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细胞脂滴BODIPY荧光染色试剂盒产品说明书

发布时间:2026/9/7 13:46:16      阅读次数:28

 

细胞脂滴BODIPY荧光染色试剂盒产品说明书

 

主要用途

细胞脂滴BODIPY荧光染色试剂是一种旨在使用亲脂性荧光染料BODIPY染色技术,特异性地使细胞内脂滴显示绿色荧光,以分析细胞样品脂滴状况的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种人体和动物细胞样本。产品即到即用,操作简捷,性能稳定,荧光清晰。

 

技术背景

脂滴(lipid droplet)是细胞中由中性脂质(甘油三酯、胆固醇酯)和少量蛋白为核心,外包一层磷脂和胆固醇构成的带有蛋白的膜。可见于大多数培养细胞中。在脂肪细胞中,脂滴存储大量甘油三酯,作为能量之源,而在其它细胞中,用于胆固醇内平衡的维持。脂滴具有帮助膜合成和修复,固醇类激素合成,以及提供脂类代谢酶的底物等功能。BODIPY4,4-difluoro-1,3,5,7-tetramethyl-4-bora-3a,4a-diaza- s-indacene)是一种亲脂性荧光染料,具有较高的油-水相位分配系数(partition coefficient),而容易快速穿过细胞膜,通过弥散-阱(diffusion-trap)机制,聚集在细胞的脂滴体内,在激发波长493nm的激发下,显示强烈绿色荧光(散发波长503nm)。  

 

产品内容

清理液(Reagent A   毫升

固着液(Reagent B   毫升

染色液(Reagent C   微升

稀释液(Reagent D   毫升

产品说明书         1

 

保存方式

保存染色液(Reagent C)在-20冰箱里,密闭盖子,避免光照;其余的保存在4冰箱里;有效保证6

 

用户自备

1.5毫升离心管:用于反应液配制和样品操作的容器

微型台式离心机:用于悬浮细胞的操作

荧光显微镜:用于细胞染色后观察分析

 

实验步骤

实验开始前,将试剂盒里的染色液(Reagent C冻融,然后移出xx毫升稀释液(Reagent D1.5毫升离心管,加入xx微升染色液(Reagent C,混匀后,置入冰槽里,标记为染色工作液,避免光照。然后进行下列操作。

 

操作一:细胞固定染色

1. 准备好待测的细胞载玻片  

2. 小心加上xx微升清理液(Reagent A在载玻片上,铺满整个样品表面

3. 小心移去载玻片上的清理液(Reagent A

4. 小心加上xx微升固着液(Reagent B,铺满整个样品表面

5. 室温下,孵育15分钟

6. 小心移去载玻片上的固着液(Reagent B

7. 小心加上xx微升清理液(Reagent A),清洗样品表面

8. 小心移去载玻片上的清理液(Reagent A

9. 重复实验步骤78二次

10. 小心加上xx微升染色工作液,铺满整个载玻片样品表面

11. 室温下孵育15分钟,避免光照

12. 小心加上xx微升清理液(Reagent A),清洗样品表面

13. 小心移去载玻片上的清理液(Reagent A

14. 重复实验步骤1213二次

15. 放上盖玻片

16. 即刻在荧光显微镜下观察:激发波长493nm,散发波长503nm脂滴呈现绿色)

 

操作二:细胞活体染色

1. 准备好待测的细胞培养样品(96孔板或48孔板)

2. 小心抽去培养液

3. 小心加入100微升用户自备的新鲜的培养液

4. 加入xx微升染色液(Reagent C

5. 室温下孵育20分钟,避免光照

6. 小心抽去培养液

7. 小心加xx微升清理液(Reagent A

8. 小心抽去清理液(Reagent A

9. 重复实验步骤78二次

10. 小心加入200微升用户自备的新鲜的培养液

11. 放上盖玻片

12. 即刻在荧光显微镜下观察:激发波长493nm,散发波长503nm脂滴呈现绿色)

 

操作三:悬浮细胞或脱离细胞染色

1. 将悬浮细胞或脱离细胞(1 X 106细胞)移入到1.5毫升离心管

2. 放进微型台式离心机离心5分钟,速度为1000g

3. 小心抽去上清液

4. 加入xx微升清理液(Reagent A,混匀细胞颗粒群

5. 放进微型台式离心机离心5分钟,速度为1000g

6. 小心抽去上清液

7. 小心加xx微升固着液(Reagent B,混匀细胞颗粒群

8. 室温下,孵育15分钟

9. 放进微型台式离心机离心5分钟,速度为1000g

10. 小心抽去上清液

11. 加入xx微升清理液(Reagent A,混匀细胞颗粒群

12. 放进微型台式离心机离心5分钟,速度为1000g

13. 小心抽去上清液

14. 重复实验步骤1113一次

15. 加入xx微升染色工作液,混匀细胞颗粒群

16. 室温下孵育15分钟,避免光照

17. 移出50微升到载玻片上,放上盖玻片

18. 即刻在荧光显微镜下进行观察:激发波长493nm,散发波长503nm脂滴呈现绿色)

注意事项

1. 本产品为20次操作

2. 操作时,须戴手套

3. 所有操作在室温下进行

4. 本产品适合各种规格的培养细胞:载玻片,载玻片培养皿,35mm培养皿,和各种培养孔板,须相应调整处理液:

操作容器

建议操作体系

载玻片

200微升

35mm培养皿

1毫升

96孔培养板

100微升

48孔培养板

200微升

24孔培养板

400微升

12孔培养板

1毫升

6孔培养板

2毫升

25cm2细胞培养瓶

3毫升

5. 染色工作液新鲜配制,即刻使用,不宜保存

6. 染色液(Reagent C的工作液使用比例:1毫升体系可以使用10微升(1100容量比)

7. 每次更换试剂溶液时,保持样品表面基本晾干。空气中晾干状态为没有水滴,呈湿润状态,可见反光

8. 试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满细胞表面

9. 如果用户没有匹配的滤波器,可以使用激发波长450490nm散发波长500530nm之间的任一激发波长

10. 染色完成后,即刻进行荧光显微镜观察

11. 参考图像如下:

 

12. 本公司提供系列脂滴染色试剂产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定荧光清晰

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

订购信息

单组份订购信息

编号                名称           规格

G&VS10589.1   细胞脂滴BODIPY荧光染色试剂盒   50

G&VS10589.1A   清理液(Reagent A          毫升

G&VS10589.1B   固着液(Reagent B          毫升

G&VS10589.1C   染色液(Reagent C         

G&VS10589.1D    稀释液(Reagent D          毫升

 

试剂盒订购信息 

产品编号

名称

规格

G&VS10523

脂滴(lipid droplet)分离试剂盒

10

G&VS10589.1

细胞脂滴BODIPY荧光染色试剂盒

20

G&VS10589.2

组织脂滴BODIPY荧光染色试剂盒

20

G&VS10589.3

真菌/酵母细胞脂滴BODIPY荧光染色试剂盒

20

G&VS10590.1

细胞脂滴尼罗红荧光染色试剂盒

20

G&VS10590.2

组织脂滴尼罗红荧光染色试剂盒

20

G&VS10590.3

真菌/酵母细胞脂滴尼罗红荧光染色试剂盒

20

G&VS10626.1

细胞脂滴油红O荧光染色试剂盒

20

G&VS10626.2

组织脂滴油红O荧光染色试剂盒

20

G&VS10626.3

真菌/酵母细胞脂滴油红O荧光染色试剂盒

20

G&VS10627

细胞(种系)脂滴亲脂素(adipophilin)荧光染色试剂盒

10

G&VS10628

细胞(种系)脂滴包被蛋白perilipin)荧光染色试剂盒

10

G&VS30150

脂滴蛋白萃取试剂盒

20

 

 


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