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细胞收货处理方式

发布时间：2024/6/21 12:19:10 阅读次数：151

	发货形式	T25 瓶	冻存管
1	快递保存温度	室温	液氮长期保存或-80 度 3 天以内
2	初步平衡	T25 瓶表面消毒后，放培养箱平衡复温 2h 以上	无须平衡，直接放入-80 冰箱或者液氮罐保存
3	处理方式	吸走大部分培养基离心备用，留 10- 12ml 培养基，拍照并观察细胞。密度 80%以上即可吸走培养基消化传代，若密度低于 80%可以留 10-12 ml 继续培养至细胞密度 80%以上再进行传代培养	37 度水浴摇晃尽快融化细胞，直接在冻存管内将细胞离心。离心转速以离心力 150g(约 900rpm)左右， 1min 为宜，弃上清，沉淀用新鲜培养基重悬后接种到 10cm培养皿，显微镜下观察细胞并拍照，24h 后换液一次
4	接种方式	T25 传代首次建议 1:2 传代，即瓶 T25 传成两瓶	一管细胞建议接种到 10cm培养皿或者 T25 瓶
5	注意事项	若细胞出现漂浮，可以先收集瓶内细胞悬液，离心收集细胞，用胰酶消化后重新接种到新的培养瓶内，由于发货会出现漂浮的细胞贴壁本身较弱，建议使用高贴附培养瓶或提前包被过的培养瓶培养细胞发货 T25 瓶装满大约有 75ml 培养基，静置后上部不含细胞的培养基可以收集起来， 1500rpm 离心 5min后，取上清 4 度保存，用于培养细胞，以平稳过渡到客户自己的培养基	收货时若发现干冰化完，检查冻存管是否融化，若已融化需直接离心细胞接种观察，若未融化可以将细胞按正常步骤保存，以上情况及时反馈干冰发货的细胞只能在-80 保存 3 天左右，长时间保存会出现活性下降。干冰发货均为两支，客户先复苏一支，若复苏失败及时联系我方并在我方指导下复苏第二支。若客户同时复苏两支均状态不佳，我方将不提供免费售后服务

特殊情况：

1. 若培养瓶或者冻存管出现破碎或漏液情况，及时拍照联系销售反馈，按指导进行进一步处理。若只是外包装破损一般不影响培养瓶和冻存管，请放心使用。

2. 若无法观察到细胞，建议收集细胞培养基，1200rpm 离心 5min，观察细胞沉淀量，并用少量培养基重悬沉淀后，取部分悬液放到计数板或者载玻片上观察细胞。

3. 部分细胞增殖较快，发货细胞量较多时，培养基可能出现颜色变黄现象。继续培养使用此类培养基时，需要及时观察培养基颜色变化，缩短培养基换液周期，并每瓶多加 2-3ml 培养基。

4. 收货当天不处理细胞时，T25 瓶可以消毒拆封口膜后不拧开瓶盖放培养箱静置过夜，但不建议超过 24h；冻存管可以直接放液氮长期保存或-80 度 3 天以内，必须一周内复苏一只培养检查，否则将超过一周售后期。