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(猪)卵母细胞体外成熟(in vitro maturation;IVM)培养液产品说明书

发布时间:2026/9/28 10:20:29      阅读次数:28

 

(猪)卵母细胞体外成熟(in vitro maturation;IVM)培养液产品说明书

 

 

主要用途

(猪)卵母细胞体外成熟(in vitro maturation;IVM)培养液是一种旨在帮助新鲜卵母细胞在体外环境下,获得完全成熟的基础培养介质。其适合于家畜猪的卵母细胞的培养。该技术经过精心研制、成功实验证明的。产品严格无菌,即到即用,性能稳定,无病毒和支原体,帮助卵母细胞完全成熟高达90%以上。

 

技术背景

体外生育技术(in vitro production;IVP)包括三大步骤:卵母细胞体外成熟(in vitro maturation)、体外受精(in vitro fertilization;IVF)和体外培养(in vitro culture;IVC)。运用体外系统产生胚胎,可以解决不育的问题。而动物胚胎的产生,可以提供胚胎干细胞、器官移植等。其中猪是许多生物医学研究的重要模式动物。确保胚胎的发育和质量,卵母细胞的体外成熟是最基础的步骤。发育能力的降低主要在于卵母细胞的不完全成熟和多精子穿透性(polyspermic penetration)过高。因此使用化学性精制培养液,可以避免使用成分不明确和不稳定的血清和卵泡液(follicle fluid;FF),在半胱氨酸(cysteine)等的存在下,帮助精子穿透后精核(male pronucleus;MPN)的形成和胚胎发育。此外通过使用已知的性腺激素,促进卵母细胞完全成熟。

 

产品内容

培养液(Reagent A) 毫升

产品说明书                 1份

 

保存方式

保存在-20℃的冰箱里,有效保证6月

 

用户自备

35mm细胞培养皿:用于样品操作的容器

4℃微型台式离心机:用于样品操作

细胞培养箱:用于卵母细胞培养

 

实验步骤

实验开始前,将试剂盒里的培养液(Reagent A)从-20℃的冰箱里取出,置于39℃培养箱里均衡温度。然后进行下列操作。

1. 准备好新鲜切除的动物卵巢组织

2. 在4小时内,从3至6毫米大小的卵泡中吸出卵丘卵母细胞复合体(cumulus oocyte complexes;COC)

3. 使用卵母细胞清理液清洗3次(注意:建议使用卵母细胞清理液-G&VS14009.3)

4. 滴入xx微升培养液(Reagent A)到35mm细胞培养皿中预热的矿物液(mineral oil)中

5. 加入5微升生长因子(注意:建议使用卵母细胞体外成熟(in vitro maturation;IVM)培养生长因子-G&VS14009.4)

6. 转移20个COC到培养皿中的培养液里

7. 放进5%CO2细胞培养箱孵育22小时,温度39℃,湿度饱和

8. 移取COC,使用培养液(Reagent A)清洗3次

9. 再次滴入xx微升培养液(Reagent A)到35mm细胞培养皿中预热的矿物液(mineral oil)中

10. 转移20个COC到培养皿中的培养液里

11. 放进5%CO2细胞培养箱继续孵育22小时,温度39℃,湿度饱和

12. (选择步骤)评价卵丘扩展(cumulus expansion)和细胞成熟状况(注意:建议使用卵母细胞核成熟苔红素(orcein)荧光染色分析试剂盒-G&VS14025)

13. (选择步骤)移取COC,分离卵母细胞

14. (选择步骤)继续后续体外受精

15. 期待结果参考:

 

时间

卵母细胞百分率(%)

Germinal Vesicle

18至24小时

100

Metaphase I

24小时

90

Anaphase I-Telophase I

30小时

60

Metaphase II

36至48小时

90

Penetration

 

80

Male Pronuleus Formation

 

60

Cleavage

 

70

Blastocyst

7天

30

 

注意事项

1. 本产品为100毫升规格

2. 操作时,须带手套

3. 建议使用西曲溴铵溶液进行卵巢的消毒防腐处理(注意:建议使用新鲜卵卵巢组织消毒液-G&VS14009.6)

4. 本产品适用于猪的卵母细胞成熟培养

5. 所有操作和使用工具均须在严格无菌状态下进行

6. 操作时,避免污染母液

7. 一个培养皿可以多点培养;每点可以多达100 COC/500微升

8. 本公司提供系列发育生物学试剂产品
  

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定无病毒和支原体污染

3. 本产品经鉴定促进卵母细胞成熟高达90%以上 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

 

订购信息

单组分订购信息

编号           名称                 规格

G&VS14009.1   (猪)卵母细胞体外成熟培养液   毫升

G&VS14009.1A  培养液(Reagent A)          毫升

 

试剂盒订购信息

产品编号

名称

规格

G&VS14009.1

(种系)体外卵母细胞成熟(in vitro maturation;IVM)培养液

100毫升

G&VS14009.2

卵母细胞冻存试剂盒

50次

G&VS14009.3

卵母细胞清理液

100毫升

G&VS14009.4

(种系)体外卵母细胞成熟(in vitro maturation;IVM)培养生长因子(20倍)

1毫升

G&VS14009.5

成熟卵母细胞清理液

100毫升

G&VS14009.6

新鲜卵卵巢组织消毒液

100毫升

G&VS14025

卵母细胞核成熟苔红素(orcein)荧光染色分析试剂盒

20次

G&VS14010

体外受精(in vitro fertilization IVF)细胞培养液

50毫升

G&VS14011

胚胎组织细胞培养液

500毫升

 

 


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