当前位置:首页>技术专栏
发布时间:2026/9/20 17:43:58 阅读次数:3
一步法荧光定量 PCR 反应液产品说明书
主要用途
一步法荧光定量 PCR 反应液是一种旨在运用 SYBR 绿色荧光染料作为标记信号,既方便、快速 地进行各种 DNA 模板的扩增,又实时检测和定量分析扩增产物的一步反应体系。广泛运用在核酸定量、 基因拷贝数分析、单核苷酸多态性(SNP)分析、基因型分析、 RNA 变异分析等。产品即到即用, 无核酶 污染,性能稳定,操作方便迅速,定量准确,重复性强,效果满意,质量保证。
技术背景
该反应液是由大师级科学家精心研制、成功实验证明的热启动高保真 PCR 反应体系。灵敏度、特异性、稳 定性优势明显, 无需制备特异性荧光探针, 无需调整镁离子浓度, 无需担心扩增质量, 无需担心反应失败。 扩增产量高,质量优异。
产品内容
反应液(Reagent A)
染色液(Reagent B)
补充液(Reagent C)
封隔液(Reagent D)
产品说明书
保存方式
保存在-20℃冰箱里, 染色液(Reagent B)避免光照,有效保证 6 个月
用户自备
PCR 管:用于样品操作的容器
荧光定量 PCR 仪:用于荧光定量 PCR 反应
实验提示
1 . 一次反应总量为 50 微升
2 . 移取 xx 微升 反应液(Reagent A) 到 0.5 毫升 PCR 管
3 . 加入用户自备的引物 A 和 B (分别总量为 350 纳克)
4 . 加入待测的 DNA 模板(总量为 100 纳克)
5 . 加入 xx 微升 染色液(Reagent B)
6 . 加入 补充液(Reagent C) 到总量 50 微升
7 . 放进 4℃微型台式离心机瞬时离心 5 秒
8 . 使用 1000 微升枪头加入 xx 滴 封隔液(Reagent D) (注意: 参见注意事项6)
9 . 放进 PCR 仪
10 .PCR 反应程序为:
| 温度(℃) | 时间 | 循环 |
| 95 | 2 分钟 | 1 |
| 95 Tm 用户设定温度(50-62) 72 | 30 秒 1 分钟 30 秒 |
35 |
| 72 | 5 分钟 | 1 |
11.采集数据,进行溶解曲线分析
12 .PCR 产物置于-20℃保存备用
13.或进行琼脂糖凝胶电泳分析 PCR 产物的特异性
注意事项
1 . 本产品为 20 次 PCR 反应
2 . 可用于各种双链 DNA 模板的定量扩增
3 . 适合各种荧光定量 PCR 仪
4 . 建议整个操作在 4℃下进行
5 . 建议使用洁净的 PCR 管和带有滤芯的枪头,以免污染
6 . 根据用户 PCR 仪的性能,决定是否加入 封隔液(Reagent D)
7 . 配制完成后,即刻进行扩增反应,以确保反应物的活性
8 . Tm=4(G+C)+2(A+T),用户可以测试最佳 Tm 温度。扩增片段 3kb 以上可以增加时间到 2 分钟
9 . 对于基因组 DNA 的扩增,其循环延长时间为 30 秒至 3 分钟,即小于 500bp-30 秒;小于 2kb-1 分 钟;大于 2kb,每增加 1kb,增加 1 分钟
10.避免反复冻融
11 .PCR 扩增反应的最初 3 个循环为定量基线; 3 至 15 个循环的荧光信号的 10 倍值为荧光阈值;荧光信 号达到阈值所需的循环数为 CT 值
12.通过已知拷贝数的标准样品建立标准曲线:横座标为起始拷贝数对数,纵座标为 CT 值
13.本公司提供 PCR 系列产品
质量标准
1 . 本产品经鉴定性能稳定
2 . 本产品经鉴定无核酶污染
3 . 本产品经鉴定反应产量高
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后, 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证 说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告) 与本公司联系,并将该产品退回, 经检验确系产品质量所致, 本公司负责更换产品。如系使用者错误操作 所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK , RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
| 编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS12113 | 一步法荧光定量 PCR 反应液 | 20 次 |
| G&VS12113A | 反应液(Reagent A) | 10 毫升 |
| G&VS12113B | 染色液(Reagent B) | 1 毫升 |
| G&VS12113C | 补充液(Reagent C) | 10 毫升 |
| G&VS12113D | 封隔液(Reagent D) | 5 毫升 |
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS12008. 1 | 10 倍 PCR 完全缓冲液 | 100 次 |
| G&VS12008.2 | 一步法 PCR 反应液 | 50 次 |
| G&VS12008.3 | 超白金 TAG DNA 聚合酶 | 200 U |
| G&VS12008.4 | 三磷酸脱氧核糖核苷酸(dNTPs)混合液 | 2.5 或 10mM/毫升 |
| G&VS12008.5 | 一步法平端 PCR 反应液 | 50 次 |
| G&VS12113 | 一步法荧光定量 PCR 反应液 | 50 次 |
| G&VS20024.2 | 基因甲基化特异性 PCR 扩增(MSP)试剂盒 | 60 次 |
上海极威生物科技有限公司 公司地址:上海市崇明县长兴镇潘园公路1800号2号楼9703室
邮箱:435399850@qq.com 电话:021-80186165 手机:16602115336
备案号:沪ICP备15046135号-7


