当前位置:首页>技术专栏
发布时间:2026/9/17 14:06:51 阅读次数:5
裂解液II:细胞裂解液产品说明书
主要用途
裂解液 II:细胞裂解液(活性化细胞蛋白制备处理) 是一种旨在通过使用化学方法快速充分裂解 细胞, 并在蛋白酶抑制混合剂的帮助下,通过超速离心,收集所有细胞内可溶性蛋白质的权威而经典的技 术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞(动物、人体) 等样品。 产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,裂解效果显著。
技术背景
通过特殊裂解液和蛋白酶抑制混合剂可以防止裂解后细胞内各种活性蛋白成分遭到活化的内源性蛋白酶的 破坏,充分保留细胞内蛋白质的免疫和生物学活性。
产品内容
裂解液(Reagent A)
产品说明书
保存方式
保存在-20℃冰箱里, 避免反复冻融,有效保证 6 月
用户自备
PBS 缓冲溶液(G&VS12033):用于清洗待测细胞样品
1.5 毫升离心管:用于贴壁细胞裂解操作的容器
15 毫升锥形离心管:用于悬浮细胞裂解操作的容器
(微型)台式离心机:用于细胞蛋白操作
实验步骤
方法一:贴壁细胞活性化细胞蛋白质制备
1 . 准备 1 个 25cm2细胞培养瓶的细胞(5 X 106细胞)
2 . 小心抽去 25cm2细胞培养瓶里的培养液
3 . 加入 xx 毫升用户自备的 PBS 缓冲溶液,清洗生长中的细胞表面
4 . 小心抽去清洗液
5 . 加入 xx 微升 裂解液(Reagent A),确保铺满整个培养平面
6 . 即刻使用细胞刮脱棒刮脱细胞
7 . 用 xx 微升枪头移出细胞液到预冷的无菌 1.5 毫升离心管
8 . 强力涡旋震荡 15 秒
9 . 放进冰槽里孵育 30 分钟,期间每 10 分钟强力涡旋震荡 15 秒一次
10.(选择步骤)如暂时停止,放进-70℃冰箱里储存备用
11.(选择步骤)如继续操作,放进冰槽里继续
12.即刻放进 4℃微型台式离心机离心 10 分钟, 速度为 16000g (或 13000RPM,例如 eppendorf 5415D)
13.小心移取上清液到新的 1.5 毫升离心管
14.放进-70℃的冰箱里备用
15.或放进冰槽里,继续后续(西方杂交、免疫沉淀、酶活性检测等)操作
方法二:悬浮细胞活性化细胞蛋白质制备
1 . 移入待测的悬浮细胞液(5 X 106细胞)到 15 毫升锥形离心管
2 . 放进 4℃台式离心机离心 5 分钟,速度为 300g
3 . 小心抽去上清液
4 . 加入 5 毫升用户自备的 PBS 缓冲溶液,用移液管混匀细胞颗粒群
5 . 放进 4℃台式离心机离心 5 分钟,速度为 300g
6 . 小心抽去上清液
7 . 加入 xx 微升 裂解液(Reagent A)
8 . 强力涡旋震荡 15 秒,充分混匀
9 . 放进冰槽里孵育 30 分钟,期间每 10 分钟强力涡旋震荡 15 秒一次
10.用 1000 微升枪头移出细胞液到无菌的 1.5 毫升离心管
11.(选择步骤)如暂时停止,放进-70℃冰箱里储存备用
12.(选择步骤)如继续操作,放进冰槽里继续
13.即刻放进 4℃微型台式离心机离心 10 分钟, 速度为 16000g (或 13000RPM,例如 eppendorf 5415D)
14.小心移取上清液到新的 1.5 毫升离心管
15.放进-70℃的冰箱里备用
16.或放进冰槽里,继续后续(西方杂交、免疫沉淀、酶活性检测等)操作
注意事项
1. 本产品为 10 毫升规格, 20 次操作
2. 待测细胞样品为 5 X 106细胞,约 100 毫克细胞重量
3. 根据细胞量的不同,按比例调整试剂用量
4. 所有操作均须在 4℃状态下进行
5. 可以使用胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液处理贴壁细胞,然后按照方法二继续
6. 建议 裂解液(Reagent A) 适量分装储存
7. 如果放在-70℃冰箱里储存备用,避免反复冻融
8. 本公司提供系列裂解试剂产品
质量标准
1 . 本产品经鉴定性能稳定
2 . 本产品经鉴定无核酶和蛋白酶污染
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后, 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证 说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告) 与本公司联系,并将该产品退回, 经检验确系产品质量所致, 本公司负责更换产品。如系使用者错误操作 所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK , RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 用途 | 规格 |
|
G&VS12032 |
蛋白酶抑制剂混合液 | 保留细胞内成分活性 A 、 动物细胞 B 、 细菌 C 、 酵母菌 D 、 植物 |
100 微升 (1000 倍) |
| G&VS12101 | 磷酸酶抑制剂混合液 | 抑制磷酸化酶活性 | 1 毫升 (100 倍) |
| G&VS12102 | 蛋白酶/磷酸酶 完全抑制混合液 | 抑制蛋白破坏性生物酶活性 | 100 微升 |
| G&VS12054. 1 | 裂解液Ⅰ | 制备活性化亚细胞结构 | 20 次 |
| G&VS12054.2 | 裂解液Ⅱ | 制备活性化细胞蛋白 | 20 次 |
| G&VS12054.3 | 裂解液Ⅲ | 各种活性化细胞制备处理 | 20 次 |
| G&VS12054.4 | 裂解液Ⅳ | 不确保细胞内活性的成分制备 | 100 次 |
| G&VS12031 | 裂解液Ⅴ | 红细胞裂解液/白细胞分离 | 500 毫升 |
| G&VS12055 | 裂解液Ⅵ | 线粒体裂解液 | 20 次 |
| G&VS12056 | 裂解液Ⅶ | 细菌裂解液 | 50 次 |
| G&VS12060 | 裂解液Ⅷ | 细菌活性化蛋白制备 | 20 次 |
| G&VS12061 | 裂解液Ⅸ | 真菌/酵母细胞裂解液 | 50 次 |
| G&VS12062 | 裂解液Ⅹ | 真菌/酵母细胞活性化蛋白制备 | 20 次 |
| G&VS12280 | 裂解液ⅩI | 非变性细胞蛋白制备 | 20 次 |
| G&VS12057 | 10%AEBSF 溶液 | 完全保留细胞内成分活性 | 100 微升 |
上海极威生物科技有限公司 公司地址:上海市崇明县长兴镇潘园公路1800号2号楼9703室
邮箱:435399850@qq.com 电话:021-80186165 手机:16602115336
备案号:沪ICP备15046135号-7


