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植物总吲哚-3- 乙酸(IAA)比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间:2026/10/15 17:25:09      阅读次数:17

 

植物总吲哚-3- 乙酸(IAA)比色法定量检测试剂盒产品说明书

主要用途

植物总吲哚-3- 乙酸(IAA) 比色法定量检测试剂是一种旨在通过化学方法萃取处理, 进而在酸性 条件下, 与氯化铁反应, 产生红色产物, 即采用比色法测算样品中吲哚-3- 乙酸总含量的权威而经典的技术 方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种植物样品中,包括叶片、种子、 根尖等吲哚-3- 乙酸的总含量检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。

技术背景

吲哚-3- 乙酸(Indole-3-acetic acid;IAA)是植物激素(phytohormone),即生长素(auxin)家属成员中最 重要的天然激素,由植物嫩叶和茎尖(apex)细胞中合成,来自于色氨酸,成为吲哚,包含羧甲基基团    (carboxymethyl group) 的杂环化合物(heterocyclic compound)。其分子式为C10H9NO2 ,分子量是175.184。    吲哚-3- 乙酸具有诱导植物生长发育的细胞伸展、分裂、趋光性(phototropism)、果子发育、根基形成等功 能。基于吲哚-3- 乙酸与氯化铁(ferric chloride)和高氯酸(HCIO4)反应,生成红色产物,在分光光度仪 下(波长530nm)产生吸光峰值的变化,来分析样品中吲哚-3- 乙酸的含量,其反应方式为:


产品内容

萃取液(Reagent A)

溶解液(Reagent B)

清理液(Reagent C)

酸性液(Reagent D)

反应液(Reagent E)

标准液(Reagent F)

产品说明书

 

保存方式

 

 

保存 萃取液(Reagent A)和 标准液(Reagent F)在-20℃冰箱里,其余的保存在 4℃ 冰箱里;试剂具有腐蚀性和挥发性,注意操作安全和密封;有效保证 6 月

用户自备

15 毫升锥形离心管:用于待测和标准样品制备的容器

50 毫升:用于样品制备的容器

台式离心机:用于样品制备

涡旋震荡仪:用于样本混匀

浓缩离心仪:用于去除液体和浓缩样品

比色皿:用于比色分析的容器

分光光度仪:用于比色分析

 

实验步骤

一、 样品准备

1.  精确秤取 5 克新鲜植物样品(注意: 在安全绿色灯光下进行)

2.  即刻放入液氮罐过夜

3.  次日从液氮罐里取出,即刻(最快速度)碾碎组织成粉末(注意: 切莫使组织冻融)

4.  放进一个 15 毫升锥形离心管

5.  加入    毫升预冷的 萃取液(Reagent A)

6.  涡旋震荡 10 秒,充分混匀

7.  在 4℃温度下孵育 30 分钟,其间每隔 10 分钟涡旋震荡 10 秒

8.  放进 4℃台式离心机离心 10 分钟,速度为 10000g

9.  移取上清液到新的 50 毫升锥形离心管

10.重复实验步骤 5 至 9 二次(注意: 总计30  毫升上清液)

11.放进浓缩离心仪离心,直至 50 毫升萃取液甩干

12.加入    毫升 溶解液(Reagent B),混匀

13.加入    毫升 清理液(Reagent C)

14.涡旋震荡 15 秒,充分混匀

15.在室温下静置 5 分钟,直至液体分层

16.抽掉上层液相

17.重复实验步骤 13 至 16 二次

18.放进浓缩离心仪离心,直至样品浓缩至 500 微升

19.加入适量的 酸性液(Reagent D) 至    毫升总量,混匀

20.放进冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保存

 

二、标准样品制备

1.      准备好 5 个 15 毫升锥形离心管,标记为 1 至 5 号管

2.      分别加入    毫升 酸性液(Reagent D) 到 2 至 5 号管

3.      移取    毫升 标准液(Reagent F) 到 1 号管, 混匀

4.      小心移取    毫升 1 号管的 标准液(Reagent F) 到 2 号管, 混匀

5.      小心移取    毫升 2 号管稀释的标准液(Reagent F) 到 3 号管,混匀

6.      小心移取    毫升 3 号管稀释的 标准液(Reagent F) 到 4 号管,混匀

7.      将 1 至 5 号管放进冰槽里备用,避免光照;标准管浓度见下表

管号

酸性液(Reagent D)

标准液(Reagent F)

标准吲哚-3- 乙酸含量

1

--

毫升

微克

2

毫升

毫升 1 号管

微克

3

毫升

毫升 2 号管

微克

4

毫升

毫升 3 号管

微克

5

微升

0

0

 

三、标准样品测定

1.      分别移取    毫升 反应液(Reagent E) 到上述配制的 5 个 标准液(Reagent F) 测试管里

2.      涡旋震荡 5 秒

3.      室温下孵育 30 分钟,避免光照

4.      转移到比色皿

5.      即刻放进分光光度仪检测:波长 530nm

6.      获得吸光单位(OD)

7.      构建标准曲线:纵座标(Y 轴)为吸光单位(OD);横座标(X 轴) 为标准吲哚-3- 乙酸含量(微克)

 

四、  样品测定

1.  移取    毫升 反应液(Reagent E) 到上述配制的待测样品管里

2.  涡旋震荡 5 秒

3.  室温下孵育 30 分钟,避免光照

4.  转移到比色皿

5.  即刻放进分光光度仪检测:波长 530nm

6.  获得吸光单位(OD)

7.  根据标准曲线计算样品吲哚-3- 乙酸含量

 

五、吲哚-3- 乙酸含量计算

 

注意事项

1 .  本产品为 25 次操作,包括标准样品测定

2 .  本产品的测定范围在 0.2 微克至 45 微克

3 .  本产品萃取回收率达 95%

4 .  待测样品须新鲜,避免光照

5 .  操作时,须戴手套

6 .  试剂具有腐蚀性,注意操作安全

7 .  试剂具有挥发性,注意密封

8 .  样品制备后,建议在 2 小时内检测

9 .  比色测定孵育时,避免光照

10.比色测定后,比色皿须清洗彻底

11.如果待测样品浓度过高或过低,可以调整起始样品量,但注意计算公式调整

12.通常新鲜根尖组织的吲哚-3- 乙酸的含量为 10 至 50 纳克/克组织

13.本公司提供系列植物激素检测试剂产品


质量标准

1 .  本产品经鉴定性能稳定

2 .  本产品经鉴定检测敏感

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后, 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证 说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告) 与本公司联系,并将该产品退回, 经检验确系产品质量所致, 本公司负责更换产品。如系使用者错误操作 所致,本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK ,  RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

 

订购信息

编号

名称

规格

G&VS16029. 1

植物总吲哚-3- 乙酸(IAA)比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS16029. 1A

萃取液(Reagent A)

500 毫升

G&VS16029. 1B

溶解液(Reagent B)

500 毫升

G&VS16029. 1C

清理液(Reagent C)

500 毫升

G&VS16029. 1D

酸性液(Reagent D)

100 毫升

G&VS16029. 1E

反应液(Reagent E)

100 毫升

G&VS16029. 1F

标准液(Reagent F)

50 毫升

 

产品编号

名称

规格

G&VS16018. 1

植物总吲哚-3- 乙酸(IAA)荧光定量检测试剂盒(包括萃取)

20 次

G&VS16018.2

植物游离吲哚-3- 乙酸(IAA) 荧光定量检测试剂盒(包括萃取)

20 次

G&VS16018.3

植物结合吲哚-3- 乙酸(IAA) 荧光定量检测试剂盒(包括萃取)

20 次

G&VS16018.4

植物弥散吲哚-3- 乙酸(IAA) 荧光定量检测试剂盒(包括萃取)

20 次

G&VS16029. 1

植物总吲哚-3- 乙酸(IAA)比色法定量检测试剂盒(包括萃取)

20 次

G&VS16029.2

植物游离吲哚-3- 乙酸(IAA) 比色法定量检测试剂盒(包括萃取)

20 次

G&VS16029.3

植物结合吲哚-3- 乙酸(IAA) 比色法定量检测试剂盒(包括萃取)

20 次

G&VS16029.4

植物弥散吲哚-3- 乙酸(IAA) 比色法定量检测试剂盒(包括萃取)

20 次

 

 


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