当前位置:首页>技术专栏
发布时间:2026/10/15 17:16:49 阅读次数:16
纯化增强型绿色荧光蛋白基因重组表达载体(pcDNA3-EGFP)产品说明书
主要用途
纯化增强型绿色荧光蛋白基因重组表达载体(pcDNA3-EGFP)是一种克隆外源性水母(Aequorea victoria)中绿色荧光蛋白基因片段目标,突变处理后装载于真核生物表达载体pcDNA3.1+上的特定基因表达载体。适用于哺乳动物的转基因表达研究。产品即到即用,性能稳定,高拷贝量,表达保证。
技术背景
pcDNA3-EGFP是一种增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein;EGFP)基因重组表达载体。通过克隆水母(Aequorea victoria)中绿色荧光蛋白基因片段(700碱基),预先进行双点突变处理,即苯丙氨酸64(Phe64)为亮氨酸(Leu)和丝氨酸65(Ser65)为苏氨酸(Thr),以强化表达和发光,插入到真核生物表达载体pcDNA3.1+的XhoI和XbaI多克隆位点上,用于哺乳动物细胞或体内表达的报告基因,并可进一步进行基因重组后功能研究的工具。pcDNA3-EGFP是一个6.16kb的载体,在哺乳动物细胞稳态或暂态高度表达(拷贝数为500),发出强力的绿色荧光,并具有氨苄青霉素和新霉素抗性。其载体基本构架如下:
产品内容
载体液(Reagent A) (500纳克/微升) 微升
载体菌液(Reagent B) 毫升(另购)
产品说明书 1份
保存方式
保存在-70℃冰箱里,有效保证6月
用户自备
内切酶:用于载体酶切
克隆试剂盒:用于基因亚克隆
DNA纯化试剂盒:用于连接反应后载体纯化
感受态细菌:用于载体扩增的宿主细胞
实验提示
1. 可以直接转染到293细胞、Hela细胞、CHO细胞等各种细胞株,24小时后观察,可见许多亮绿色荧光
2. 使用2微克载体进行细胞转染;建议使用小量LipofusinX脂质体细胞转染试剂盒-G&VS10026
3. 使用25微克载体进行静脉体内转染;建议使用 SiRNA大量SperfusinX脂质体静脉法动物转染试剂盒-G&VS10055
4. 可以用于pCDNA3.1(+)系列的阴性对照
5. 可以用于构建其它目的基因-EGFP重组表达载体:位于EGFP上游或下游
6. 载体带有新霉素抗性(NeoR),真核细胞筛选可以使用G418(100至800微克/毫升终浓度)
7. 用户可以选择不同的酶切位点,进行基因片段连接反应
8. 可以使用常用感受态细菌,例如DH5α、DH10B、TOP10、JM101、XL1-Blue等进行克隆载体扩增
9. 载体带有氨苄青霉素抗性(AmpR),细菌筛选可以使用氨苄青霉素(50至100微克/毫升终浓度)
注意事项
1. 本产品为10微升(5微克)规格
2. 操作时,须戴手套
3. 可以使用常规克隆连接反应进行亚克隆
4. 测序引物:T7-正向 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'
5. 通用引物: CMV-正向:5’-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3’
BGH-反向:5’-TAGAAGGCACAGTCGAGG-3’
6. 本公司提供系列重组基因载体产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定克隆保证
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
编号 名称 规格
G&VS17024 纯化增强型绿色荧光蛋白基因重组表达载体(pcDNA3-EGFP) 微升
G&VS17024A 载体液(Reagent A) 微升
G&VS17024B 载体菌液(Reagent B) 毫升
| 产品编号 | 载体名称 | 说明 | 规格 |
| G&VS17024 | pcDNA3.1+目的基因 | 真核表达 | 10微克+菌液 |
| G&VS17025 | pBADCE4.1+目的基因 | 双基因真核表达 | 10微克+菌液 |
| G&VS17026 | PGL3 BASIC+目的基因 | 报告基因 | 10微克+菌液 |
| G&VS17027 | pSilencer-NEO+SiRNA | SiRNA表达 | 10微克+菌液 |
| G&VS17028 | pBaBe-PURO+MiRNA | MiRNA表达 | 10微克+菌液 |
| G&VS17029 | pADEASY- pSHUTTLE+目的基因 | 腺病毒 | 10微克+菌液 |
| G&VS17030 | pSHUTTLE+目的基因 | 腺病毒穿梭载体 | 10微克+菌液 |
| G&VS17031 | pLKO.1-TRC+siRNA | 慢病毒(siRNA) | 10微克+菌液 |
| G&VS17032 | pGEX+目的基因 | 细菌表达 | 10微克+菌液 |
| G&VS17033 | pPICZ+目的基因 | 毕赤酵母表达 | 10微克+菌液 |
| G&VS17034 | pYES+目的基因 | 酿酒酵母表达 | 10微克+菌液 |
| G&VS17035 | pGBKT7+目的基因 | 酵母双杂交诱饵 | 10微克+菌液 |
| G&VS17036 | pGADT7+目的基因 | 酵母双杂交猎物 | 10微克+菌液 |
| G&VS17037 | pFASTBAC+目的基因 | SF9昆虫表达 | 10微克+菌液 |
| G&VS17038 | pCAMBIA+目的基因 | 植物表达 | 10微克+菌液 |
| G&VS17039 | pZERO+目的基因 | 克隆基因 | 10微克+菌液 |
上海极威生物科技有限公司 公司地址:上海市崇明县长兴镇潘园公路1800号2号楼9703室
邮箱:435399850@qq.com 电话:021-80186165 手机:16602115336
备案号:沪ICP备15046135号-7


