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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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精子细胞总丙二醛（MDA）浓度比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间：2026/9/28 10:44:41 阅读次数：36

精子细胞总丙二醛（MDA）浓度比色法定量检测试剂盒产品说明书

主要用途

精子细胞总丙二醛（MDA）浓度比色法定量检测试剂是一种旨在通过TBARS（硫代巴比妥酸反应物）技术，检测与之反应的丙二醛，其产物丙二醛双硫代巴比妥酸加合物，在分光光度仪下，检测其吸光峰值的变化，即采用比色法测定精子细胞样品中总丙二醛含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物和人体精子细胞样品中丙二醛的含量检测。广泛用于细胞氧化应急研究，特别是脂质过氧化的分析。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，重复性好。

技术背景

脂质过氧化反应（lipid peroxidation；LPO）是动物和植物细胞损伤的一种机制，也是评价细胞和组织氧化应急的标志。含有两个或以上双键（double bond）的多不饱和脂肪酸（Polyunsaturated Fatty Acid）对自由基以及其它活性氧化族高度敏感，导致产生脂质过氧自由基LOO^＋（lipid peroxyl radical），使脂类氧化（lipid oxidation）。脂质过氧化自由基LOO^＋同时通过攻击分子内双键，经环化、裂解形成环状内过氧化物（cyclic endoperoxide），例如丙二醛（malondialdehyde；MDA）。作为脂质过氧化性低分子量终端产物之一的丙二醛，广泛用于脂质过氧化反应的指标。在男科学中，丙二醛指标可用于分析男性不育的病因。在丁羟甲苯（Butylated Hydroxytoluene；BHT）和EDTA的参与帮助减少干扰性脂类氧化的情况下，丙二醛与硫代巴比妥酸（thiobarbituric acid；TBA）进行反应，产生丙二醛双硫代巴比妥酸加合物（MDA-TBA2），通过分光光度仪（532nm波长）来定量分析丙二醛的含量，其反应方式为：

产品内容

缓冲液（Reagent A）毫升

裂解液（Reagent B）毫升

抗干扰液（Reagent C）毫升

萃取液（Reagent D）毫升

反应液（Reagent E）管

补充液（Reagent F）毫升

稀释液（Reagent G）毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存在4℃冰箱里，抗干扰液（Reagent C）和反应液（Reagent E）避免光照，并密封；萃取液（Reagent D）具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证6月

用户自备

15毫升锥形离心管：用于制备样品的容器

1.5毫升离心管：用于制备样品和样品反应的容器

细胞刮脱棒：用于脱落培养细胞

超声仪：用于裂解细胞的仪器

（微型）台式离心机：用于样品收集、澄清

恒温水槽：用于反应孵育

96孔板：用于比色的容器

酶标仪：用于样品比色分析

实验步骤

实验开始前，将试剂盒中的反应液（Reagent E）置入冰槽里。移取xx微升稀释液（Reagent G）到 反应液（Reagent E）管里，涡旋混匀，标记为反应工作液（10次操作量）。同时设定好酶标仪（温度为25℃）：波长532nm。然后进行下列操作。

一、样品准备

1．移取2毫升新鲜收集（1小时内）的精液到15毫升锥形离心管

2．放进37℃培养箱孵育20分钟

3．放进台式离心机离心5分钟，速度为700g

4．小心抽去上清液

5．加入xx毫升缓冲液（Reagent A），混匀精子细胞颗粒群

6．放进台式离心机离心5分钟，速度为700g

7．小心抽去上清液

8．重复实验步骤5至7二次

9．加入适量的缓冲液（Reagent A）

10．充分混匀后，在血细胞计数器上进行精子细胞计数

11．调整精子细胞数为1 X 10⁹/毫升

12．移取1毫升精子细胞到新的1.5毫升离心管

13．放进微型台式离心机离心5分钟，速度为700g

14．小心抽去上清液

15．加入xx微升裂解液（Reagent B）

16．强力涡旋震荡15秒

17．置于超声仪下超声处理：功率200瓦，50％，20秒一次，冰上间隔20秒，重复5次

18．（选择步骤）或放进DOUNCE匀浆器匀浆5分钟

19．即刻放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为16000g

20．小心移取上清液到新的1.5毫升离心管

21．（选择步骤）移取10微升进行蛋白定量测定，并调整蛋白浓度为20至50毫克/毫升（注意：建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）

22．即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作

二、比色测定

1．准备10个1.5毫升离心管，并做好相应标记：背景对照和样品

2．分别移取xx微升缓冲液（Reagent A）

3．分别加入xx微升抗干扰液（Reagent C）

4．分别加入xx微升补充液（Reagent F）或待测样品（注意：总量为1至2毫克总蛋白）

5．用枪头混匀

6．分别加入xx微升萃取液（Reagent D）

7．用枪头混匀

8．分别加入xx微升反应工作液

9．盖上盖子，上下倾倒数次，混匀

10．放进60℃恒温水槽，孵育60分钟

11．放进冰槽里冷却2分钟

12．放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为10000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）

13．分别移取250微升上清液到96孔板的相应孔里（注意：上清须澄清）

14．放进酶标仪检测

15．样品实际读数：（样品读数－背景对照读数）

三、计算样品总浓度

注意事项

1．本产品为50次（96孔板）操作

2．操作时，须戴手套

3． 萃取液（Reagent D）具有腐蚀性，注意操作安全

4． 反应液（Reagent E）为固体，避免在室温下放置；配制后，有效期1周

5． 抗干扰液（Reagent C）和反应液（Reagent E）避免光照，并密封

6．本产品检测敏感度可达0.05微摩尔丙二醛

7． 50微摩尔的过氧化氢会干扰检测（使丙二醛减少13％）；而蔗糖和果糖则不影响检测

8．如果样品含有过高的蛋白成分，建议进行样品去蛋白处理

9．可以使用煮沸10分钟替代60℃孵育反应 60分钟

10．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度

11．正常样品的丙二醛浓度相当低，约在皮摩尔水平，即10至100皮摩尔/毫克蛋白

12．本公司提供系列丙二醛检测试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定检测敏感

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS14028 精子细胞总丙二醛浓度比色法定量检测试剂盒 50次

G&VS14028A 缓冲液（Reagent A）毫升

G&VS14028B 裂解液（Reagent B）毫升

G&VS14028C 抗干扰液（Reagent C）毫升

G&VS14028D 萃取液（Reagent D）毫升

G&VS14028E 反应液（Reagent E）管

G&VS14028F 补充液（Reagent F）毫升

G&VS14028G 稀释液（Reagent G）毫升

G&VS30030.1 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒 200次

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS14006	精子细胞总抗氧化能力（TAC）化学发光法定量检测试剂盒	50次
G&VS14007.1	精子细胞氧化应激活性氧（ROS）NBT比色法定量检测试剂盒	100次
G&VS14007.2	精浆（seminal plasma）氧化应激活性氧（ROS）NBT比色法定量检测试剂盒	100次
G&VS14008.1	精子细胞氧化应激活性氧（ROS）WST-1比色法定量检测试剂盒	50次
G&VS14008.2	精浆（seminal plasma）氧化应激活性氧（ROS）WST-1比色法定量检测试剂盒	50次
G&VS14036.1	精子细胞氧化应激活性氧（ROS）高质荧光检测试剂盒	20次
G&VS14036.2	精浆（seminal plasma）氧化应激活性氧（ROS）高质荧光检测试剂盒	20次
G&VS14037.1	精子细胞氧化应激活性氧（ROS）初级荧光检测试剂盒	100次
G&VS14037.2	精浆（seminal plasma）氧化应激活性氧（ROS）初级荧光检测试剂盒	100次
G&VS14044.1	精子细胞氧化应激活性氧（ROS）超氧阴离子红色荧光检测试剂盒	20次
G&VS14044.2	精浆（seminal plasma）氧化应激活性氧（ROS）超氧阴离子红色荧光检测试剂盒	20次
G&VS14027	精子细胞氧化应激活性氧/抗氧化能力比值检测试剂盒	20次
G&VS14028	精子细胞丙二醛（MDA）含量比色法定量检测试剂盒	50次