类氧化程度高

或激发波长488nm，散发波长520nm/激发波长488nm，散发波长595nm——RFU比值增高，表明脂类氧化程度高

注意事项

1．本产品为20次操作

2．操作时，须戴手套

3．孵育时，必须避免光照

4．本产品适合各种规格的培养细胞：载玻片，载玻片培养皿，35mm培养皿，和各种培养孔板，须相应调整操作用量：

操作容器	操作用量
载玻片	100微升
载玻片培养皿	1毫升
35mm培养皿	1毫升
96孔培养板	100微升
48孔培养板	200微升
24孔培养板	500微升
12孔培养板	1毫升
6孔培养板	2毫升
25cm²细胞培养瓶	3毫升

5．根据细胞类型，调整染色工作液使用剂量（1：200至1：1000容量比），避免过度染色

6．建议细胞染色完成后，即刻进行荧光分析

7．本公司提供阳性对照50微摩尔CumOOH，观察细胞脂类氧化绿色荧光增强现象

8．细胞脂类氧化参考图像（上图为氧化；下图为正常）

9．本公司提供系列脂类氧化分析试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定荧光清晰

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS10588.1 细胞脂类氧化荧光（BODIPY C11）测定试剂盒 20次

G&VS10588.1A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS10588.1B 染色液（Reagent B）毫升

G&VS10588.1C 稀释液（Reagent C）毫升

G&VS10588.1D 保存液（Reagent D）毫升

G&VS12024 胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液毫升

G&VS12041 甲萘醌溶液（1毫摩尔）毫升

G&VS12024 DMEM完全细胞培养液毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS10588.1	细胞脂类氧化荧光（BODIPY C11）测定试剂盒	20次
G&VS10588.2	活体组织脂类氧化荧光（BODIPY C11）测定试剂盒	8/20次
G&VS10588.3	冰冻切片脂类氧化荧光（BODIPY C11）测定试剂盒	50次
G&VS10588.4	真菌/酵母细胞脂类氧化荧光（BODIPY C11）测定试剂盒	20次
G&VS10588.5	植物脂类氧化荧光（BODIPY C11）测定试剂盒	20次
G&VS10588.6	藻类脂类氧化荧光（BODIPY C11）测定试剂盒	20次
G&VS10588.7	细菌脂类氧化荧光（BODIPY C11）测定试剂盒	20次
G&VS10588.8	精子脂类氧化荧光（BODIPY C11）测定试剂盒	20次