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发布时间:2026/9/7 13:48:32 阅读次数:31
细胞株/干细胞人源基因检测试剂盒产品说明书
主要用途
细胞株/干细胞人源基因检测试剂是一种旨在根据种系特异性基因分子标志线粒体细胞色素C氧化酶亚体1基因的序列片段设计引物,针对各种培养细胞和干细胞样本DNA进行PCR扩增,获得特异性条带,来识别或定性鉴定其人源种系的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。可以被用于各种细胞株,包括培养细胞、干细胞中人源种系的溯源、识别和认定。可用于后续测序、载体克隆等实验。产品即到即用,性能稳定,操作简便,扩增特异。
技术背景
细胞实验中的细胞种系溯源、识别和认定,是细胞研究中关于机制的可行性、适用性、有效性的基本保障。实验过程中经常出现细胞种系交叉污染,细胞来源模糊,滋养层细胞反客为主,多种系细胞混合培养分析等,细胞种系的认定必不可少。基于线粒体DNA具有高度种系保留、高拷贝数(多达2500拷贝/细胞)、以及真实性(authenticity)、特异性(specificity)和敏感性(sensitivity)的优点,成为识别和鉴定不同动物种系的强有力工具。其中人的线粒体细胞色素C氧化酶亚体(cytochrome C oxidase subunit 1;COX1)基因的特异DNA序列片段,作为人的种系特异性(species specific)分子标记,通过扩增其特异产物,进行识别、定性、定量鉴定细胞株,包括培养细胞、干细胞等人源种系。
产品内容
扩增液(Reagent A) 微升
补充液(Reagent B) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里;有效保证6月
用户自备
PCR级矿物油:用于封隔反应液
PCR仪:用于样品扩增
PCR管或平板:用于PCR反应的容器
琼脂糖凝胶电泳:用于扩增后电泳分析
实验步骤
实验开始前,从-20℃冰箱中取出试剂,放进冰槽里融化。然后进行下列操作:
1. 针对一个样本,每次移出xx微升扩增液(Reagent A)到PCR管
2. 加入1微升用户自备的的待测DNA样品(总量100至200纳克)
3. 再加入xx微升补充液(Reagent C)(反应总量为25微升)
4. 即刻放进微型台式离心机瞬时离心5秒,速度为500g(或2000RPM;例如eppendorf 5415)
5. (选择步骤)加入50微升用户自备的PCR级矿物油(注意:参见注意事项9)
6. 即刻进行热启动PCR反应:
| 温度(℃) | 时间 | 循环 |
| 95 | 5分钟 | 1 |
| 95 55 70 | 30秒 30秒 60秒 |
35至40 |
| 70 | 5分钟 | 1 |
7. 反应完毕后,移取5微升进行1.8%琼脂糖凝胶电泳:
|
| 片段大小 | GeneID |
| 线粒体DNA基因产物 | 228碱基 | J01415 |
8. 如果继续测序鉴定,胶回收PCR产物(建议使用高质纯化胶回收试剂盒;G&VS20007.2)
9. 进行后续的测序反应
注意事项
1. 本产品为20次操作
2. 本产品检测灵敏度可达800细胞
3. 操作时,须戴手套
4. 建议使用带滤芯的枪头,避免污染
5. 在-20℃冰箱里储存的产品避免反复冻融
6. 样品DNA萃取建议使用细胞株/干细胞预处理试剂盒—G&VS10640
7. 出现扩增条带:证明为人源细胞的样品
8. 可以将扩增产物纯化后,克隆到质粒中,然后进行测序
9. 根据用户PCR仪的性能,决定是否加入矿物油(Mineral Oil)
10. 本公司提供系列细胞种系基因分析试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定无核酶污染
3. 本产品经鉴定检测特异
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组份订购信息
编号 名称 规格
G&VS10631 细胞株/干细胞人源基因检测试剂盒 20次
G&VS10631A 扩增液(Reagent A) 毫升
G&VS10631B 补充液(Reagent B) 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS10631 | 细胞株/干细胞人源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10632 | 细胞株/干细胞大鼠源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10633 | 细胞株/干细胞小鼠源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10634 | 细胞株/干细胞兔源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10635 | 细胞株/干细胞狗源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10636 | 细胞株/干细胞猫源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10637 | 细胞株/干细胞马源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10638 | 细胞株/干细胞猴源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10639 | 细胞株/干细胞中国仓鼠源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10640 | 细胞株/干细胞预处理试剂盒 | 20次 |
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