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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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钙转感受态细菌 DH10B 细胞产品说明书

发布时间：2026/9/11 15:36:25 阅读次数：24

主要用途

钙转感受态细菌DH10B细胞是一种通过钙低渗溶液制备的，易于吸收DNA的特定状态的常用细菌细胞。其适宜于原核或真核生物基因组DNA导入、大质粒转染、噬菌体表面展示技术、重组DNA实验、构建cDNA库等。产品即到即用，性能稳定，操作方便，电转状态恒定，转染效率高，可达 3 X 109转化菌/ 微克pUC19。

技术背景

细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态。钙转感受态细菌DH10B细胞是根据Hanahan的技术方法制备的。其基因型为F- mcrA 人 (mrr－hsdRMS－mcrBC) φ80人lacZ 人M15 人lacX74 recA1 endA1 araD139 人 (ara，leu) 7697 galU galK λ －rpsL nupG ，可以在Bluo－gal或X－gal琼脂平板上进行蓝白斑筛选；其含有recA1和endA1突变，而确保质粒中外源基因片断插入稳定，改善质粒DNA提取的质量。其转化效率为1.0 X 106至3.0 X 109转化菌/微克pUC19。

产品内容

DH10B 菌液

产品说明书

保存方式

保存在－70℃冰箱里，避免反复冻融，有效保证 6 月

用户自备

SOC 培养液：用于转化菌的复苏培养(G&VS12002)

琼脂平板：用于转化菌的筛选

恒温水槽：用于转化热击

恒温摇床：用于转化细菌的复苏培养

转化步骤

实验开始前，将恒温水槽设置为 42℃；同时准备好含有筛选抗性试剂(例如 100 微克/毫升氨苄青霉素) 的 LB 琼脂平板。然后进行下列操作。

1 ．从－70℃冰箱里取出 1 管(xx 微升) DH10B 菌液

2 ．置于冰槽里融化

3 ．加入 1 微升(1 至 10 纳克总量) DNA

4 ．用枪头轻轻搅动细胞

5 ．放进冰槽里孵育 30 分钟

6 ．即刻放进 42℃恒温水槽孵育 2 分钟

7 ．即刻放回冰槽孵育 2 分钟

8 ．加入 800 微升室温预热的 SOC 培养液

9 ．放进 37℃摇床孵育 60 分钟，速度为 220RPM

10．移取 100 微升到 1.5 毫升离心管

11．加入 900 微升室温预热的 SOC 培养液稀释(1：100)

12．移取 100 微升稀释菌液到 LB 琼脂平板

13．使用铺板棒轻轻均匀铺板

14．室温下静置 15 分钟

15．倒置琼脂平板

16．放进 37℃培养箱孵育 24 小时

17．其余的菌液保存在－80℃冰箱里备用

注意事项

1 ．本产品为总量 1 毫升钙转感受态菌，严格保存在－70℃冰箱里

2 ．只允许冻融 1 次，否则转染效率 2 倍下降

3 ．操作时，须戴手套

4 ．可以使用 100 微升(二分之一管) DH10B 菌液

5 ．未用完的感受态细胞，即刻放回－70℃冰箱保存

6 ．建议转染后，使用 SOC 培养液复苏培养，否则转染效率 2 至 3 倍下降

7 ．铺板容量和稀释倍数，用户可以根据具体情况调整

8 ．建议使用纯化的 DNA，避免带有酚、乙醇、蛋白和去垢剂

9 ．使用 pUC19 对照培养板计算转化效率(CFU/微克)：

【CFU (对照组) ÷皮克pUC19】X 【1 X 106皮克/微克 X (细菌总容量，毫升÷铺板容量，毫升) X 稀释倍数】例如： 10 皮克 pUC19 ，1 毫升菌量， 1 ：100 稀释，铺板 50 微升，产生 50 菌落：

CFU/微克＝【50CFU÷10 皮克】 X【1 X 106皮克/微克 X (1÷0.05) X100】＝1.0 X 1010 10．本公司提供系列感受态菌产品

质量标准

1 ．本产品经鉴定性能稳定

2 ．本产品经鉴定转染效率高

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK，RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

产品编号	名称	规格
G&VS60001	电转感受态细菌制备试剂盒	1 次
G&VS60002	钙转感受态细菌制备试剂盒	1 次
G&VS60068	细菌电转试剂盒	20 次
G&VS60015	细菌钙转试剂盒	20 次
G&VS12192. 1	DH5α细菌	1 毫升
G&VS12192.2	DH5α钙转感受态细菌	10 X 200 微升
G&VS12192.3	DH5α电转感受态细菌	10 X 100 微升
G&VS12030. 1	DH10B 细菌	1 毫升
G&VS12030.2	DH10B 钙转感受态细菌	5 X 200 微升
G&VS12030.3	DH10B 电转感受态细菌	5 X 100 微升
G&VS12204. 1	G&VS10 细菌	1 毫升
G&VS12204.2	G&VS10 甲基化基因钙转感受态细菌	10 X 100 微升
G&VS12204.3	G&VS10 甲基化基因电转感受态细菌	5 X100 微升
G&VS12205. 1	BJ5183 细菌	1 毫升
G&VS12205.2	BJ5183 钙转感受态细菌	5 X 100 微升
G&VS12205.3	BJ5183 电转感受态细菌	5 X 100 微升
G&VS12223. 1	BJ5183 腺病毒载体钙转感受态细菌	1 X 100 微升
G&VS12223.2	BJ5183 腺病毒载体电转感受态细菌	1 X 100 微升
G&VS12224. 1	TOP10 细菌	1 毫升
G&VS12224.2	TOP10 钙转感受态细菌	5 X 200 微升
G&VS12224.3	TOP10 电转感受态细菌	5 X 100 微升
G&VS12231	G&VS15 重组腺病毒载体繁殖超级化学感受态细菌	5 X 100 微升