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发布时间：2026/9/11 15:29:22 阅读次数：10
电转超级感受态细菌DH10B细胞产品说明书
主要用途
电转超级感受态细菌DH10B细胞是一种通过甘油溶液制备的，耐受电击刺激，快速吸收DNA的特定状态的常用大肠杆菌细胞。其主要适宜于大质粒转染、噬菌体表面展示技术、构建cDNA文库等。产品即到即用，性能稳定，操作方便，电转状态恒定，转染效率高，实际可达1 X 109转化菌/微克pUC19。
技术背景
细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态。电转感受态细菌DH10B细胞是通过电休克而不是热休克的简便快速高效的技术方法。其基因型为F- mcrA r（mrr-hsdRMS-mcrBC）f80rlacZ rM15 rlacX74 recA1 endA1 araD139 r（ara，leu）7697 galU galK l－rpsL nupG ，可以在Bluo-gal或X-gal琼脂平板上进行蓝白斑筛选；其含有recA1和endA1突变，而确保质粒中外源基因片断插入稳定，改善质粒DNA提取的质量。其实际转化效率为1.0 X 109转化菌/微克pUC19。
产品内容
超转菌液（Reagent A） 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存在－70℃冰箱里，避免反复冻融，有效保证6月
用户自备
SOC培养液：用于转化菌的复苏培养（G&VS12002）
琼脂平板：用于转化菌的筛选
电穿孔仪：用于转化电击
恒温摇床：用于转化细菌的复苏培养
转化步骤
实验开始前，开启电穿孔仪，并设置好操作条件：2.5kV，200Ω，25μF；同时准备好含有筛选性抗生素的LB琼脂平板。然后进行下列操作。
1． 从－70℃冰箱里取出1管（xx微升）超转菌液（Reagent A）
2． 置于冰槽里融化
3． 移取xx微升超转菌液（Reagent A）到预冷的1.5毫升离心管
4． 加入1微升（100纳克总量）DNA（注意：理想比例为1：10至20（载体容量：感受态容量））
5． 用枪头轻轻搅动细胞
6． 转移到预冷的0.1厘米电击杯
7． 轻轻敲击桌面，使DNA/菌液混匀液沉于管底
8． 即刻放进电穿孔仪的电击槽里
9． 推动到电击位置完成电击（注意：操作安全）
10． 加入1毫升室温预热的用户自备的SOC培养液
11． 转移到新的1.5毫升离心管
12． 放进37℃摇床孵育60分钟，速度为220RPM
13． 稀释（1：100）
14． 移取100微升到LB琼脂平板
15． 使用铺板棒轻轻均匀铺板
16． 室温下静置15分钟
17． 倒置琼脂平板
18． 放进37℃培养箱孵育24小时
注意事项
1． 本产品为总量100微升规格，严格保存在－70℃冰箱里
2． 操作时，须戴手套
3． 操作时，注意安全
4． 未用完的感受态细胞，即刻放回－70℃冰箱保存
5． 每冻融1次，转染效率下降2倍
6． 建议转染后，使用SOC培养液复苏培养，否则转染效率2至3倍下降
7． 建议使用纯化的不含盐离子的DNA，否则点击时产生爆杯而失败
8． 建议使用Bio-Rad GenePulserII电穿孔仪
9． 使用pUC19对照培养板计算转化效率（CFU/微克）：
【CFU（对照组）¸皮克pUC19】X 【1 X 106皮克/微克 X（细菌总容量，毫升¸铺板容量，毫升） X 稀释倍数】
例如：10皮克pUC19，1毫升菌量，1：100稀释，铺板50微升，产生50菌落：
CFU/微克＝【50CFU¸10皮克】 X【1 X 106皮克/微克 X （1¸0.05）X100】＝1.0 X 1010
10． 本公司提供系列感受态菌产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定转染效率高
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS12030.4 电转感受态细菌DH10B细胞 微升
G&VS12030.4A 超转菌液（Reagent A） 微升
G&VS12002 特殊细菌营养基 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS60001 | 电转感受态细菌制备试剂盒 | 1次 |
| G&VS60002 | 钙转感受态细菌制备试剂盒 | 1次 |
| G&VS60068 | 细菌电转试剂盒 | 20次 |
| G&VS60015 | 细菌钙转试剂盒 | 20次 |
| G&VS12192.1 | DH5α细菌 | 1毫升 |
| G&VS12192.2 | DH5α钙转感受态细菌 | 10 X 200微升 |
| G&VS12192.3 | DH5α电转感受态细菌 | 10 X 100微升 |
| G&VS12030.1 | DH10B细菌 | 1毫升 |
| G&VS12030.2 | DH10B钙转感受态细菌 | 5 X 200微升 |
| G&VS12030.3 | DH10B电转感受态细菌 | 5 X 100微升 |
| G&VS12030.4 | DH10B电转超级感受态细菌 | 100微升 |
| G&VS12204.1 | G&VS10细菌 | 1毫升 |
| G&VS12204.2 | G&VS10甲基化基因钙转感受态细菌 | 10 X 100微升 |
| G&VS12204.3 | G&VS10甲基化基因电转感受态细菌 | 5 X100微升 |
| G&VS12205.1 | BJ5183细菌 | 1毫升 |
| G&VS12205.2 | BJ5183钙转感受态细菌 | 5 X 100微升 |
| G&VS12205.3 | BJ5183电转感受态细菌 | 5 X 100微升 |
| G&VS12223.1 | BJ5183腺病毒载体钙转感受态细菌 | 1 X 100微升 |
| G&VS12223.2 | BJ5183腺病毒载体电转感受态细菌 | 1 X 100微升 |
| G&VS12224.1 | TOP10细菌 | 1毫升 |
| G&VS12224.2 | TOP10钙转感受态细菌 | 5 X 200微升 |
| G&VS12224.3 | TOP10电转感受态细菌 | 5 X 100微升 |
| G&VS12231 | G&VS15重组腺病毒载体繁殖超级化学感受态细菌 | 5 X 100微升 |
| G&VS12234.1 | JM109细菌 | 1毫升 |
| G&VS12234.2 | JM109钙转感受态细菌 | 10 X 200微升 |
| G&VS12234.3 | JM109电转感受态细菌 | 10 X 100微升 |
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