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裂解液III:细胞裂解液产品说明书

发布时间:2026/9/17 14:07:18      阅读次数:5

 

解液III:细胞裂解液产品说明书

 

要用途

裂解液 III:细胞裂解液(各种活性化细胞成分制备处理)是一种旨在通过非离子性和双重极性 去垢剂等化学裂解处理, 通过差速离心,收集所有细胞内可溶性成分的权威而经典的技术方法。该技术由 大师级学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞(动物、人体)等样品。产品严格无菌,即 到即用,操作简捷,性能稳定,裂解效果显著。

术背景

通过非离子性和双重极性去垢裂解系统,使细胞膜结构破坏, 充分保留细胞内生物学成分,同时在蛋白酶 抑制混合剂的帮助下,充分保留细胞内成分活性。

产品内容


裂解液(Reagent A)

品说明书

 

保存方式

存在-20℃冰箱里,  避免反复冻融,有效保证 6 月

 

用户自备

PBS 缓冲溶液(G&VS12033):用于清洗待测细胞样

1.5 毫升离心管:用于贴壁细胞裂解操作的容

15 毫升锥形离心管:用于悬浮细胞裂解操作的容器

()台式离心机:用于细胞样品操作

 

实验步骤

法一:贴壁细胞裂解处理

1  准备 1 25cm2细胞培养瓶的细胞(约 5 X 106细胞)

2   小心抽去 25cm2细胞培养瓶里的培养液

3   加入 5 毫升用户自备的 PBS 缓冲溶液,清洗生长中的细胞表面

4  小心抽去 5 毫升 PBS 缓冲溶液

5  加入 xx 微升 裂解液(Reagent A),确保铺满整个培养平面

6  即刻使用细胞刮脱棒刮脱细

7    1000 微升枪头移出细胞液到预冷的无菌 1.5 毫升离心管

8   强力涡旋震荡 15

9  置入冰槽里孵育 30 分钟,期间每 10 分钟强力涡旋震荡 15 秒一次

10(选择步骤)如暂时停止,放进-70℃冰箱里储存备用

11(选择步骤)如需后续操作,置入冰槽里继续

12.即刻放进 4℃微型台式离心机离心 10 分钟, 速度为 1000g  (或 3500RPM,例如 eppendorf 5415D)

13.小心移取上清液到新的 1.5 毫升离心

14.放入-70℃的冰箱里备用

15.或放进冰槽里,继续各种后续操作(核分离、胞浆分离、总蛋白分离、细胞器分离等)

 

法二:悬浮细胞裂解处理

1  移入待测的悬浮细胞液(约 5 X 106细胞) 15 毫升锥形离心管

2  放进 4℃台式离心机离心 5 分钟,速度为 300g

3   小心抽去上清液

4  加入 5 毫升用户自备的 PBS 缓冲溶液,用移液管混匀细胞颗粒群

5  放进 4℃台式离心机离心 5 分钟,速度为 300g

6   小心抽去上清液

7   加入 xx 微升 裂解液(Reagent A)

8   强力涡旋震荡 15 秒,充分混匀

9  置入冰槽里孵育 30 分钟,期间每 10 分钟强力涡旋震荡 15 秒一次

10.用 1000 微升枪头移出细胞液到无菌的 1.5 毫升离心管

11(选择步骤)如暂时停止,放进-70℃冰箱里储存备用

12(选择步骤)如需后续操作,置入冰槽里继续

13.即刻放进 4℃微型台式离心机离心 10 分钟, 速度为 1000g  (或 3500RPM,例如 eppendorf 5415D)

14.小心移取上清液到新的 1.5 毫升离心

15.放入-70℃的冰箱里备用

16.或放进冰槽里,继续各种后续操作(核分离、胞浆分离、总蛋白分离、细胞器分离等)

 

注意事

1  本产品为 10 毫升规格, 20 次操作

2.  待测细胞样品为 5 X 106细胞,约 100 毫克细胞重量

3.  根据细胞量的不同,按比例调整试剂用量

4  所有操作均须在无菌和 4℃状态下进行

5.  可以使用胰蛋白酶乙胺四乙酸混合液处理贴壁细胞,然后按照方法二继续

6.  建议 裂解液(Reagent A) 适量分装储存

7.  通过差速离心获得各种活性化细胞成

8. 如果放在-70℃冰箱里储存备用,避免反复冻融

9.  本公司提供系列裂解试剂产品

 

质量标

1   本产品经鉴定性能稳定

2  本产品经鉴定无核酶和蛋白酶污


使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后, 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证 说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告) 与本公司联,并将该产品退回, 经检验确系产品质量所致, 本公司负责更换产品。如系使用者错误操作 所致,本公司不承担由此造成的损失。

情提醒

IF IT DOESN’T WORK   RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

订购信息

 

品编号

品名称

规格

 

 

G&VS12032

 

 

蛋白酶抑制剂混合液

保留细胞内成分活性

A  动物细胞

B  细菌

C   酵母菌

D  植物

 

100 微升 (1000 )

G&VS12101

磷酸酶抑制剂混合液

抑制磷酸化酶活

1 毫升

(100 )

G&VS12102

蛋白酶/磷酸

全抑制混合液

抑制蛋白破坏性生物酶活性

100 微升

G&VS12054. 1

裂解

制备活性化亚细胞结构

20

G&VS12054.2

裂解

制备活性化细胞蛋白

20

G&VS12054.3

裂解

各种活性化细胞制备处理

20

G&VS12054.4

裂解

不确保细胞内活性的成分制备

100

G&VS12031

裂解

红细胞裂解液/白细胞分

500 毫升

G&VS12055

裂解

线粒体裂解液

20

G&VS12056

裂解

细菌裂解液

50 

G&VS12060

裂解

细菌活性化蛋白制备

20

G&VS12061

裂解

真菌/酵母细胞裂解液

50 

G&VS12062

裂解

真菌/酵母细胞活性化蛋白制备

20

G&VS12280

裂解液I

非变性细胞蛋白制备

20

G&VS12057

10AEBSF 溶液

完全保留细胞内成分活性

100 微升

 

 


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