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发布时间：2026/10/15 17:13:10 阅读次数：18
动物细胞/组织微粒体组分分离试剂盒产品说明书
主要用途
动物细胞/组织微粒体组分分离试剂是一种旨在通过差速离心技术从动物细胞/组织中分离出完整而纯化的内质网小泡碎片混合物组分的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种动物、人体培养细胞或活体组织（肝、肺、肾、肠等组织）的微粒体组分的制备。其制备物产量高，可以被用于各种细胞药物代谢相关的酶活性检测，以及毒理学等的研究。产品不含污染性蛋白酶，即到即用，性能稳定，分离产量和纯度堪称同类产品最佳。
技术背景
微粒体组分来自于片状内质网的小泡，浓缩和分离了细胞色素P450酶（CYP）体系，而呈现棕红色（P450中血红素的存在）。同时含有其它与药物或氧化代谢相关的酶，包括黄素单氧酶（flavin-monooxygenases）、羧酸酯酶（carboxylesterases）、环氧化物水解酶（epoxide hydrolase；EH）、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶（UDP-glucuronosyltrans ferases；UGT）等。人体、大鼠和小鼠的肝组织中含有丰富的P450。
产品内容
清理液（Reagent A） 毫升
平衡液（Reagent B） 毫升
保存液（Reagent C） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存保存液（Reagent C）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月
用户自备
HANK平衡盐缓冲溶液（G&VS12028）或PBS缓冲溶液（G&VS12033）：用于清理细胞
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（G&VS12024）：用于细胞脱离
完全细胞培养液（G&VS12052）：用于中和胰蛋白酶的细胞培养基
50毫升锥形离心管：用于样品操作的容器
15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器
1.5毫升离心管：用于样品操作的容器
4℃超速离心机：用于分离细胞器成分
DOUNCE匀浆器：用于裂解组织细胞
实验步骤
一、 细胞样品制备
1． 准备5至10瓶75cm2细胞培养瓶的细胞（5 X 107），直至细胞生长铺满整个培养表面
2． 分别加入10毫升用户自备的HANK平衡盐缓冲溶液或PBS缓冲溶液到每个细胞培养瓶，覆盖培养瓶表面，
3． 小心抽去清洗液
4． 重复实验步骤2至3一次
5． 加入3毫升用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，铺满整个培养平面
6． 放进37℃培养箱孵育3分种
7． 手击震动培养瓶，使细胞脱落
8． 分别加入10毫升用户自备的完全细胞培养液
9． 全部移入到一个50毫升锥形离心管
10． 放进台式离心机离心10分钟，速度为200g
11． 小心抽去上清液
12． 加入xx毫升预冷的清理液（Reagent A），混匀细胞
13． 放进台式离心机离心10分钟，速度为300g
14． 小心抽去上清液
15． 加入xx毫升预冷的平衡液（Reagent B）
16． 涡旋震荡5秒，充分混匀
17． 即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器
18． 在冰槽里用研磨棒匀化细胞（约80下）
19． 将所有细胞匀浆物移入15毫升锥形离心管
20． 放进4℃微型离心机离心30分钟，速度为9000g
21． 移取上清液到2个新的1.5毫升离心管
22． 放进4℃超速离心机离心60分钟，速度为100000g
23． （选择步骤）小心移去上清液到新的1.5毫升离心管
24． （选择步骤）即刻放进－70℃冰箱里保存或继续后续操作――此为胞浆组分
25． 分别加入xx微升清理液（Reagent A）到含有沉淀颗粒的离心管（注意：不要混匀）
26． 放进4℃超速离心机离心10分钟，速度为100000g
27． 小心抽去上清液
28． 分别加入xx微升保存液（Reagent C）
29． 即刻放进－70℃冰箱里保存
30． 或继续后续操作：蛋白质定量测定（建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）
31． 或酶浓度以及活性测定（建议使用动物细胞/组织细胞色素P450酶体系浓度定量检测试剂盒－G&VS18003）
二、组织样品制备
1． 手术取出动物组织，并秤重以确定1克组织重量（实验前最好使动物空腹12至24小时）
2． （选择步骤）放进预冷的15毫升锥形离心管
3． （选择步骤）加入xx毫升清理液（Reagent A）清洗1次
4． 移入一个液氮冻存管
5． 即刻放入液氮罐过夜
6． 次日从液氮罐里取出，即刻（最快速度）碾碎组织成粉末（注意：切莫使组织冻融）
7． 放进一个15毫升锥形离心管
8． 加入xx毫升预冷的平衡液（Reagent B）
9． 涡旋震荡5秒，充分混匀
10． 即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器
11． 在冰槽里用研磨棒匀化组织（约80下）
12． 将所有组织匀浆物移入15毫升锥形离心管
13． 放进4℃微型离心机离心30分钟，速度为9000g
14． 移取上清液到2个新的1.5毫升离心管
15． 放进4℃超速离心机离心60分钟，速度为100000g
16． （选择步骤）小心移去上清液到新的1.5毫升离心管
17． （选择步骤）即刻放进－70℃冰箱里保存或继续后续操作――此为胞浆组分
18． 分别加入xx微升清理液（Reagent A）到含有沉淀颗粒的离心管（注意：不要混匀）
19． 放进4℃超速离心机离心10分钟，速度为100000g
20． 小心抽去上清液
21． 分别加入xx微升保存液（Reagent C）
22． 即刻放进－70℃冰箱里保存
23． 或继续后续操作：蛋白质定量测定（建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）
24． 或酶浓度以及活性测定（建议使用动物细胞/组织细胞色素P450酶体系浓度定量检测试剂盒－G&VS18003）
注意事项
1． 本产品为50次（1克动物组织或5 X 107细胞）操作
2． 所有操作均须在4℃或以下状态进行
3． 建议使用足够的样品量
4． 胞浆组分可以保存，用于测定谷氨酰胺S转移酶活性（谷氨酰胺S转移酶（GST）活性比色法定量检测试剂盒－G&VS50014）
5． 通常1克动物组织或5 X 107细胞的微粒体组分含量为50毫克蛋白
6． 本产品所获得的微粒体纯度和产量最为理想
7． 纯化的微粒体样品避免反复冻融
8． 本公司提供标准微粒体样品
9． 本公司提供各种P450酶活性检测
10． 本公司提供系列微粒体试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定分离的微粒体组分维持正常活性
3． 本产品经鉴定不含污染性蛋白酶和核酶
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS18002 动物细胞/组织微粒体组分分离试剂盒 50次
G&VS18002A 清理液（Reagent A） 毫升
G&VS18002B 平衡液（Reagent B） 毫升
G&VS18002C 保存液（Reagent C） 毫升
G&VS30030.1 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒 100次
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS18001 | 动物细胞/组织S9组分分离试剂盒 | 50次 |
| G&VS18002 | 动物细胞/组织微粒体组分分离试剂盒 | 50次 |
| G&VS18003 | 动物细胞/组织细胞色素P450酶体系浓度定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS18004.1 | 正常男性人体肝组织S9组分（5毫克/毫升） | 500微升 |
| G&VS18004.2 | 正常女性人体肝组织S9组分（5毫克/毫升） | 500微升 |
| G&VS18005.1 | 吸烟者人体肺组织S9组分（5毫克/毫升） | 500微升 |
| G&VS18005.2 | 非吸烟者人体肺组织S9组分（5毫克/毫升） | 500微升 |
| G&VS18006 | 正常人体肠组织S9组分（5毫克/毫升） | 500微升 |
| G&VS18007 | 正常人体肾组织S9组分（5毫克/毫升） | 500微升 |
| G&VS18008.1 | 正常男性人体肝组织微粒体组分（5毫克/毫升） | 500微升 |
| G&VS18008.2 | 正常女性人体肝组织微粒体组分（5毫克/毫升） | 500微升 |
| G&VS18009.1 | 吸烟者人体肺组织微粒体组分（5毫克/毫升） | 500微升 |
| G&VS18009.2 | 非吸烟者人体肺组织微粒体组分（5毫克/毫升） | 500微升 |
| G&VS18010 | 正常人体肠组织微粒体组分（5毫克/毫升） | 500微升 |
| G&VS18011 | 正常人体肾组织微粒体组分（5毫克/毫升） | 500微升 |
| G&VS18012 | 正常大鼠（Sprague Dawley）肝组织微粒体组分（5 毫克/毫升） | 500微升 |
| G&VS18013 | 正常大鼠（Sprague Dawley）肺组织微粒体组分（5毫克/毫升） | 500微升 |
| G&VS18014 | 正常大鼠（Sprague Dawley）肠组织微粒体组分（5毫克/毫升） | 500微升 |
| G&VS18015 | 正常大鼠（Sprague Dawley）肾组织微粒体组分（5毫克/毫升） | 500微升 |
| G&VS18016 | 细胞色素P450酶（CYP－CROD）总活性荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS18017 | 细胞色素P450亚酶CYP1A1（EROD）活性荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS18018 | 细胞色素P450亚酶CYP1A2（MROD）活性荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS18019 | 细胞色素P450亚酶CYP2B1（PROD）活性荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS18020 | 细胞色素P450亚酶CYP2B2（BROD）活性荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS18021 | 细胞色素P450亚酶CYP2E1（NPH）活性比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS18022 | 细胞色素P450亚酶CYP3A（END）活性比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
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