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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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植物花粉原生质细胞分离试剂盒产品说明书

发布时间：2026/10/15 17:34:56 阅读次数：41

植物花粉原生质细胞分离试剂盒产品说明书

主要用途

植物花粉原生质细胞分离试剂是一种旨在使用生物酶方法，有效去除花粉细胞壁，然后通过离心，分离并收集原生质体细胞的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。可直接用于植物细胞转染、体细胞融合杂交、细胞内标记检测、细胞生理活动等研究。其适用于各种单子叶（monocotyledons）或双子叶（dicotyledons）植物成熟花粉颗粒（grain），包括烟草、马铃薯等原生质体细胞的分离纯化。产品即到即用，性能稳定，操作便捷，萃取产量和纯度皆佳。

技术背景

植物花粉具有高度雕塑性、复杂化学分子构成的细胞壁，以及始终相同的染色体数目等特征。植物花粉原生质体细胞的分离成为研究的有效应用工具，包括花粉个体发生学（ontogeny）、生理学、突变、体细胞融合杂交、细胞调整、单倍体系统、基因操作和植物病毒感染、植物育种繁殖（breeding）等。花粉颗粒通常由坚固的细胞壁保护，内壁（intine）为果胶纤维层（pectocellulosic）和外壁（exine）为孢子花粉素（sporopollenin）。通过使用真菌纤维素酶（cellulase）、半纤维素酶（semicellulase）和离析酶（macerozyme）处理，使之质壁分离和花粉管脱落，产生膜性原生质体（protoplast），予以释放出来。原生质细胞保留和维持完整植物的生理反应和生物学活性，由此可以直接进行植物细胞转染、细胞内标记检测、细胞生理活动等后续实验分析。

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

酶解液（Reagent B）毫升

保存液（Reagent C）毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存酶解液（Reagent B）在-20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月

用户自备

70%乙醇：用于植物消毒

2%次氯酸钠：用于植物消毒

无菌解剖针或解剖刀：用于获取花粉粒

50毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

1.5毫升离心管：用于样品保存的容器

台式离心机：用于样品操作

80微米尼龙网：用于去除植物碎片

血细胞计数器：用于细胞计数

光学显微镜：用于观察原生质细胞

实验步骤

1．准备好10枚新鲜健康的花蕾样品

2．放进50毫升锥形离心管

3．（选择步骤）放进4℃冰箱静置4天

4．加入30毫升用户自备的70%乙醇浸泡孵育30秒

5．小心抽去70%乙醇

6．加入30毫升用户自备的2%次氯酸钠浸泡孵育15分钟

7．小心抽去2%次氯酸钠

8．加入50毫升无菌无离子水清洗4次

9．使用无菌解剖针或解剖刀压碎花蕾和花药，获取花粉粒

10．放进新的50毫升锥形离心管

11．加入xx毫升清理液（Reagent A）

12．准备1个小型漏斗，内衬80微米尼龙网，置于50毫升锥形离心管上

13．将所有花粉粒液体移入到小型漏斗里过滤

14．过滤后液体放进台式离心机离心2分钟，速度为200g

15．小心抽去上清液

16．加入xx毫升酶解液（Reagent B），浸泡混匀

17． 28℃温度下孵育3小时，轻微震荡，避免光照

18．移取5微升显微镜下观察：可见50微米大小的圆形细胞

19．放进台式离心机离心5分钟，速度为150g

20．小心抽去上清液

21．加入xx毫升保存液（Reagent C），混匀

22．放进4℃台式离心机离心5分钟，速度为150g

23．小心抽去上清液

24．重复实验步骤21至24三次

25．加入xx毫升保存液（Reagent C），混匀

26．移出10微升到血细胞计数器里计数

27．转移到1.5毫升离心管里

28．（选择步骤）检测原生质体细胞活力（建议使用二乙酸荧光素（Fluorescein diacetate）植物细胞繁殖测定试剂盒—G&VS10358或酚藏花红（PHENOSAFRANINE）植物细胞繁殖测定试剂盒—G&VS10133）

29．放进冰槽里准备后续：转染、细胞生理与生化实验（注意：不宜置放过夜）

注意事项

1．本产品为5次（10枚花蕾/次）操作

2．实际操作的花蕾数量与试剂使用量按比例调整

3．操作时，须戴手套

4．操作时，须无菌操作，避免污染母液，尤其是酶解液（Reagent B）

5．通常3小时酶解孵育可以获得50至80％的原生质体细胞。不同的花粉颗粒可以进行适当调整，但不宜过长（2至4小时）孵育

6． 10枚花蕾，可以获得10⁶原生质体细胞

7．细胞计数时乘上稀释倍数10⁴。标准血细胞计数器（Hemocytometer）的计算方法是：

1毫米方块的细胞计数X 10⁴（稀释倍数）＝实际细胞数/毫升

8．如果样品原生质细胞得率过低，可能原因为：1）数量不足：选择成熟饱满的花蕾花药；2）花蕾质量欠佳：改善种植条件；3）消化处理不足：增加酶解时间

9．建议使用显微镜进行花粉原生质体细胞观察；参考图像如下（400X）

10．建议制备产物在30分钟后进行转染为佳

11．本公司提供系列植物原生质制备试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定维持植物组织细胞生物学活性

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS16031 植物花粉原生质细胞分离试剂盒 5次

G&VS16031A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS16031B 酶解液（Reagent B）毫升

G&VS16031C 保存液（Reagent C）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS16030.1	拟南芥叶片原生质细胞分离试剂盒	5次
G&VS16030.2	玉米叶片原生质细胞分离试剂盒	5次
G&VS16030.3	水稻叶片原生质细胞分离试剂盒	5次
G&VS16030.4	大麦叶片原生质细胞分离试剂盒	5次
G&VS16030.5	烟草叶片原生质细胞分离试剂盒	5次
G&VS16031	植物花粉原生质细胞分离试剂盒	5次
G&VS16032	植物根瘤原生质细胞分离试剂盒	5次
G&VS16043	植物培养细胞原生质细胞分离试剂盒	5次