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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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藻类类囊体（thylakoid）粗提分离试剂盒产品说明书

发布时间：2026/10/15 17:18:27 阅读次数：14

藻类类囊体（thylakoid）粗提分离试剂盒产品说明书

主要用途

藻类类囊体（thylakoid）粗提分离试剂是一种旨在通过物理破壁、化学破膜，以及差速离心处理方法，从藻类细胞中分离出完整的类囊体细胞器的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种藻类细胞类囊体的预制备。产品即到即用，操作简易，性能稳定，无蛋白酶污染，萃取纯度和产量皆高。

技术背景

类囊体（thylakoid）是蓝藻、植物叶绿体和蓝细菌（cyanobacteria）内特定的膜结构（疏水性膜整合蛋白和亲水性膜相关蛋白），一种与真核细菌相同特征的脂质双层（lipid bilayer），但类囊体膜含有丰富的糖脂（glycolipids）。类囊体内含有大量的蛋白质及其复合物，主要参与光依赖性光合成反应，以及蛋白质目标、处理、折叠、氧化应激反应和转译作用。其中整合膜蛋白光系统I复合物（photosystem I complex；PSI）和II复合物（PSII），作用于光采集和光化学能转换，形成光电子传递链，最终产生ATP。类囊体的分离，用于光系统的内容物、装配、寡聚体状态的研究，分析光合成机制，了解其赋予作物生长和生产的意义。通过机械或化学方法破裂细胞，进而差速离心获得叶绿体，然后通过渗透压休克处理获得完整类囊体内活性蛋白成分，最后进行相关蛋白的独立分析。

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

裂解液（Reagent B）毫升

净化液（Reagent C）毫升

强化液（Reagent D）毫升

保存液（Reagent E）毫升

破膜液（Reagent F）毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存裂解液（Reagent B）、净化液（Reagent C）和破膜液（Reagent F）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月

用户自备

15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

50毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

2毫升离心管：用于样品操作的容器

1.5毫升离心管：用于样品操作的容器

20微米尼龙网：用于去除植物裂解残渣

小型漏斗：用于过滤的装置

4℃（微型）台式离心机：用于样品操作

FRENCH PRESS：用于裂解细胞

超声仪：用于裂解细胞

DOUNCE匀浆器：用于裂解细胞

涡旋震荡仪：用于混匀

实验步骤

实验开始前，将试剂盒里的净化液（Reagent C）冻融，然后移出xx毫升净化液（Reagent C）和xx毫升的裂解液（Reagent B）到15毫升锥形离心管里，混匀后，标记为裂解工作液，置入冰槽里备用。然后进行下列操作。

1．准备好新鲜的藻类细胞（暗室中静置16小时），并秤重以确定1克湿重重量

2．（选择步骤）放进预冷的50毫升锥形离心管

3．（选择步骤）加入xx毫升清理液（Reagent A）清洗1次

4．加入预冷的xx毫升裂解工作液

5．涡旋震荡5秒，充分混匀

6．即刻放进预冷的FRENCH PRESS仪器，1000PSI，30分钟

7．或使用超声仪：100瓦功率，1分钟一次，置于冰槽里间隔2分钟，重复15至30次

8．或使用DOUNCE匀浆器。置于冰槽里用匀浆棒匀化细胞块（约80下）（注意：参见注意事项9）

9．准备1个小型漏斗，内衬2个20微米尼龙网，置于50毫升锥形离心管上或真空抽滤管上

10．（选择步骤）将所有组织匀浆液移入到小型漏斗里过滤（注意：可以使用4层纱布替代）

11．放进4℃台式离心机离心5分钟，速度为200g

12．小心移出上清液（注意：不要触碰沉淀物）到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管（如果跳过过滤步骤或上清液含有肉眼可见的残渣，重复离心5分钟一次，速度为200g）——此步骤去除细胞壁残渣、细胞核和未溶解的细胞

13．放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为1000g

14．小心抽去上清液，保留绿色沉淀颗粒，避免光照——此步骤获得叶绿体沉淀物

15．加入预冷的xx毫升强化液（Reagent D）混匀沉淀颗粒

16．放进4℃台式离心机离心5分钟，速度为5000g

17．小心抽去上清液

18．（选择步骤）加入xx至xx微升保存液（Reagent E），混匀颗粒群

19．（选择步骤）转移到1.5毫升离心管

20．（选择步骤）放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为5000g

21．（选择步骤）小心抽去上清液

22．加入xx至xx微升保存液（Reagent E），混匀颗粒群

23．保存在－70℃冰箱里

24．或继续进行下列操作：

操作一、类囊体总蛋白定量检测

1）移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用植物叶绿体总蛋白定量检测试剂盒－G&VS16009）

2）（选择步骤）进行叶绿素定量测定（建议使用纯化叶绿体叶绿素（chlorophyll）含量光度法定量检测试剂盒－G&VS16061.1）：1毫克/毫升叶绿素=10毫克/毫升总蛋白

操作二、可溶性类囊体蛋白电泳

1）加入xx微升破膜液（Reagent F）（注意：50微克叶绿素蛋白）

2）涡旋震荡15秒，混匀颗粒群

3）放进冰槽里孵育20分钟，避免光照

4）放进微型台式离心机离心30分钟，速度为15000g

5）小心移取上清液到新的1.5毫升离心管

6）若暂时不予后续处理，保存在－20℃冰箱里

7）移取20微升（含有5微克叶绿素）上清液到新的1.5毫升离心管

8）加入20微升用户自备的上样液

9）涡旋震荡15秒

10）放进微型台式离心机离心10秒，速度为500g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）

11）（选择步骤）煮沸5分钟（根据变性或非变性电泳，予以选择）

12）上样，进行电泳操作（15毫安）和西方杂交

注意事项

1．本产品为20次操作（1克湿重藻类细胞/次）

2．建议使用新鲜样品，暗室4℃冰箱里过夜

3．样品务必避光，以防止淀粉聚集

4．操作均须在4℃或以下状态下进行

5．操作时，须无菌操作，避免污染母液，尤其是裂解液（Reagent B）和保存液（Reagent E）

6．建议使用足够的细胞量

7．通常匀化次数为80下（或细胞颗粒块状消失为止）达到80％的细胞裂解为理想状态，但不同的细胞类型会存在差异。用户可以通过显微镜观察3微升匀浆物的组织细胞裂解程度：完整细胞呈现发亮的圆环。低于50％可以增加匀化次数

8．通常1克湿重细胞可以获得100微克类囊体蛋白，约500个以上蛋白

9．类囊体蛋白须放在－70℃冰箱里储存备用，避免反复冻融

10．本公司提供系列植物类囊体分析技术产品

11．

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定无蛋白酶污染

3．本产品经鉴定萃取产量和纯化程度高

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS16081.1 藻类类囊体（thylakoid）粗提分离试剂盒 20次

G&VS16081.1A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS16081.1B 裂解液（Reagent B）毫升

G&VS16081.1C 净化液（Reagent C）毫升

G&VS16081.1D 强化液（Reagent D）毫升

G&VS16081.1E 保存液（Reagent E）毫升

G&VS16081.1F 破膜液（Reagent F）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS16080.1	植物类囊体（thylakoid）粗提分离试剂盒	20次
G&VS16080.2	植物活性类囊体（thylakoid）分离试剂盒	20次
G&VS16080.3	植物高质纯化类囊体（thylakoid）分离试剂盒	10次
G&VS16081.1	藻类类囊体（thylakoid）粗提分离试剂盒	20次
G&VS16081.2	藻类活性类囊体（thylakoid）分离试剂盒	20次
G&VS16081.3	藻类高质纯化类囊体（thylakoid）分离试剂盒	10次