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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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钙转感受态细菌DH10B细胞产品说明书

发布时间：2026/9/11 15:35:49 阅读次数：21

钙转感受态细菌DH10B细胞产品说明书

主要用途

钙转感受态细菌DH10B细胞是一种通过钙低渗溶液制备的，易于吸收DNA的特定状态的常用细菌细胞。其适宜于原核或真核生物基因组DNA导入、大质粒转染、噬菌体表面展示技术、重组DNA实验、构建cDNA库等。产品即到即用，性能稳定，操作方便，转染效率高，可达3 X 10⁹转化菌/微克pUC19。

技术背景

细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态。钙转感受态细菌DH10B细胞是根据Hanahan的技术方法制备的。其基因型为F^- mcrA r（mrr-hsdRMS-mcrBC）f80rlacZ rM15 rlacX74 recA1 endA1 araD139 r（ara，leu）7697 galU galK l^－rpsL nupG ，可以在Bluo-gal或X-gal琼脂平板上进行蓝白斑筛选；其含有recA1和endA1突变，而确保质粒中外源基因片断插入稳定，改善质粒DNA提取的质量。其转化效率为1.0 X 10⁶至3.0 X 10⁹转化菌/微克pUC19。

产品内容

钙转菌液（Reagent A）微升

产品说明书 1份

保存方式

保存在－70℃冰箱里，避免反复冻融，有效保证6月

用户自备

SOC培养液：用于转化菌的复苏培养（G&VS12002）

琼脂平板：用于转化菌的筛选

恒温水槽：用于转化热击

恒温摇床：用于转化细菌的复苏培养

转化步骤

实验开始前，将恒温水槽设置为42℃；同时准备好含有筛选抗性试剂（例如100微克/毫升氨苄青霉素）的LB琼脂平板。然后进行下列操作。

1．从－70℃冰箱里取出1管（200微升）钙转菌液（Reagent A）

2．置于冰槽里融化

3．加入1微升（1至10纳克总量）DNA

4．用枪头轻轻搅动细胞

5．放进冰槽里孵育30分钟

6．即刻放进42℃恒温水槽孵育2分钟

7．即刻放回冰槽孵育2分钟

8．加入800微升室温预热的SOC培养液

9．放进37℃摇床孵育60分钟，速度为220RPM

10．移取100微升到1.5毫升离心管

11．加入900微升室温预热的SOC培养液稀释（1：100）

12．移取100微升稀释菌液到LB琼脂平板

13．使用铺板棒轻轻均匀铺板

14．室温下静置15分钟

15．倒置琼脂平板

16．放进37℃培养箱孵育24小时

17．其余的菌液保存在－80℃冰箱里备用

注意事项

1．本产品为总量1毫升规格，严格保存在－70℃冰箱里

2．只允许冻融1次，否则转染效率2倍下降

3．操作时，须戴手套

4．可以使用100微升（二分之一管）钙转菌液（Reagent A）

5．未用完的感受态细胞，即刻放回－70℃冰箱保存

6．建议转染后，使用SOC培养液复苏培养，否则转染效率2至3倍下降

7．铺板容量和稀释倍数，用户可以根据具体情况调整

8．建议使用纯化的DNA，避免带有酚、乙醇、蛋白和去垢剂

9．使用pUC19对照培养板计算转化效率（CFU/微克）：

【CFU（对照组）¸皮克pUC19】X 【1 X 10⁶皮克/微克 X（细菌总容量，毫升¸铺板容量，毫升） X 稀释倍数】

例如：10皮克pUC19，1毫升菌量，1：100稀释，铺板50微升，产生50菌落：

CFU/微克＝【50CFU¸10皮克】 X【1 X 10⁶皮克/微克 X （1¸0.05）X100】＝1.0 X 10¹⁰

10．本公司提供系列感受态菌产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定转染效率高

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS12030.2 钙转感受态细菌DH10B细胞微升

G&VS12030.2A 钙转菌液（Reagent A）微升

G&VS12002 特殊细菌营养基毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS60001	电转感受态细菌制备试剂盒	1次
G&VS60002	钙转感受态细菌制备试剂盒	1次
G&VS60068	细菌电转试剂盒	20次
G&VS60015	细菌钙转试剂盒	20次
G&VS12030.1	DH10B细菌	1毫升
G&VS12030.2	DH10B钙转感受态细菌	5 X 200微升
G&VS12030.3	DH10B电转感受态细菌	5 X 100微升
G&VS12030.4	DH10B电转超级感受态细菌	100微升