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GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂盒产品说明书

发布时间:2026/9/7 13:51:16      阅读次数:27

 

 GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂盒产品说明书

 

主要用途

 GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂是一种旨在使用同位素([γ32P]ATP)和cAMP依赖性蛋白激酶Aprotein kinase K),标记纯化的目标融合蛋白,成为敏感探针的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种GST融合的重组蛋白。其应用于后续远西方杂交(FAR WESTERN BLOT 印迹实验和印迹覆膜结合(BLOT OVERLAY BINDING)实验产品即到即用,性能稳定,操作便捷,反应敏感,重复性好。

 

技术背景

谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-transferaseGST)融合蛋白(fusion protein)的技术,广泛应用于蛋白与蛋白之间相互作用的研究、抗体的制造和纯化、以及生化分析。基于GST融合蛋白由GSTmoietry、蛋白酶切离部位和已知激酶磷酸化部位构成,使用同位素([γ32P]ATP)和cAMP依赖性蛋白激酶Aprotein kinase K),标记纯化的目标融合蛋白,作为敏感的探针,在远西方杂交(FAR WESTERN BLOT 印迹实验或印迹覆膜结合(BLOT OVERLAY BINDING)实验中,探测和分析结合蛋白或多肽结构域。GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记是蛋白组学研究的常用工具。

 

产品内容

缓冲液(Reagent A       毫升

标记液(Reagent B       微升(用户自备)

反应液(Reagent C       微升

酶促液(Reagent D        微升

产品说明书              1

 

保存方式

保存20冰箱里;有效保证6

 

用户自备

[γ32P]ATP 同位素:用于同位素标记

1.5毫升离心管:用于样品反应操作和保存的容器

干式恒温仪:用于标记孵育

液体闪烁计数器liquid scintillation counter):用于同位素活性测定

 

实验步骤

1. 准备好纯化的GST融合蛋白

2. 移取xx微升缓冲液(Reagent A1.5毫升离心管

3. 加入2.5微升用户自备的GST融合蛋白(总量为10微克)

4. 加入xx微升标记液(Reagent B(注意:同位素总量为10毫居里/毫升;5000居里/毫摩尔)

5. 加入xx微升反应液(Reagent C

6. 加入xx微升酶促液(Reagent D

7. 枪头上下抽吸混匀

8. 放进30干式恒温仪孵育30分钟

9. 放进-70保存或置于冰槽里备用

10. 或使用510微升(107CPM)标记蛋白继续后续远西方杂交(FAR WESTERN BLOT 印迹实验和印迹覆膜结合(BLOT OVERLAY BINDING)实验

 

注意事项

1. 本产品为20次操作

2. 本产品的标记效率可达60%以上

3. 操作时,须戴手套

4. 操作时,严格无菌

5. 同位素操作须严格遵守规章制度

6. 建议使用带滤芯的枪头进行操作

7. 同位素[γ32P]ATP1居里=37GBq,建议使用ICNAMERSHAM(安玛西亚)公司

8. 由于[γ32P]同位素的半衰期短,建议使用新鲜同位素材料;且标记后即刻使用

9. 可以直接在GST融合蛋白树脂上进行标记,然后常规洗脱或凝血酶(THROMBIN)切离纯化;纯化后进行同位素活性测定

10. 本公司提供系列同位素处理试剂产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定不含污染性蛋白酶和核酶

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORKRECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

订购信息

编号                                        名称                                                                   规格

G&VS11006         GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂盒  20

G&VS11006A         缓冲液(Reagent A                                                          10毫升

G&VS11006B         标记液(Reagent B                                                         1毫升

G&VS11006C         反应液(Reagent C                                                         500

G&VS11006D         酶促液(Reagent D                                                         1毫升

 

产品编号

名称

规格

G&VS11006

[35S]Met细胞代谢标记试剂盒

20次

G&VS11005

[35S]Cys细胞代谢标记试剂盒

20次

G&VS11006

GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂盒

20次

G&VS11025

GST融合蛋白同位素([γ32P]GTP)激酶标记试剂盒

20次

G&VS11008

同位素标记放射活性TCA检测试剂盒

20次

G&VS11010

同位素标记放射活性滤膜法检测试剂盒

20次

G&VS11011

同位素标记放射活性离心柱检测试剂盒

20次

G&VS30110

远西方杂交(FAR WESTERN BLOT 印迹同位素检测试剂盒

5次

G&VS30111

印迹覆膜结合(BLOT OVERLAY BINDING同位素检测试剂盒

5次

G&VS30112

远西方杂交(FAR WESTERN BLOT)印迹消除试剂盒

20次

 

 


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