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发布时间:2026/9/28 11:31:44 阅读次数:49
精子DNA色霉素A3(chromomycin A3)荧光检测试剂盒产品说明书
主要用途
精子DNA色霉素A3(chromomycin A3)荧光检测试剂是一种旨在使用荧光染料色霉素A3使精蛋白缺失精子呈现亮黄绿色荧光,确定精子核成熟度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种动物或人体精子细胞以及冻存精子细胞。产品严格无菌,即到即用,操作简便,性能稳定,荧光清晰。
技术背景
在男科学(Andrology)中,精子(spermatozoa)分析提供了精子生成(spermatogenesis)、精子寿命、以及生育能力的基础信息。其中精子的活力(vitality)、运动能力(motility)、授精潜力(fertilizing potential)、膜结构或染色质结构完整性(integrity)、核成熟度(nuclear maturity)、顶体反应(acrosomal reaction)功能的评价是精子分析的重要指标,也是决定人工受孕或体外授精(in vitro fertilization;IVF)的重要参数。其中精子核成熟度反映了精子从精原细胞发育为成熟精子过程中组蛋白—精核蛋白取代反应的发生与否,决定精子生育能力的主要因素之一。精液中成熟精子低于10%,是低生育力精液评估界限,也是妇女反复性流产的可能原因之一。使用荧光染料色霉素A3(chromomycin A3)染色技术,是精子核成熟度分析的最常用的方法。基于正常精子细胞在精蛋白(protamine)的存在下,染色质结构紧密完整,精子DNA不易损伤;一旦精蛋白缺失,染色质结构松散,而导致精子功能异常,色霉素A3染色阳性,呈现亮黄绿色荧光(激发波长460至495nm,散发波长510nm),以此定量分析精子精蛋白缺失或核成熟度不足。
产品内容
清理液(Reagent A) 毫升
固着液(Reagent B) 毫升
染色液(Reagent C) 微升
稀释液(Reagent D) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存清理液(Reagent A)在4℃冰箱里,其余的保存在-20℃冰箱里;固着液(Reagent B)具有挥发性,注意密闭瓶盖;染色液(Reagent C)避免光照,有效保证3月
用户自备
1.5毫升离心管:用于样品操作的容器
微型台式离心机:用于样品操作
载玻片和盖玻片:用于精子细胞爬片
(共聚焦)荧光显微镜:用于观察染色的精子细胞
实验步骤
实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的染色液(Reagent A)室温下置入融化,避免光照;稀释液(Reagent D)放进37℃恒温水槽里预热。然后移出xx微升染色液(Reagent C)到新的1.5毫升离心管,加入xx微升稀释液(Reagent D),混匀后,在冰槽里静置,并标记为染色工作液,放在暗室里。然后进行下列操作。
1. 移取新鲜获得的1毫升精液(30分钟至1小时内)到1.5毫升离心管
2. (选择步骤)放进微型台式离心机离心5分钟,速度为600g
3. (选择步骤)小心抽去上清液
4. (选择步骤)加入xx毫升清理液(Reagent A),混匀颗粒群
5. (选择步骤)放进微型台式离心机离心5分钟,速度为600g
6. (选择步骤)小心抽去上清液
7. (选择步骤)重复实验步骤4至6一次
8. (选择步骤)加入xx毫升清理液(Reagent A),混匀颗粒群
9. 即刻移取20微升到洁净的载玻片一端
10. 用盖玻片或另一个载玻片推片
11. 加上xx微升预冷的固着液(Reagent B),覆盖样品表面
12. 4度冰箱里孵育5分钟
13. 小心抽去固着液
14. 空气中晾干
15. 小心加上xx微升上述配制的染色工作液,覆盖样品表面
16. 室温下孵育20分钟,避免光照
17. 小心抽去染色液
18. 小心加上xx微升清理液(Reagent A),覆盖样品表面
19. 小心抽去清理液
20. 盖上盖玻片
21. 即刻在(共聚焦)荧光显微镜下观察并计数(注意:每个视野计数200个精子)
22. 分析结果(参考图)
观察黄绿色荧光:滤波器激发波长460至495nm,散发波长510nm ――阳性可见亮黄绿色荧光(黄色箭头),表明精子精蛋白缺失或核成熟度不足;阴性可见淡黄绿色荧光(橘红色箭头),表明精子精蛋白正常或核成熟度正常
注意事项
1. 本产品为50次操作
2. 操作时须戴手套
3. 固着液(Reagent B)具有挥发性,注意密闭瓶盖
4. 通常色霉素A3染色阳性大于30%表明核成熟度异常;用户可以自行建立评估标准
5. 本公司提供系列发育生物学相关检测试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定荧光清晰
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS14018.2 精子DNA色霉素A3(chromomycin A3)荧光检测试剂盒 50次
G&VS14018.2A 清理液(Reagent A) 毫升
G&VS14018.2B 固着液(Reagent B) 毫升
G&VS14018.2C 染色液(Reagent C) 毫升
G&VS14018.2D 稀释液(Reagent D) 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS14018.1 | 精子DNA吖啶橙(acridine orange)荧光检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS14018.2 | 精子DNA色霉素A3(chromomycin A3)荧光检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS14018.3 | 精子DNA酸性苯胺蓝(aniline blue)染色检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS14018.4 | 精子DNA甲苯胺蓝(toluidine blue)染色检测试剂盒 | 50次 |
| G&VS14018.5 | 精子染色体扩散试验(chromatin dispersion)DAPI蓝色荧光检测试剂盒 | 50次 |
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