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组织3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT）含量光度法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间：2026/9/7 13:49:08 阅读次数：28

组织3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT）含量光度法定量检测试剂盒

产品说明书

主要用途

组织3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT）含量光度法定量检测试剂是一种旨在通过3-硝基酪氨酸，在碱性条件下，与连二亚硫酸盐反应，产生3-氨基酪氨酸，即采用光度法来测定样品中3-硝基酪氨酸含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解萃取液样品（动物、人体）3-硝基酪氨酸的含量检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。

技术背景

酪氨酸是一种芳香族氨基酸，存在于大多数蛋白质中。在蛋白质结构表面，用于转译后蛋白修饰，其中包括蛋白质硝基化，其为炎症的特征之一，与诱导型一氧化氮合成酶（nitric oxide synthase）上调有关。蛋白质中的酪氨酸残基与四硝基甲烷（tetranitromethane）和过氧亚硝基（peroxynitrite）等活性氮化合物（reactive nitrogen species；RNS）化学性反应，转化为3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT），从而改变蛋白质结构和酶活（失活）。在哺乳动物组织中，3-硝基酪氨酸升高，表明机体处于氧化应激活性氧和消化应急引起的病理状态，包括动脉粥样硬化、风湿性关节炎、炎症、神经退行性病变等；也是氧化应激和蛋白质硝基化的生物标志。基于3-硝基酪氨酸，在碱性条件下，与连二亚硫酸盐（dithionite）反应，产生3-氨基酪氨酸（3-aminotyrosine），在分光光度仪上显示吸光峰值的变化（430nm波长），来定量测定3-硝基酪氨酸含量。

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

裂解液（Reagent B）毫升

缓冲液（Reagent C）毫升

反应液（Reagent D）管

产品说明书 1份

保存方式

保存清理液（Reagent A）在4℃冰箱里，其余的保存在—20℃冰箱里；反应液（Reagent D）密闭盖子，避免光照；有效保证6月

用户自备

1.5毫升离心管：用于样品操作的容器

15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

DOUNCE匀浆器：用于裂解组织

微型台式离心机：用于样品操作

涡旋震荡仪：用于混匀反应

比色皿：用于光度分析的容器

分光光度仪：用于光度分析

实验步骤

一、 样品准备

1．手术取出动物组织，并秤重以确定200毫克组织重量

2．（选择步骤）放进预冷的15毫升锥形离心管

3．（选择步骤）加xx毫升清理液（Reagent A）清洗1次

4．移入到一个液氮冻存管

5．即刻放进液氮罐过夜

6．次日从液氮罐里取出，即刻（最快速度）用研磨棒碾碎组织成粉末状（注意：切莫使组织冻融）

7．放进一个15毫升锥形离心管

8．加入预冷的xx微升裂解液（Reagent B）

9．强力涡旋震荡30秒，充分混匀

10．放进DOUNCE匀浆器里匀浆80下

11．将匀浆液转移到1.5毫升离心管

12．放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为10000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）

13．小心移取上清液到新的1.5毫升离心管

14．移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）

15．即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作（注意：建议在1月之内完成检测）

二、样品检测

实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的反应液（Reagent D）取出，加入xx毫升缓冲液（Reagent C），混匀，标记为反应工作液，置入冰槽里备用，避免光照。然后进行下列操作。

1．准备好待测样品（例如组织裂解萃取液样品等），置于冰槽里

2．设定好分光光度仪：波长430nm，并置零

3．准备2个1.5毫升离心管，标记为样品管和本底管

4．分别移取200微升（200微克蛋白质）待测样品到样品管和本底管

5．加入xx微升缓冲液（Reagent C）到样品管

6．加入xx微升缓冲液（Reagent C）到本底管

7．加入xx微升反应工作液到本底管，混匀

8．室温下孵育10分钟，避免光照

9．即刻分别转移到1毫升比色皿

10．放进分光光度仪检测（430nm波长）：获得样品读数和本底读数

11．实际吸光读数：样品管读数－本底管读数

12．计算样品含量：

（实际吸光读数X 1（体系容量；毫升）X样品稀释倍数）÷[0.20（样品容量；毫升）X 4.4（毫摩尔吸光系数）]＝微摩尔3-硝基酪氨酸/毫升

转换：微摩尔3-硝基酪氨酸/毫升÷（样品蛋白浓度）毫克/毫升＝微摩尔3-硝基酪氨酸/毫克

注意事项

1．本产品为20次操作

2．本产品检测值可达1微摩尔

3．操作时，须戴手套

4． 反应液（Reagent D）密闭盖子，避免光照

5． 反应工作液即配即用，不宜保存

6．建议待测样本蛋白浓度为1毫克/毫升（本公司提供 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒G&VS30030.1）

7．如果样本含量过低或过高，则可以增加或降低样本量

8．本公司提供系列3-硝基酪氨酸检测试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定检测敏感

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS10641.2 组织3-硝基酪氨酸含量光度法定量检测试剂盒 20次

G&VS10641.2A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS10641.2B 裂解液（Reagent B）毫升

G&VS10641.2C 缓冲液（Reagent C）毫升

G&VS10641.2D 反应液（Reagent D）管

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS10641.1	细胞3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT）含量光度法定量检测试剂盒	20次
G&VS10641.2	组织3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT）含量光度法定量检测试剂盒	20次
G&VS10641.3	血液3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT）含量光度法定量检测试剂盒	20次
G&VS10641.4	体液3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT）含量光度法定量检测试剂盒	20次
G&VS10641.5	精子3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT）含量光度法定量检测试剂盒	20次
G&VS10642.1	细胞3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT）含量荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS10642.2	组织3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT）含量荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS10642.3	血液3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT）含量荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS10642.4	体液3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT）含量荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS10642.5	精子3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT）含量荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS10643.1	细胞3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT）含量高效液相色谱法（HPLC）定量检测试剂盒	20次
G&VS10643.2	组织3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT）含量高效液相色谱法（HPLC）定量检测试剂盒	20次
G&VS10643.3	血液3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT）含量高效液相色谱法（HPLC）定量检测试剂盒	20次
G&VS10643.4	体液3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT）含量高效液相色谱法（HPLC）定量检测试剂盒	20次
G&VS10643.5	精子3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine；3-NT）含量高效液相色谱法（HPLC）定量检测试剂盒	20次