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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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[35S]-Met 细胞代谢标记试剂盒产品说明书

发布时间：2026/9/7 13:50:41 阅读次数：23

[35S]-Met 细胞代谢标记试剂盒产品说明书

主要用途

[35S]-Met 细胞代谢标记试剂是一种旨在通过稳定性同位素[35S]标记蛋氨酸，在特定细胞培养体系内，整合到细胞代谢合成的目标蛋白中的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种培养细胞、转染细胞等。其应用于后续免疫蛋白沉淀、一维和二维蛋白电泳、高效液相层析、质谱分析，以及放射免疫分析法等。产品即到即用，性能稳定，操作便捷，反应敏感，重复性好。

技术背景

稳定同位素代谢性标记(isotope metabolic labeling) 是蛋白组学研究的常用工具。通过同位素标记的氨基酸，在体内代谢过程中，整合到蛋白合成中，达到目标蛋白分离、转换(turnover)、分析和识别。其中同位素 [35S]标记的蛋氨酸(methionine；Met)是普遍使用的代谢标记，源于其相对稳定(半衰期 87.5 天)、放射性强(约 40TBq/毫摩尔)，标记快速，不受聚丙烯酰胺干扰影响。

产品内容

清理液(Reagent A)

反应液(Reagent B)

标记液(Reagent C)

裂解液(Reagent D)

产品说明书

保存方式

保存清理液(Reagent A)在 4℃冰箱里；其余的保存在－20C冰箱里；有效保证 6 月

用户自备

[35S]-Met 同位素：用于同位素标记

1.5 毫升离心管：用于样品反应操作和保存的容器

细胞培养箱：用于细胞培养和标记孵育

震荡器：用于混匀反应物

4℃微型台式离心机：用于样品操作

细胞刮脱棒：用于贴壁细胞脱离

液体闪烁计数器(liquid scintillation counter)：用于同位素活性测定

实验步骤

1．准备 1 瓶 25cm2 细胞培养瓶

2．接种用户需代谢标记的细胞(5 X 106 细胞)

3．放进 37℃细胞培养箱孵育 24 小时，直到细胞生长密度达 80％

4．小心抽去细胞培养液

5．加入毫升清理液(Reagent A)，清洗生长中的细胞表面

6．小心抽去清理液

7．加入毫升反应液(Reagent B)，覆盖生长中的细胞表面

8．加入 30 微升用户自备的预热的标记液(Reagent C) (注意：同位素总量为 200 微居里/毫升)

9．拧紧瓶盖

10．轻轻摇匀后，放进 37℃细胞培养箱孵育 5 小时

11．(选择步骤)加入 30 微升用户自备的预热的标记液(Reagent C) (注意：同位素总量为

200 微居里/毫升)

12．(选择步骤)拧紧瓶盖

13．(选择步骤)轻轻摇匀后，放进 37℃细胞培养箱孵育 24 小时

14．小心移取培养液到 15 毫升锥形离心管

15．加入毫升清理液(Reagent A)，清洗生长中的细胞表面

16．小心抽去清理液

17．使用细胞刮脱棒脱离细胞

18．转移到 1.5 毫升离心管

19．加入微升裂解液(Reagent D)

20．涡旋震荡 15 秒

21．置于冰槽里孵育 30 分钟

22．放进微型台式离心机离心 5 分钟，速度为 16000g (或 13000RPM，例如 EPPENDORF 5415)

23．小心移取上清液到新的 1.5 毫升离心管

24．将培养上清和细胞裂解悬液放进-70 保存或置于冰槽里备用

25．或继续后续一维、二维蛋白电泳、免疫沉淀、质谱分析等

注意事项

1．本产品为 20 次操作

2．操作时，须戴手套

3．同位素操作须严格遵守规章制度

4．建议使用带滤芯的枪头进行操作

5．同位素[35S]-Met，建议使用 ICN 或 AMERSHAM (安玛西亚)公司

6．建议使用新鲜同位素材料；同位素具有挥发性，须拧紧瓶盖

7．选择步骤应用于糖蛋白，例如整联蛋白(integrin)，包括加量一次和过夜标记

8．根据目标蛋白的不同，可以调整代谢标记时间

9．建议使用通用型蛋白免疫共沉淀(蛋白 A 树脂)试剂盒(G&VS30029. 1)，进行后续免疫共沉淀实验

10．本公司提供系列同位素处理试剂产品

质量标准

1 ．本产品经鉴定性能稳定

2 ．本产品经鉴定不含污染性蛋白酶和核酶

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式(实验报告) 与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK ， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

编号	名称	规格
G&VS11004	[35S]-Met 细胞代谢标记试剂盒	20 次
G&VS11004A	清理液(Reagent A)	500 毫升
G&VS11004B	反应液(Reagent B)	100 毫升
G&VS11004C	标记液(Reagent C)	1 毫升
G&VS11004D	裂解液(Reagent D)	50 毫升
G&VS30027	通用型蛋白免疫共沉淀(蛋白A 树脂)试剂盒	10 次

产品编号	名称	规格
G&VS11001	DNA 探针同位素([α32P]dCTP)聚合酶整合标记试剂盒	20 次
G&VS11002	5’末端 DNA 探针同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂盒	20 次
G&VS11003	RNA 探针同位素([α32P]CTP)聚合酶标记试剂盒	20 次
G&VS11004	[35S]－Met 细胞代谢标记试剂盒	20 次
G&VS11005	[35S]－Cys 细胞代谢标记试剂盒	20 次
G&VS11006	GST 融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂盒	20 次
G&VS20086. 1	3’末端 RNA 探针同位素([α32P]dATP) 聚合酶标记试剂盒	20 次
G&VS20086.2	3’末端 RNA 探针同位素([32P]pCp)连接酶标记试剂盒	20 次
G&VS20096	3’末端 RNA 探针同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂盒	20 次
G&VS20040	随机引物 DNA 探针同位素([α32P]dCTP) 聚合酶标记试剂盒	20 次
G&VS20041. 1	3’末端 DNA 探针同位素([α32P]dATP) 聚合酶标记试剂盒	20 次
G&VS20041.2	3’末端 DNA 探针同位素([α32P]dCTP) 聚合酶标记试剂盒	20 次
G&VS20041.3	3’末端 DNA 探针同位素([α32P]dATP) 转移酶标记试剂盒	20 次
G&VS20043	DNA 末端平滑补缺同位素([35S]dATP)聚合酶标记试剂盒	20 次
G&VS20044	三联重复子延展度同位素([γ32P]ATP)激酶标记法检测试剂盒	10 次
G&VS20050. 1	同位素[α32P]dCTP 聚合酶标记微卫星扩增试剂盒	20 次
G&VS20050.2	同位素[γ32P]ATP 激酶标记微卫星扩增试剂盒	20 次
G&VS11008	同位素标记放射活性 TCA 检测试剂盒	20 次
G&VS11009	随机引物 DNA 探针同位素标记产物完全双链制备试剂盒	20 次
G&VS11010	同位素标记放射活性滤膜法检测试剂盒	20 次
G&VS11011	同位素标记放射活性离心柱检测试剂盒	20 次