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发布时间:2026/9/7 13:51:16 阅读次数:27
GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂盒产品说明书
主要用途
GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂是一种旨在使用同位素([γ32P]ATP)和cAMP依赖性蛋白激酶A(protein kinase K),标记纯化的目标融合蛋白,成为敏感探针的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种GST融合的重组蛋白。其应用于后续远西方杂交(FAR WESTERN BLOT) 印迹实验和印迹覆膜结合(BLOT OVERLAY BINDING)实验等。产品即到即用,性能稳定,操作便捷,反应敏感,重复性好。
技术背景
谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-transferase;GST)融合蛋白(fusion protein)的技术,广泛应用于蛋白与蛋白之间相互作用的研究、抗体的制造和纯化、以及生化分析。基于GST融合蛋白由GSTmoietry、蛋白酶切离部位和已知激酶磷酸化部位构成,使用同位素([γ32P]ATP)和cAMP依赖性蛋白激酶A(protein kinase K),标记纯化的目标融合蛋白,作为敏感的探针,在远西方杂交(FAR WESTERN BLOT) 印迹实验或印迹覆膜结合(BLOT OVERLAY BINDING)实验中,探测和分析结合蛋白或多肽结构域。GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记是蛋白组学研究的常用工具。
产品内容
缓冲液(Reagent A) 毫升
标记液(Reagent B) 微升(用户自备)
反应液(Reagent C) 微升
酶促液(Reagent D) 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里;有效保证6月
用户自备
[γ32P]ATP 同位素:用于同位素标记
1.5毫升离心管:用于样品反应操作和保存的容器
干式恒温仪:用于标记孵育
液体闪烁计数器(liquid scintillation counter):用于同位素活性测定
实验步骤
1. 准备好纯化的GST融合蛋白
2. 移取xx微升缓冲液(Reagent A)到1.5毫升离心管
3. 加入2.5微升用户自备的GST融合蛋白(总量为10微克)
4. 加入xx微升标记液(Reagent B)(注意:同位素总量为10毫居里/毫升;5000居里/毫摩尔)
5. 加入xx微升反应液(Reagent C)
6. 加入xx微升酶促液(Reagent D)
7. 枪头上下抽吸混匀
8. 放进30℃干式恒温仪孵育30分钟
9. 放进-70℃保存或置于冰槽里备用
10. 或使用5至10微升(107CPM)标记蛋白继续后续远西方杂交(FAR WESTERN BLOT) 印迹实验和印迹覆膜结合(BLOT OVERLAY BINDING)实验等
注意事项
1. 本产品为20次操作
2. 本产品的标记效率可达60%以上
3. 操作时,须戴手套
4. 操作时,严格无菌
5. 同位素操作须严格遵守规章制度
6. 建议使用带滤芯的枪头进行操作
7. 同位素[γ32P]ATP(1居里=37GBq),建议使用ICN或AMERSHAM(安玛西亚)公司
8. 由于[γ32P]同位素的半衰期短,建议使用新鲜同位素材料;且标记后即刻使用
9. 可以直接在GST融合蛋白树脂上进行标记,然后常规洗脱或凝血酶(THROMBIN)切离纯化;纯化后进行同位素活性测定
10. 本公司提供系列同位素处理试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定不含污染性蛋白酶和核酶
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
编号 名称 规格
G&VS11006 GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂盒 20次
G&VS11006A 缓冲液(Reagent A) 10毫升
G&VS11006B 标记液(Reagent B) 1毫升
G&VS11006C 反应液(Reagent C) 500微升
G&VS11006D 酶促液(Reagent D) 1毫升
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS11006 | [35S]-Met细胞代谢标记试剂盒 | 20次 |
| G&VS11005 | [35S]-Cys细胞代谢标记试剂盒 | 20次 |
| G&VS11006 | GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂盒 | 20次 |
| G&VS11025 | GST融合蛋白同位素([γ32P]GTP)激酶标记试剂盒 | 20次 |
| G&VS11008 | 同位素标记放射活性TCA检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS11010 | 同位素标记放射活性滤膜法检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS11011 | 同位素标记放射活性离心柱检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS30110 | 远西方杂交(FAR WESTERN BLOT) 印迹同位素检测试剂盒 | 5次 |
| G&VS30111 | 印迹覆膜结合(BLOT OVERLAY BINDING)同位素检测试剂盒 | 5次 |
| G&VS30112 | 远西方杂交(FAR WESTERN BLOT)印迹消除试剂盒 | 20次 |
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