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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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电转感受态细菌DH10B细胞产品说明书

发布时间：2026/9/11 15:24:13 阅读次数：10

电转感受态细菌DH10B细胞产品说明书

主要用途

电转感受态细菌DH10B细胞是一种通过甘油溶液制备的，耐受电击刺激，快速吸收DNA的特定状态的常用大肠杆菌细胞。其适宜于原核或真核生物基因组DNA导入、大质粒转染、噬菌体表面展示技术、重组DNA实验等。产品即到即用，性能稳定，操作方便，电转状态恒定，转染效率高，可达1 X 10⁹转化菌/微克pUC19。

技术背景

细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态。电转感受态细菌DH10B细胞是通过电休克而不是热休克的简便快速高效的技术方法。其基因型为F^- mcrA r（mrr-hsdRMS-mcrBC）f80rlacZ rM15 rlacX74 recA1 endA1 araD139 r（ara，leu）7697 galU galK l^－rpsL nupG ，可以在Bluo-gal或X-gal琼脂平板上进行蓝白斑筛选；其含有recA1和endA1突变，而确保质粒中外源基因片断插入稳定，改善质粒DNA提取的质量。其转化效率可达1.0 X 10⁹转化菌/微克pUC19。

产品内容

电转菌液（Reagent A）微升

产品说明书 1份

保存方式

保存在－70℃冰箱里，避免反复冻融，有效保证6月

用户自备

SOC培养液：用于转化菌的复苏培养（G&VS12002）

琼脂平板：用于转化菌的筛选

电穿孔仪：用于转化电击

恒温摇床：用于转化细菌的复苏培养

转化步骤

实验开始前，开启电穿孔仪，并设置好操作条件：2.5kV，200Ω，25μF；同时准备好含有筛选性抗生素的LB琼脂平板。然后进行下列操作。

1．从－70℃冰箱里取出1管（100微升）电转菌液（Reagent A）

2．置于冰槽里融化

3．移取xx微升电转菌液（Reagent A）到预冷的1.5毫升离心管

4．加入1微升（100纳克总量）DNA（注意：理想比例为1：10至20（载体容量：感受态容量））

5．用枪头轻轻搅动细胞

6．转移到预冷的0.1厘米电击杯

7．轻轻敲击桌面，使DNA/菌液混匀液沉于管底

8．即刻放进电穿孔仪的电击槽里

9．推动到电击位置完成电击（注意：操作安全）

10．加入1毫升室温预热的用户自备的SOC培养液

11．转移到新的1.5毫升离心管

12．放进37℃摇床孵育60分钟，速度为220RPM

13．稀释（1：100）

14．移取100微升到LB琼脂平板

15．使用铺板棒轻轻均匀铺板

16．室温下静置15分钟

17．倒置琼脂平板

18．放进37℃培养箱孵育24小时

注意事项

1．本产品为总量0.5毫升规格，严格保存在－70℃冰箱里

2．操作时，须戴手套

3．操作时，注意安全

4．文库构建，建议使用电转超级感受态细菌DH10B细胞—G&VS12030.4

5．未用完的感受态细胞，即刻放回－70℃冰箱保存

6．每冻融1次，转染效率下降2倍

7．建议转染后，使用SOC培养液复苏培养，否则转染效率2至3倍下降

8．建议使用纯化的不含盐离子的DNA，至关重要

9．建议使用Bio-Rad GenePulserII电穿孔仪

10．使用pUC19对照培养板计算转化效率（CFU/微克）：

【CFU（对照组）¸皮克pUC19】X 【1 X 10⁶皮克/微克 X（细菌总容量，毫升¸铺板容量，毫升） X 稀释倍数】

例如：10皮克pUC19，1毫升菌量，1：100稀释，铺板50微升，产生50菌落：

CFU/微克＝【50CFU¸10皮克】 X【1 X 10⁶皮克/微克 X （1¸0.05）X100】＝1.0 X 10¹⁰

11．本公司提供系列感受态菌产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定转染效率高

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS12030.3 电转感受态细菌DH10B细胞微升

G&VS12030.3A 电转菌液（Reagent A）微升

G&VS12002 特殊细菌营养基毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS60001	电转感受态细菌制备试剂盒	1次
G&VS60002	钙转感受态细菌制备试剂盒	1次
G&VS60068	细菌电转试剂盒	20次
G&VS60015	细菌钙转试剂盒	20次
G&VS12030.1	DH10B细菌	1毫升
G&VS12030.2	DH10B钙转感受态细菌	5 X 200微升
G&VS12030.3	DH10B电转感受态细菌	5 X 100微升
G&VS12030.4	DH10B电转超级感受态细菌	100微升