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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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生物样品柠檬酸比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间：2026/11/4 11:18:12 阅读次数：4

主要用途

生物样品柠檬酸比色法定量检测试剂是一种旨在通过柠檬酸裂合酶反应系统测定生物样品中的酮酸和显色剂苯肼的反应产物酮酸苯酮，即采用比色法测定酮酸苯酮峰值的变化，进行测算柠檬酸含量的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种生物样品，包括血清、尿液、体液、细胞萃取液等柠檬酸的检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。

技术背景

柠檬酸(citric acid)是重要的代谢中间产物。在人体代谢过程中，柠檬酸通过肾脏代谢和分泌，并阻止晶体或钙复合物形成。作为出色的酸化、调味和防腐特性，柠檬酸存在于各种自然和加工食品与饮料中。同时也用于造纸和酿酒等。在柠檬酸裂合酶反应系统中，柠檬酸被裂解产生短链酮酸(α－keto acid)，包括草酰乙酸(oxaloacetate)和丙酮酸(pyruvate)；进一步酮酸与苯肼(phenylhydrazine)快速反应产生苯酮复合物－酮酸苯酮(α－keto acid－phenylhydrazone)，而强烈吸收紫外光(330nm 波长)，由此定量分析柠檬酸的含量，其反应方式为：

产品内容

缓冲液(Reagent A)

底色液(Reagent B)

阴性液(Reagent C)

酶促液(Reagent D)

产品说明书

保存方式

保存在－20℃冰箱里，底色液(Reagent B)避免光照，有效保证 6 月

用户自备

无离子水：用于溶解样品

过滤膜：用于样品澄清处理

1.5 毫升离心管：用于制备样品的容器

比色皿或酶标板：用于比色的容器

分光光度仪或酶标仪：用于比色分析

实验步骤

实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂置入冰槽里融化。同时设定好分光光度仪(温度为25℃)：波长 330nm，并置零。然后进行下列操作。

一、(选择操作)样品准备(注意： 参见注意事项4)

1. 移取 1 毫升待测样品到 1.5 毫升离心管

2. 放进 80℃恒温水槽或干式恒温仪孵育 20 分钟

3. 放进微型台式离心机离心 5 分钟，速度为 16000g (或 13000RPM，例如 eppendorf 5415)

4. 移取上清液到新的 1.5 毫升离心管

5. (选择步骤)可以加入适量的用户自备的无离子水稀释(如果柠檬酸浓度过高)

6. (选择步骤) 0.2 微米过滤膜过滤(如果离心处理后，样品仍然不清澈)

7. 静置备用

二、样品测定

1. 移取 xx 微升缓冲液(Reagent A) 到新的比色皿

2. 加入 xx 微升底色液(Reagent B)

3. 加入 20 微升上述制备的待测样品(注意：样品须清澈)

4. 上下倾倒数次，混匀

5. 室温下(温度为 25℃)静置 15 分钟，避免光照

6. 即刻放进分光光度仪，置零

7. 取出比色皿，加入 xx 微升酶促液(Reagent D)

8. 上下倾倒数次，混匀

9. 室温下(温度为 25℃)静置 30 分钟，避免光照

10. 即刻放进分光光度仪检测，此为样品读数

11. 计算样品浓度

(样品读数 X 样品稀释倍数) ÷[xx (样品容量；毫升) X xx (毫摩尔吸光系数) ]＝微摩尔/毫升÷ (样品重量)毫克/毫升＝微摩尔/毫克

三、酶标板测定

1. 在 96 孔酶标板上做好相应标记

2. 分别移取 xx 微升缓冲液(Reagent A) 到相应孔中

3. 按下表分别加入：

	背景对照孔	待测样品孔
底色液(Reagent B)	微升	微升
阴性液(Reagent C)	微升	――
待测样品	――	微升

4. 轻轻摇动酶标板，混匀

5. 室温下(温度为 25℃)静置 15 分钟，避免光照

6. 即刻放进酶标仪检测(此为初始读数)

7. 取出酶标板，分别加入 xx 微升酶促液(Reagent D)

8. 轻轻摇动酶标板，混匀

9. 室温下(温度为 25℃)静置 30 分钟，避免光照

10. 即刻放进酶标仪检测(此为终点读数)

11. 实际读数＝终点读数－初始读数

12. 浓度计算

[ (样品实际读数－背景实际读数) X 样品稀释倍数 X 0.25 (体系容量；毫升) ]÷[xx (样品容量；毫升) X xx (毫摩尔吸光系数) X xx (孔径；厘米]＝微摩尔/毫升÷ (样品重量)毫克/毫升＝微摩尔/毫克

注意事项

1. 本产品为 20 次(比色皿)和 80 次(酶标板)操作

2. 操作时，须戴手套

3. 本产品检测范围在 0.08 至 8 微摩尔/毫升柠檬酸

4. 如果样品含有过高的脂质和蛋白成分和过深的色素，建议进行样品澄清处理(去色、去脂、去蛋白、去气体等)；本公司提供柠檬酸待测样品处理试剂盒－G&VS19020.9

5. 样品须澄清，至关重要

6. 比色测定后，比色皿须清洗彻底

7. 如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度

8. 建议使用比色皿方法检测

9. 本公司提供系列营养学元素检测试剂产品

质量标准

本产品经鉴定性能稳定

本产品经鉴定检测敏感

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式(实验报告) 与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK ， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

G&VS19020.8	生物样品柠檬酸比色法定量检测试剂盒	20/80 次
G&VS19020.8A	缓冲液(Reagent A)	100 毫升
G&VS19020.8B	底色液(Reagent B)	5 毫升
G&VS19020.8C	阴性液(Reagent C)	10 毫升
G&VS19020.8D	酶促液(Reagent D)	5 毫升
G&VS19020.9	柠檬酸待测样品处理试剂盒	20 次

产品编号	名称	规格
G&VS19020. 1	果菜柠檬酸比色法定量检测试剂盒	20 次
G&VS19020.2	饮料柠檬酸比色法定量检测试剂盒	20 次
G&VS19020.3	糖果柠檬酸比色法定量检测试剂盒	20 次
G&VS19020.4	食物柠檬酸比色法定量检测试剂盒	20 次
G&VS19020.5	酒类柠檬酸比色法定量检测试剂盒	20 次
G&VS19020.6	食油柠檬酸比色法定量检测试剂盒	20 次
G&VS19020.7	纸类柠檬酸比色法定量检测试剂盒	20 次
G&VS19020.8	生物样品柠檬酸比色法定量检测试剂盒	20 次
G&VS19020.9	柠檬酸待测样品处理试剂盒	20 次