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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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拟南芥叶片原生质细胞分离试剂盒产品说明书

发布时间：2026/10/15 17:24:23 阅读次数：21

拟南芥叶片原生质细胞分离试剂盒产品说明书

主要用途

拟南芥叶片原生质细胞分离试剂是一种旨在使用生物酶方法，有效去除植物细胞壁，然后通过差速离心，分离并收集原生质体细胞的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。可直接用于植物细胞转染、细胞内标记检测、细胞生理活动，包括细胞壁合成、细胞分裂、分化、光合成、钙离子信号调节、离子通道、应急和激素反应等研究。其适用于拟南芥叶肉（mesophyll）组织的原生质体细胞的分离纯化。产品即到即用，性能稳定，操作便捷，萃取产量和纯度皆佳。

技术背景

植物细胞通常由一层坚固的细胞壁保护。细胞壁由纤维素（celluolose）组成，提供植物的结构支撑。细胞壁可以使用真菌纤维素酶（cellulase）和离析酶（macerozyme）处理，去除细胞壁，产生膜性原生质体（protoplast），而释放出来。原生质细胞保留和维持完整植物的生理反应和生物学活性，由此可以直接进行植物细胞转染、细胞内标记检测、细胞生理活动，包括细胞壁合成、细胞分裂、分化、光合成、钙离子信号调节、离子通道、应急和激素反应等研究。

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

酶解液（Reagent B）毫升

缓冲液（Reagent C）毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存酶解液（Reagent B）在-20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月

用户自备

50毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

1.5毫升离心管：用于样品保存的容器

台式离心机：用于样品操作

75微米尼龙网：用于去除植物碎片

血细胞计数器：用于细胞计数

光学显微镜：用于观察原生质细胞

实验步骤

1．准备好20片新鲜健康的叶片组织样品（注意：3至4周约有5至7片叶片的拟南芥植物，未曾开花，叶片宽大）

2．（选择步骤）放进50毫升锥形离心管

3．（选择步骤）加入xx毫升清理液（Reagent A）清洗1次

4．用刀片将叶片纵向切成1毫米光滑细条（注意：避免压碎、撕拉、破口）

5．转移到50毫升锥形离心管

6．加入xx毫升酶解液（Reagent B），浸泡所有样品

7．室温下静置孵育3小时，避免光照（注意：液体呈现绿色）

8．移取5微升显微镜下观察：可见50微米大小的圆形细胞

9．小心加入xx毫升缓冲液（Reagent C），混匀

10．准备1个小型漏斗，内衬75微米尼龙网，置于50毫升锥形离心管上

11．将所有组织消化液移入到小型漏斗里过滤

12．放进4℃台式离心机离心3分钟，速度为180g

13．小心抽去上清液

14．小心加入xx毫升缓冲液（Reagent C），混匀

15．进4℃台式离心机离心3分钟，速度为180g

16．小心抽去上清液

17．加入xx毫升缓冲液（Reagent C），混匀

18．移出10微升到血细胞计数器里计数

19．调整细胞浓度为2 X 10⁵细胞/毫升

20．转移到1.5毫升离心管里

21．放进冰槽里准备后续：转染、细胞生理与生化实验（注意：不宜置放过夜）

注意事项

1．本产品为5次（100毫克/次）操作

2．实际操作的叶片数量或组织重量与试剂使用量按比例调整

3．操作时，须戴手套

4．操作时，避免污染母液，尤其是酶解液（Reagent B）

5．通常3小时酶解孵育可以获得80％的原生质体细胞。不同的叶片组织可以进行适当调整，但不宜过长（16至20小时）孵育

6． 100毫克组织约20片叶片，可以获得10⁶原生质细胞

7．细胞计数时乘上稀释倍数10⁴。标准血细胞计数器（Hemocytometer）的计算方法是：

1毫米方块的细胞计数X 10⁴（稀释倍数）＝实际细胞数/毫升

8．如果样品原生质细胞得率过低，可能原因为：1）数量不足：选择饱满宽大叶片；2）叶片质量欠佳：改善种植条件；3）消化处理不足：增加酶解时间

9．建议使用显微镜进行原生质细胞观察；参考图像如下（400X）

10．建议制备产物在30分钟后进行转染为佳

11．本公司提供系列植物原生质制备试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定维持植物组织细胞生物学活性

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS16030.1 拟南芥叶片原生质细胞分离试剂盒 20次

G&VS16030.1A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS16030.1B 酶解液（Reagent B）毫升

G&VS16030.1C 缓冲液（Reagent C）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS16030.1	拟南芥叶片原生质细胞分离试剂盒	5次
G&VS16030.2	玉米叶片原生质细胞分离试剂盒	5次
G&VS16030.3	水稻叶片原生质细胞分离试剂盒	5次
G&VS16030.4	大麦叶片原生质细胞分离试剂盒	5次
G&VS16030.5	烟草叶片原生质细胞分离试剂盒	5次
G&VS16031	植物花粉原生质细胞分离试剂盒	5次
G&VS16032	植物根瘤原生质细胞分离试剂盒	5次