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发布时间:2026/10/15 17:35:29 阅读次数:33
水稻叶片原生质细胞分离试剂盒产品说明书
主要用途
水稻叶片原生质细胞分离试剂是一种旨在使用生物酶方法,有效去除植物细胞壁,然后通过差速离心,分离并收集原生质体细胞的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。可直接用于植物细胞转染、细胞内标记检测、细胞生理活动,包括细胞壁合成、细胞分裂、分化、光合成、钙离子信号调节、离子通道、应急和激素反应等研究。其适用于水稻叶肉(mesophyll)组织的原生质体细胞的分离纯化。产品即到即用,性能稳定,操作便捷,萃取产量和纯度皆佳。
技术背景
植物细胞通常由一层坚固的细胞壁保护。细胞壁由纤维素(celluolose)组成,提供植物的结构支撑。细胞壁可以使用真菌纤维素酶(cellulase)和离析酶(macerozyme)处理,去除细胞壁,产生膜性原生质体(protoplast),而释放出来。原生质细胞保留和维持完整植物的生理反应和生物学活性,由此可以直接进行植物细胞转染、细胞内标记检测、细胞生理活动,包括细胞壁合成、细胞分裂、分化、光合成、钙离子信号调节、离子通道、应急和激素反应等研究。
产品内容
清理液(Reagent A) 毫升
酶解液(Reagent B) 毫升
缓冲液(Reagent C) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存酶解液(Reagent B)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;有效保证6月
用户自备
50毫升锥形离心管:用于样品操作的容器
1.5毫升离心管:用于样品保存的容器
台式离心机:用于样品操作
75微米尼龙网:用于去除植物碎片
血细胞计数器:用于细胞计数
光学显微镜:用于观察原生质细胞
实验步骤
1. 准备好1克新鲜健康,且无菌处理的水稻叶片组织样品
2. (选择步骤)放进50毫升锥形离心管
3. (选择步骤)加入xx毫升清理液(Reagent A)清洗1次
4. 用刀片将叶片纵向切成5毫米光滑细条(注意:避免压碎、撕拉、破口)
5. 转移到50毫升锥形离心管
6. 加入xx毫升酶解液(Reagent B),浸泡所有样品
7. 放进30℃恒温摇床孵育6小时,速度为100RPM,避免光照
8. 移取5微升显微镜下观察:可见50微米大小的圆形细胞
9. 小心加入xx毫升缓冲液(Reagent C),混匀
10. 准备1个小型漏斗,内衬80微米尼龙网,置于50毫升锥形离心管上
11. 将所有组织消化液移入到小型漏斗里过滤
12. 放进4℃台式离心机离心5分钟,速度为300g
13. 小心抽去上清液
14. 小心加入xx毫升缓冲液(Reagent C),混匀
15. 放进4℃台式离心机离心5分钟,速度为300g
16. 小心抽去上清液
17. 加入xx毫升缓冲液(Reagent C),混匀
18. 移出10微升到血细胞计数器里计数
19. 调整细胞浓度为2 X 106细胞/毫升
20. 转移到1.5毫升离心管里
21. 放进冰槽里准备后续:转染、细胞生理与生化实验(注意:不宜置放过夜)
注意事项
1. 本产品为5次(1克/次)操作
2. 操作时,须戴手套
3. 操作时,避免污染母液,尤其是酶解液(Reagent B)
4. 通常3至6小时酶解孵育可以获得80%的原生质体细胞
5. 1克组织,可以获得107原生质细胞
6. 细胞计数时乘上稀释倍数104。标准血细胞计数器(Hemocytometer)的计算方法是:
1毫米方块的细胞计数X 104(稀释倍数)=实际细胞数/毫升
7. 如果样品原生质细胞得率过低,可能原因为:1)数量不足:选择饱满宽大叶片;2)叶片质量欠佳:改善种植条件;3)消化处理不足:增加酶解时间
8. 建议制备产物在30分钟后进行转染为佳
9. 本公司提供系列植物原生质制备试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定维持植物组织细胞生物学活性
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS16030.3 水稻叶片原生质细胞分离试剂盒 5次
G&VS16030.3A 清理液(Reagent A) 毫升
G&VS16030.3B 酶解液(Reagent B) 毫升
G&VS16030.3C 缓冲液(Reagent C) 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS16030.1 | 拟南芥叶片原生质细胞分离试剂盒 | 5次 |
| G&VS16030.2 | 玉米叶片原生质细胞分离试剂盒 | 5次 |
| G&VS16030.3 | 水稻叶片原生质细胞分离试剂盒 | 5次 |
| G&VS16030.4 | 大麦叶片原生质细胞分离试剂盒 | 5次 |
| G&VS16030.5 | 烟草叶片原生质细胞分离试剂盒 | 5次 |
| G&VS16031 | 植物花粉原生质细胞分离试剂盒 | 5次 |
| G&VS16032 | 植物根瘤原生质细胞分离试剂盒 | 5次 |
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