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发布时间:2026/9/28 10:20:29 阅读次数:28
(猪)卵母细胞体外成熟(in vitro maturation;IVM)培养液产品说明书
主要用途
(猪)卵母细胞体外成熟(in vitro maturation;IVM)培养液是一种旨在帮助新鲜卵母细胞在体外环境下,获得完全成熟的基础培养介质。其适合于家畜猪的卵母细胞的培养。该技术经过精心研制、成功实验证明的。产品严格无菌,即到即用,性能稳定,无病毒和支原体,帮助卵母细胞完全成熟高达90%以上。
技术背景
体外生育技术(in vitro production;IVP)包括三大步骤:卵母细胞体外成熟(in vitro maturation)、体外受精(in vitro fertilization;IVF)和体外培养(in vitro culture;IVC)。运用体外系统产生胚胎,可以解决不育的问题。而动物胚胎的产生,可以提供胚胎干细胞、器官移植等。其中猪是许多生物医学研究的重要模式动物。确保胚胎的发育和质量,卵母细胞的体外成熟是最基础的步骤。发育能力的降低主要在于卵母细胞的不完全成熟和多精子穿透性(polyspermic penetration)过高。因此使用化学性精制培养液,可以避免使用成分不明确和不稳定的血清和卵泡液(follicle fluid;FF),在半胱氨酸(cysteine)等的存在下,帮助精子穿透后精核(male pronucleus;MPN)的形成和胚胎发育。此外通过使用已知的性腺激素,促进卵母细胞完全成熟。
产品内容
培养液(Reagent A) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃的冰箱里,有效保证6月
用户自备
35mm细胞培养皿:用于样品操作的容器
4℃微型台式离心机:用于样品操作
细胞培养箱:用于卵母细胞培养
实验步骤
实验开始前,将试剂盒里的培养液(Reagent A)从-20℃的冰箱里取出,置于39℃培养箱里均衡温度。然后进行下列操作。
1. 准备好新鲜切除的动物卵巢组织
2. 在4小时内,从3至6毫米大小的卵泡中吸出卵丘卵母细胞复合体(cumulus oocyte complexes;COC)
3. 使用卵母细胞清理液清洗3次(注意:建议使用卵母细胞清理液-G&VS14009.3)
4. 滴入xx微升培养液(Reagent A)到35mm细胞培养皿中预热的矿物液(mineral oil)中
5. 加入5微升生长因子(注意:建议使用卵母细胞体外成熟(in vitro maturation;IVM)培养生长因子-G&VS14009.4)
6. 转移20个COC到培养皿中的培养液里
7. 放进5%CO2细胞培养箱孵育22小时,温度39℃,湿度饱和
8. 移取COC,使用培养液(Reagent A)清洗3次
9. 再次滴入xx微升培养液(Reagent A)到35mm细胞培养皿中预热的矿物液(mineral oil)中
10. 转移20个COC到培养皿中的培养液里
11. 放进5%CO2细胞培养箱继续孵育22小时,温度39℃,湿度饱和
12. (选择步骤)评价卵丘扩展(cumulus expansion)和细胞成熟状况(注意:建议使用卵母细胞核成熟苔红素(orcein)荧光染色分析试剂盒-G&VS14025)
13. (选择步骤)移取COC,分离卵母细胞
14. (选择步骤)继续后续体外受精
15. 期待结果参考:
|
| 时间 | 卵母细胞百分率(%) |
| Germinal Vesicle | 18至24小时 | 100 |
| Metaphase I | 24小时 | 90 |
| Anaphase I-Telophase I | 30小时 | 60 |
| Metaphase II | 36至48小时 | 90 |
| Penetration |
| 80 |
| Male Pronuleus Formation |
| 60 |
| Cleavage |
| 70 |
| Blastocyst | 7天 | 30 |
注意事项
1. 本产品为100毫升规格
2. 操作时,须带手套
3. 建议使用西曲溴铵溶液进行卵巢的消毒防腐处理(注意:建议使用新鲜卵卵巢组织消毒液-G&VS14009.6)
4. 本产品适用于猪的卵母细胞成熟培养
5. 所有操作和使用工具均须在严格无菌状态下进行
6. 操作时,避免污染母液
7. 一个培养皿可以多点培养;每点可以多达100 COC/500微升
8. 本公司提供系列发育生物学试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定无病毒和支原体污染
3. 本产品经鉴定促进卵母细胞成熟高达90%以上
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS14009.1 (猪)卵母细胞体外成熟培养液 毫升
G&VS14009.1A 培养液(Reagent A) 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS14009.1 | (种系)体外卵母细胞成熟(in vitro maturation;IVM)培养液 | 100毫升 |
| G&VS14009.2 | 卵母细胞冻存试剂盒 | 50次 |
| G&VS14009.3 | 卵母细胞清理液 | 100毫升 |
| G&VS14009.4 | (种系)体外卵母细胞成熟(in vitro maturation;IVM)培养生长因子(20倍) | 1毫升 |
| G&VS14009.5 | 成熟卵母细胞清理液 | 100毫升 |
| G&VS14009.6 | 新鲜卵卵巢组织消毒液 | 100毫升 |
| G&VS14025 | 卵母细胞核成熟苔红素(orcein)荧光染色分析试剂盒 | 20次 |
| G&VS14010 | 体外受精(in vitro fertilization IVF)细胞培养液 | 50毫升 |
| G&VS14011 | 胚胎组织细胞培养液 | 500毫升 |
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