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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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植物果胶甲酯酶（pectin methylesterase；PME）活性比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间：2026/10/15 17:12:28 阅读次数：19

植物果胶甲酯酶（pectin methylesterase；PME）活性比色法定量检测试剂盒

产品说明书

主要用途

植物果胶甲酯酶（pectin methylesterase；PME）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过果胶甲酯酶和酒精氧化酶的酶偶联反应系统中产生的甲醛，与N-甲基苯噻唑啉酮-2-腙反应，酸性氧化后，产生蓝色甲簪产物，采用比色法测定其峰值的变化，以此进行测算单位酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种植物组织裂解悬液样品的果胶甲酯酶活性及其抑制剂的检测。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。

技术背景

果胶甲酯酶（pectin methylesterase；PME；EC3.1.1.11），又称为果胶酯酶（pectinesterase），是一种细胞壁相关的果胶水解（pectolytic）酶蛋白，分子量为34－37kDa，存在于所有植物组织中，以及植物病源菌（真菌和细菌）里。果胶（pectin）是细胞壁的主要结构元素，占35％的多糖。果胶是同型聚糖半乳糖醛酸（homogalacturonan；HGA）和鼠李聚糖半乳糖醛酸（rhmnogalacturonan；RG）的复合物。其中80％的同型聚糖半乳糖醛酸为甲基酯化。果胶甲酯酶通过使果胶去酯化（deesterification），产生水溶性的果胶酸（pectic acid）和甲醇。植物果胶甲酯酶分成2型：I型和II型。其功能在于参与植物发育、形态形成、成熟、细胞壁延展和稳固、水果软化脱落和衰老、防止感染等，以及细菌和真菌果胶降解等。果胶甲酯酶常用于果菜汁等的澄清、液化、和水果软化和成熟。基于底物果胶，在果胶甲酯酶的催化下，产生果胶酸和甲醇，进而在酒精氧化酶（alcohol oxidase）的作用下，产生并收集甲醛（aldehyde），同时使用N-甲基苯噻唑啉酮-2-腙（N-methylbenzothiazolinone-2-hydrazone；MBTH），在中性条件下，进行浓缩反应，最后酸化处理，在三价铁氧化剂的参与下，形成蓝色甲簪产物，在分光光度仪下（620nm波长），来定量分析果胶甲酯酶的总活性。果胶甲酯酶酶偶联反应系统为：

产品内容

裂解液（Reagent A）毫升

保存液（Reagent B）毫升

缓冲液（Reagent C）毫升

反应液（Reagent D）微升

底物液（Reagent E）微升

阴性液（Reagent F）毫升

显色液（Reagent G）毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存反应液（Reagent D）和底物液（Reagent E）在－20℃冰箱里，避免反复冻融；其余的保存在4℃冰箱里；显色液（Reagent G）避免光照，有效保证6月

用户自备

15毫升离心管：用于样品处理的容器

1.5毫升离心管：用于样品处理和保存的容器

（微型）台式离心机：用于样品收集

DOUNCE匀浆器：用于裂解组织

培养箱：用于孵育反应物

比色皿：用于比色的容器

分光光度仪：用于比色分析

实验步骤

实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的试剂溶液放进冰槽里融化。然后进行下列操作。

一、 样品准备

1．准备好新鲜植物组织，并秤重以确定组织重量200毫克

2．移入到一个液氮冻存管

3．即刻放进液氮罐过夜

4．次日从液氮罐里取出，即刻（最快速度）用研磨棒碾碎组织成粉末状（注意：切莫使组织冻融）

5．放进一个15毫升锥形离心管

6．加入预冷的xx微升裂解液（Reagent A）

7．涡旋震荡5秒，充分混匀

8．即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器

9．在冰槽里用研磨棒匀化组织（约80下）

10．将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管

11．放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）

12．小心抽去上清液

13．加入预冷的xx微升保存液（Reagent B），混匀

14．移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）

15．即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作

二、测定准备

1．准备好待测样品（例如植物组织裂解萃取液等），置于冰槽里（注意：样品须澄清）

2．设定好分光光度仪（温度为30℃）：波长为620nm，并置零

三、背景测定

1．移取xx微升缓冲液（Reagent C）到新的比色皿

2．加入xx微升反应液（Reagent D）

3．加入xx微升底物液（Reagent E）

4．加入xx微升阴性液（Reagent F）

5．在30℃温度下孵育60分钟

6．加入xx微升显色液（Reagent G），混匀

7．室温下静置30分钟，避免光照

8．加入xx微升阴性液（Reagent F），混匀

9．即刻放进分光光度仪检测：获得背景吸光读数

四、样品活性测定

1．移取xx微升缓冲液（Reagent C）到新的比色皿

2．加入xx微升反应液（Reagent D）

3．加入xx微升底物液（Reagent E）

4．加入10微升待测样品（总量100微克裂解萃取液蛋白）

5．在30℃温度下孵育60分钟

6．加入xx微升显色液（Reagent G），混匀

7．室温下静置30分钟，避免光照

8．加入xx微升稀释液（Reagent F），混匀

9．即刻放进分光光度仪检测：获得样品吸光读数

五、 计算样品活性

注意事项

1．本产品为20次操作，包括背景对照测定

2．操作时，须戴手套

3．系统操作过程中，背景对照测定只需1次

4．比色测定后，比色皿须清洗彻底

5．测定值由低到高变化；反应可持续3小时

6．显示蓝色表明具有酶活性

7．样品读数高于背景读数表明具有酶活性

8．建议待测样本蛋白浓度为100微克/10微升；如果样本酶活性过低或过高，则可以增加或降低样本量；（本公司提供 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）

9．果胶甲酯酶活性单位浓度定义：在30℃温度下，pH 7.5的情况下，每单位酶在单位时间内（每小时）水解产生1微摩尔的甲醇

10．本公司提供系列果胶甲酯酶检测试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定检测准确

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS16038.1 植物果胶甲酯酶活性比色法定量检测试剂盒 20次

G&VS16038.1A 裂解液（Reagent A）毫升

G&VS16038.1B 保存液（Reagent B）毫升

G&VS16038.1C 缓冲液（Reagent C）毫升

G&VS16038.1D 反应液（Reagent D）毫升

G&VS16038.1E 底物液（Reagent E）毫升

G&VS16038.1F 阴性液（Reagent F）毫升

G&VS16038.1G 显色液（Reagent G）毫升

G&VS30030.1 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒 200次

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS16038.1	植物果胶甲酯酶（pectin methylesterase；PME）活性比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS16038.2	真菌果胶甲酯酶（pectin methylesterase；PME）活性比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS16038.3	细菌果胶甲酯酶（pectin methylesterase；PME）活性比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS16039.1	植物果胶甲酯酶（pectin methylesterase；PME）活性荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS16039.2	真菌果胶甲酯酶（pectin methylesterase；PME）活性荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS16039.3	细菌果胶甲酯酶（pectin methylesterase；PME）活性荧光定量检测试剂盒	20次